일반생물학실험 | 세균 배양
기초 배지인 LB배지의 기술을 익히고 핸드폰액정의 세균을 배지에 배양하여 세균을 관찰한다.
세균
세균이란, 단세포성 생물로 가장 작고 하등한 미생물이며 박테리아라고도 불린다. 온도에 따라, 산소유무에 따라, 종류가 나눠진다. 세균을 다룰때엔 오염에 가장 신경써야 하며 무균조작을 항상 중요시 생각해야한다. 여기서 무균조작이란 목적물이 미생물에 의해서 오염되지 않게 하는 것이다. 무균조작법에는 물리적인 방법과 화학적인 방법으로 나뉘는데 이번 실험에서는 물리적인 방법인 오토클레이브(고압증기멸균기, Autoclave)를 사용하였다. 오토클레이브란, 고온·고압하에서 합성·분해·승화·추출 등의 화학처리를 하는 내열·내압성 용기이다. 사용 전에 바닥에 있는 열선에 물이 적당히 잠기도록 물을 채운 후 사용한다.
실험 방법
1. 실험 과정
1) bacto-tryptone 1g, yeast extract 0.5g, NaCl 1g, bacto-agar 1.5g와 증류수를 넣고 100ml에 맞춘다.
2) 시약과 증류수를 잘 섞어 호일로 감싸고 멸균 테이프를 붙인 후 오토클레이브에 넣어 멸균시킨다. 이때 멸균테이프가 검은색으로 변하면 멸균이 다 되었다는 뜻이다.
3) 오토클레이브에 넣어 121ºC에 도달하면 그때부터 15분간 살균시킨다.
4) 멸균된 배지를 상온에 두어 식힌 후, 페트리 접시에 3분의 1정도 부은 다음 식힌다.
5) 알코올램프로 멸균된 면봉으로 핸드폰 액정을 문지른 후에 Dirty라고 표기된 부분에 스트레킹(streaking) 한다. (아래 사진 첨부)
6) 37℃인큐베이터에 넣어 12시간동안 배양시킨다.
7) 콜로니(colony)가 뜬 것을 확인한다.
8) 결과 확인 후 파라필름을 감아 냉동보관한다.