반응형 일반생물학실험 | 동물세포의 유사분열 염색체 관찰 TIP 두 가지 방법을 통해 동물세포의 유사분열 염색체를 관찰할 수 있다. 실험 방법1. Preparation of Mouse Metaphase Chromosomes1) 배양된 B16F10의 media에 colchicine(10㎎/㎖)을 4㎍/㎖이 되도록 첨가한다. ⇒ ( Total medium 10㎖에 4㎕) 2) 2시간 동안 37℃ incubator에서 배양한다. 3) Media를 제거하고 1X PBS 5㎖로 washing한 후 0.5% Trypsin-EDTA를 1㎖ 처리한다. 4) 3∼5분간 37℃에 둔 후 media(+FBS) 4㎖을 넣고 pipetting하여 cell을 50㎖ conical tube로 옮겨준다. 5) 상온의800rpm에서 3분간 원심 분리한다. 6) Media을 제.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 5. 17. 일반생물학실험 | 절지동물의 해부학적 특징 및 기능 TIP 절지동물을 해부하여 각 기관의 위치와 형태를 확인하고 기능을 파악할 수 있다. 실험 배경본 실험에서 해부한 꽃게는 절지동물문 갑각류 십각목 꽃게과인 동물이다. 절지 동물 중에서 몇몇 유형은 수생 환경에 살고 다른 유형은 육상 환경에 거주 한다. 절지동물문에 사는 동물들은 단백질에 결합된 키틴으로 구성된 관절 골격 덮개가 있는 특징이 있다. 몸이 일반적으로 마디로 나누어져 있어 마디 에는 한 쌍의 관절 부속지가 있어서 절지동물이라고 불린다. 절지동물문에서 삼엽충아문, 협각아문, 육각아문, 갑각아문, 다지아문으로 나누어져 있다. 삼엽충아문은 대표적으로 삼엽충류가 있으며 고생대에 가장 많이 번성했다. 지금은 완전히 전멸했다. 육각아문에 들어있는 동물들은 육각류라고 말한다. 육각아문은 다리가 여섯 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 5. 13. 일반생물학실험 | 분광광도법 TIP 1. 분광 광도법을 이해하고 Lambert-Beer법칙을 학습한다. 2. 고도 산화법의 일종인 광촉매 반응을 통해 반응속도를 측정한다. 고급산화법(Advanced oxidation process : AOP) 강력한 살균 및 산화력을 가지는 OH 라디칼을 중간생성물질로 생성하여 수중 오염물질인 유기물 및 독성물질을 산화 처리하는, 보다 진보된 기술. 산화제에 자외선을 쬐어 OH 라디칼을 생성시키는 방법으로 UV/오존, UV/과산화수소 2가지의 방법과 광촉매를 이용하는 방법이 있다. 본 실험에서는 광촉매에 자외선을 쬐는 AOP를 사용한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시료의 용액을 만드는 동안 분광광도기의 전원을 켠 후, 스위치를 올려 약 15분 동안 예열시킨다. 2) 메스플라스크에 1L의 증류수.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 3. 25. 일반생물학실험 | 어류의 해부 어류 어류의 화석이 존재하는 가장 오래 된 지층은 고생대 오르도비스기 말기(약 4억년 전)이며, 이 무렵에 이미 어류는 무악어류 ·판피어류 ·연골어류 ·경골어류로 나누어졌다. 이것은 어류가 지구상에 출현한 후 상당히 오랜 시간이 지났음을 나타내는데, 이로부터 미루어 지구상의 어류 출현시기는 고생대 초기 이전(약 5억년 전)으로 추정된다. 화석으로 출토되는 것 중 가장 오래 된 것은 무악어류 중에서 갑주어라고 불리는 두갑류·익갑류인데, 머리가 골질판으로 덮여 있으며, 오르도비스기에서 실루리아기를 거쳐 데본기까지 번성했다가 그 후 절멸하였다. 무악어류 중에서 투구 모양의 골질판이 없는 무리가 원구류인데, 이 무리는 현재까지 생존하고 있다. 판피어류의 화석은 실루리아기와 데본기에 걸친 지층에서 이빨과 비늘 등.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 3. 20. 일반생물학실험 | Chromatography 실험 배경 종이 크로마토그래피에 정지상과 이동상은 무엇이며 분리 원리는 어떤 것인지 혼합색소의 분리를 통해 알아보고, Rf 값을 알아내면서 극성의 개념을 이해한다. 엽록소가 가지고 있는 각각의 색소를 분리해서 확인하고 이들이 흡수하는 파장의 영역에 대해서 알아본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시금치에서 잎맥을 제거해서 5g정도 얻는다. 2) 시금치를 막자사발에 넣고 액체질소를 부은 뒤 열심히 간다. 3) 어느 정도 가루가 되었다 싶으면 100%아세톤을 부어 처리한다. 4) 피펫으로 3의 용액을 소형 튜브에 넣고 원심분리기로 3분 동안 7000rpm으로 돌린다. 5) 원심분리 후에 가라앉지 않은 위층의 용액을 피펫으로 따로 분리하고 그 용액을 얼음 속에 넣는다.(엽록소의 파괴를 막기 위해서) 6) 그.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 3. 18. 일반생물학실험 | Plasmid DNA - 전기영동 TIP 1. 제한효소를 통해 절단된 plasmid DNA를 전기영동을 통해 확인한다. 2. 전기영동을 함으로써 그 원리와 방법을 익히도록 한다. DNA 전기영동 DNA를 크기에 따라 분리하기 위해 DNA 전기영동을 하는 것이다. DNA는 기본골격에 있는 인산기 때문에 전기영동에 사용되는 완충용액 속에서 (-)전하를 띠고 있어서 두 전극 사이에 위치해 있을 때 50V~100V 정도의 전류를 흘려주게 되면 (+)극 쪽으로 움직이게 된다. 이 때 gel은 그물모양으로 엮여있기 때문에 DNA 분자가 gel을 통과하는 속도는 분자량이 커질수록 늦어지며 젤의 밀도가 클수록 늦어진다. 또한 DNA의 분자량이 같더라도 구조에 따라서 움직이는 속도가 다르다. 예를 들면 supercoil된 DNA는 선형 DNA 보다 빠르.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 2. 6. 일반생물학실험 | 전기 영동 실험 배경 전기영동의 원리는 단백질 분자들은 표면의 여러 부위에 양전하 또는 음전하를 띄고 있어, 단백질 혼합액 속에 전극을 설치하고 직류전압을 가하면 음극 또는 양극으로 이동하게 된다. 이처럼 전기장 안에서 하전된 입자가 양극 또는 음극 쪽으로 이동하는 현상을 전기영동이라고 한다. 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양, 용익의 pH와 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이온의 세기, 지지체의 종류등 여러가지 요인에 따라 결정된다. 이러한 성질에 의해 전기영동법은 아미노산, 뉴클레오티드, 단백질 등과 같은 하전된 물질들을 분리하거나 분석하는데 매우 효과적인 방법으로 이용된다. 전기영동법은 여러 종류가 있는데, 첫 번째로는 이동계면 전기영동법이다. 두 번째는 띠 전기영동법이다. 이 방법은 적.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 1. 22. 유전학실험 | Restriction enzyme digestion Treatment of Restriction Enzymes 제한효소를 이용한 절단은 적절한 반응조건하에서 DNA와 효소를 incubation시킴으로써 간단히 수행할 수 있다. 염 농도, pH, 반응온도, DNA 및 효소의 양 등이 효소반응의 변수로 작용한다. 제한효소의 1 Unit는 지정된 buffer와 지정한 온도에서 1시간 동안 λ DNA 1㎍을 완전히 분해하는데 필요한 양을 나타낸다. 1) 멸균한 200㎕ microtube에 다음과 같은 비율로 잘 혼합한다. 2) 37℃ incubator에서 약 2시간 정도 반응시킨다. 3) 전기영동하여 확인한다. 실험 방법 1. Protocol 1) 37℃ incubator에서 약 2시간 반응시킨 후 전기영동하여 확인한다. Plasmid DNA 16㎕ 10X R .. Biology/유전학 2024. 1. 9. 유전학실험 | gDNA extraction from human oral epithelial cells Genomic DNA Genomic DNA는 유전체(genome)을 구성하고 있는 긴 DNA 서열으로, 개체가 가지고 있는 유전 정보를 포함하는 모든 DNA를 총칭한다. 좁은 의미로는 플라스미드(plasmid) DNA 와 구분하여 세포 내 염색체(chromosome)를 구성하는 염색체 DNA를 의미하기도 한다. 일반적으로 진핵세포의 genomic DNA는 염색체가 위치하고 있는 세포핵(nucleus) 내부에 위치하며 긴 선형 염기 서열으로 구성되어 있다. Genomic DNA와 플라스미드 DNA는 서로 대비되는 성질을 가진다. 먼저 두 DNA는 서로 다른 구조를 가지는데, 플라스미드 DNA는 원형(circular) DNA 구조를 가지고 genomic DNA는 긴 선형(linear) DNA 구조를 가진다... Biology/유전학 2024. 1. 8. 일반생물학실험 | 코아세르베이트 형성 TIP 코아세르베이트가 간단한 물질 대사를 하며 일정 크기 이상이 되면 둘로 분열되는 것과 같은 무생물이지만 생물의 특징을 실험하여, 코아세르베이트에서 생명체가 유래되었다는 가설이 적합한지 확인해 본다. 코아세르베이트의 종류와 특징 코아세르베이트는 젤라틴 용액과 알코올, 폴리스티렌의 벤젠용액과 메틸알코올 등으로 형성되는 단순 코아세르베이트, 젤라틴과 아라비아고무의 수용액과 같은 2종 이상의 하전입자의 접근에 의한 복합 코아세르베이트로 분류된다. 단순 코아세르베이트의 안정성은 액적의 경계면 표면장력에 의해 결정되는데, 단백질 및 기타의 고분자 물질의 다성분 복합 코아세르베이트에서는 안정성의 요인이 매우 복잡해 온도와 pH 등 정전기적 인자 외에 수소결합과 소수성결합 등도 관여한다. 코아세르베이트는 일반적으.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 11. 10. 일반생물학실험 | 삼투와 물질이동 실험 개요 달팽이가 소금과 만나면 달팽이는 거품을 일으키다 점점 쪼그라든다. 이때 거품이 나는 이유는 달팽이가 일종의 자기 보호를 하는 것이지만 결국 달팽이는 말라 비틀어져 죽는다. 이 현상은 농도가 낮은 물질의 수분이 농도가 높은 물질로 이동하는 삼투압의 원리 때문이다. 달팽이는 자신의 몸체의 농도가 소금보다 낮기 때문에 투과성이 좋은 얇은 피부를 통해 몸체의 수분이 소금으로 이동되어 자신은 말라 비틀어지게 되는 것이다. 이러한 물질 이동은 동물 세포와 식물 세포 둘 다 일어날 수 있다. 세포에는 선택적 투과성을 띠는 세포막이 있기 때문에 상대적으로 입자가 큰 아미노산이나 화학 물질은 통과할 수 없지만 입자가 작은 물은 통과할 수 있고 이런 원리를 통해 물은 두 물질 사이를 이동할 수 있는 것이다. 삼.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 11. 9. 일반생물학실험 | 삼투와 물질의 이동 TIP 식물세포(양파 표피세포)와 동물세포(적혈구 세포)를 이용하여 세포를 둘러싸고 있는 수용액의 주성분인 물의 이동에 따른 세포의 변화를 현미경으로 관찰하여 삼투의 개념을 이해하고 식물세포와 동물세포 각각 삼투 현상의 차이를 구분한다. 세포막(원형질막) 1. 역할 각각의 세포는 원형질막에 의해 둘러싸여 있어 외부 환경으로부터 세포의 내용물들을 분리하게 된다. 막은 문지기의 역할을 하는데 어떤 물질은 세포 안이나 혹은 밖으로 이동하게 되며, 외부의 환경으로부터의 화학적인 신호를 세포 안으로 전달하는 기능을 하게 된다. 또한 막은 특정한 물질만을 통과시키는 선택적 투과막으로 작용한다. 2. 구조 원형질막의 기능을 나타낼 수 있는 능력은 막의 구조와 밀접하게 연관되어 있다. 막의 구조는 두 겹의 지질층에 단.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 11. 7. 일반생물학실험 | 삼투 삼투현상 반투과성 막을 경계로 농도가 다른 두 용액이 있을 때 저농도에서 고농도로 용매가 확산에 의해 이동하는 현상으로, 에너지를 소비하지 않는다. 반투과성 막 세포막, 셀로판 막, 달걀 속껍질 등과 같이 물과 같은 용매는 투과시키지만 용질은 특성에 따라 투과시키지 않는 막으로 미세한 구멍이 뚫려 있다. 용액 속의 입자 중에서 막의 구멍보다 크기가 작은 물질은 반투과성 막을 투과할 수 있으나 막의 구멍보다 크기가 큰 물질은 반투과성 막을 투과할 수 없다. 실험 방법 실험 1. 1) 0M, 0.3M, 1M NaCl 수용액을 준비하고 각각의 용액에 직육면체로 자른 3g의 감자를 넣는다. 2) 15분, 30분, 45분이 지났을 때 감자를 꺼내 질량을 측정한다. 실험 2. 1) 양파를 정사각형모양 4개로 자른 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 11. 6. 일반생물학실험 | 미생물 탁도측정법(turbidimetry determination) TIP 미생물의 농도가 증가함에 따라 미생물 배양액의 흡광도가 증가하므로 60㎚에서 흡광계를 사용하여 OD(Optical Density)를 측정하여 미생물의 배양 정도를 가늠할 수 있다. 탁도 측정법 액체 배양 시 미생물의 성장을 측정하는 방법이다. 미생물이 액체배지에서 자라면서 세포 수 증가와 세포군 형성으로 인해 배양액이 탁해진다. 미생물의 탁도측정법에서 배양액은 UV-Vis(UV-visible spectrophotometry) 등 분광 광도계를 사용하여 배양액의 탁도에 의해 산란 되거나 흡수되는 빛의 양을 측정한다. 이때 산란 되거나 흡수된 빛의 양은 배양액 내 미생물의 농도에 정비례하므로 배양액의 미생물 수를 가늠할 수 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) UV-Vis의 전원을 켜고 탁도 측정을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 10. 30. 생화학실험 | 형질 전환 실험 개요 형질전환이란 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방법을 개발해내었다. 형질전환에서 가장 필요한 것은 제한효소이다. 제한효소는 하등한 원핵세포들이 면역 작용을 하기 위해 가지고 있는 효소로 한 제한효소는 한 특정 염기서열을 잘라내.. Biology/생화학 2023. 10. 25. 일반생물학실험 | 양서류(개구리)의 외형 관찰 및 해부 TIP 1. 개구리의 외부 구조와 기능을 이해한다. 2. 개구리의 내부 구조와 기능을 이해한다. 3. 다른 동물과 비교할 때 나타나는 개구리(양서류)의 특징을 이해한다. 개구리 외부 특징 머리(head) 와 몸통(trunk)으로 구분 목은 없다. 머리의 앞쪽에는 넓은 입, 호흡시 코덮개 (nasal flaps) 에 덮히는 좌우 2개의 콧구멍(외비공) 그리고 눈 과 귀가 있다. 1. 머리 ① 눈 : 안구와 밀접하게 붙어있는 위 눈꺼풀, 눈의 운동에 따라 움직이는 아래 눈꺼풀에 의해 보호, 아래 눈꺼풀 밑에는 투명하고 얇으며 운동성이 좋은 셋째 눈꺼풀(순막)이 있다. ② 귀 : 둥근 판상의 고막이 눈의 뒤쪽에 있다. 고막은 황갈색의 투명한 막으로 되어있다. 바깥귀가 없다. ③ 코 : 코 덮개가 있는 외비공이.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 9. 13. 일반생물학실험 | 초파리의 침샘 염색체 관찰 TIP 초파리 침샘 염색체 슬라이드를 제작하는 방법을 배우고 염색체 모양과 특징을 이해한다. 초파리 거대 염색체 초파리의 거대 염색체는 다른 세포의 염색체에 비해 약 100∼200배 정도 크다. 이를 거대염색체라고 부르기도 한다. 파리류 유충의 침샘 혹은 초파리의 정모에 있는 세포핵에서 관찰이 가능하다. 침샘세포에서 염색체는 8개로 보이는 것이 아니라 각 상동염색체가 접합하여 마치 하나의 염색체처럼 되어 있어 4쌍이 아니라 4개로 보이며, 또한 4종류의 염색체가 동원체에서 붙어있다. X염색체와 4번째 염색체는 동원체가 염색체의 한쪽 끝에 놓여있으며, 2번째와 3번째 염색체는 동원체로부터 양쪽으로 염색체 팔이 뻗어있다. 염색체에 결실이나 복제가 일어나면 침샘 염색체가 고리를 만든다. 4쌍의 각 염색체에 특.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 9. 11. 일반생물학실험 | 초파리 침샘 염색체 관찰 TIP 초파리 침샘 염색체 슬라이드를 제작하는 방법을 배우고 염색체 모양과 특징을 이해한다. 초파리의 침샘염색체 세포질 분열이 일어나지 않고 염색체의 복제만 일어나 다사염색체를 형성한다. 침샘염색체는 파리목에서 발견되는 것으로, 그들의 침샘에서, 그 중에서도 간기의 핵에서 볼 수 있는 거대한 염색체이다. 그 크기가 크다는 이유로 거대염색체라고도 한다. 일반적인 염색체보다 100∼200배 정도 크고, 정모에 있는 세포핵, 식도나 소장의 표피, 신경세포 등에서도 관찰할 수 있다. 종종 식물에서도 발견된다. 특히 파리목의 침샘염색체에는 약 1024개에서 많게는 2000개의 염색 분체 섬유가 존재하며, 섬유 하나 하나의 직경은 15∼25㎚에 달한다. 일반적인 세포의 크기가 마이크로미터단위인 것을 감안하면, 그러.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 9. 6. 이전 1 2 3 4 ··· 41 다음 반응형