반응형 일반화학실험 | Catalase(캐털레이즈)의 반응속도 TIP 1. 압력 센서를 사용하여 기질인 과산화수소의 농도를 0.5, 1, 2, 3, 4, 6%로 바꾸어 가면서 감자 즙에 들어 있는 캐털레이즈(catalase)에 의한 반응 속도를 측정해본다. 2. 화학의 특성을 가장 잘 나타내는 키워드를 들라고 할 때 빼놓을 수 없는 단어 중 하나가 촉매(catalyst)이다. 세포 내에서 일어나는 생화학 반응의 촉매를 효소(enzyme)라고 부른다. 효소는 분자량이 수만에 달하는 단백질이다. 효소가 결합하는 기질의 농도와 반응속도에 대한 관계는 다음과 같이 쓸 수 있는데 이를 Lineweaver-Burk equation이라고 불리는 이 편리한 식은 화학에서 가장 많이 사용되는 식의 하나이다. 화학은 물질의 변화를 다루는 과학이다. DNA 복제도, 식물이 잎에서 받아.. Chemistry/일반화학 2020. 10. 12. 일반생물학실험 | 애기장대의 발아 TIP 애기장대 를 이용하여 춘화 처리가 발아 에 미치는 영향을 알아본다. 애기장대가 모델식물인 이유는 첫째, 발아해서 다음 씨가 맺힐 때까지의 1세대가 6주로 매우 짧아서 빠른 시간 내에 많은 개체수를 얻을 수 있고 실험 결과를 빠르게 낼 수 있기 때문이다. 둘째는 화학물질을 쓰면 다양한 형태의 돌연변이체를 간단히 얻을 수 있어 다양한 실험을 진행할 수 있기 때문이다. 셋째, 애기장대는 크기가 작아서 유리용기 안에서도 쉽게 재배할 수가 있다. 마지막으로 Genome사이즈가 작고 서열이 완전히 해독되어 있어서 연구하기 쉽기 때문이다. 특히 이 실험에서 사용되는 이유는 애기장대가 4~5일이면 발아되기 때문에 춘화처리가 미치는 영향을 빠르게 알 수 있기 때문이다. 모든 생물은 자신의 유전자를 후대의 세대로 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 9. 9. 식품화학실험 | 효소에 의한 가수분해와 색 변화 TIP 1. 효소 작용 : pH와 온도에 따른 단백질 분해효소 pepsin의 활성을 알 수 있다. 2. 효소에 의한 갈변 : 산화효소에 의한 갈변을 이해하고 효소적 갈변에 영향을 미치는 요인에 대해 알 수 있다. 효소 작용 효소에 따라 활성을 일으키는 pH와 온도는 각각 다르게 나타나는데 단백질 분해효소인 pepsin이 pH 2와 40℃ 이하에서 가장 활성을 일으키는 것을 이용하여 난백용액을 pepsin과 산으로 처리한것, pepsin만 넣은것, 2N HCl만 넣은것을 각각 40℃에서 가열하였다. 그 결과 pepsin과 HCl을 함께 넣은 것만 단백질이 소화된것을 확인 할 수 있었고 pepsin만 넣은것은 미약한 반응을, HCl만 넣은것은 아무반응을 일으키지 않았다. 효소에 의한 갈변 효소에 의한 갈변이.. Engineering/식품 영양 | 공학 2020. 8. 24. 물리화학실험 | 설탕의 반전 반응 - 화학반응 속도론 TIP 효소와 수소이온 촉매에 의한 설탕의 반전반응의 반응속도들을 이해하고 이 반응에 대한 반응속도 상수를 결정하려한다 설탕의 편광회전 현상 반응속도를 공부하는데 꼭 고려하여야 할 복잡한 반응이 한 가지 있는데 그것은 반응이 진행함에 따라 생기는 생성물의 편광회전현상이다. D-Glucose에는 광학활성도가 서로 다른 두개의 이성질체가 있다. 그러나 효소 촉매 수크로오스 반전반응에서 생기는 D-Glucose는 두개 이성질체의 평형 혼합물이 아니다. 따라서 이 두 번째로 일어나는 반전과정을 반응속도 해석에 포함 시키거나 또는 적당한 분석과정을 거쳐 편광회전 현상의 영향을 제거 시켜야만 한다. 본 실험에서는 반응물과 생성물의 광학 활성도가 다르기 때문에 반응의 진행 과정을 시간에 대한 회전 각도를 측정함으로서.. Chemistry/물리화학 2020. 7. 15. 생화학개론 | 효소 TIP 1. 효소의 성질 (1) 효소의 특이성 (2) 효소의 단위 (3) 효소의 반응특성 2 효소단백질의 형상 (1) 단량체 효소 (2) 소량체 효소 (3) 다효소 복합체 3 효소의 분류 (1) EC 1군 산화환원효소 (2) EC 2군 전이효소 (3) EC 3군 가수분해효소 (4) EC 4군 분해효소 (5) EC 5군 이성질화효소 (6) EC 6군 연결효소 4 효소에 의한 대사조절 (1) 효소량 조절 (2) 효소활성 조절 생세포에서 만들어지는 효소(enzyme)는 단순단백질, 복합단백질 또는 올리고머단백질 등으로 되어있다. 효소는 기질에 대하여 특이적으로 작용(기질특이성)하고 열역학적으로 가능한 특정 화학반응만을 수용액 중의 희박기질에 대하여 온화한 온도나 pH 조건에서 부산물을 생성하지 않고(작용특이성.. Biology/생화학 2020. 4. 25. 일반생물학실험 | Measure α-Amylase Activity TIP 1. 침에 의한 효소 작용과 그 성분을 유추할 수 있다. 2. Maltose 표준 곡선을 이용하여 침에 들어있는 효소의 양을 구할 수 있다. 표준 곡선 (standard curve, master curve, type curve) 대표적인 여러 모델에 대하여 모델 변수의 변화에 따라서 모델의 반응을 이론적으로 계산한 곡선이다. 표준 곡선은 실제 탐사 자료를 해석하고자 할 때 실제 자료와의 비교를 위해 사용되며 대체적으로 가로축과 세로축은 정규화 된 값으로 만들어진다. 아밀라아제 (amylase) 침 1ℓ 속에는 약 0.4g의 아밀라아제가 들어 있는데, 침이나 위액 속의 아밀라아제는 녹말을 가수분해하여 Maltose를 생성하므로 소화작용에 있어서 꼭 필요하다. 아밀라아제는 고등동물뿐만 아니라, 고등식.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 4. 19. 식품가공학실험 | 쌀의 저장기간에 따른 차이 - 햅쌀과 묵은쌀의 구별 TIP 햅쌀과 묵은쌀을 구별하는 방법의 원리를 이해한다. G.O.P 시약처리법은 guaiacol 1%용액(O), 그리고 p-phenylene diamine 0.2%용액(P)을 차례로 사용하는 방법으로, 신선한 햅쌀은 씨눈과 씨젖 부위가 자색으로 변하지만 약간 오래된 쌀은 배유부만 색깔이 나타나며 너무 오래 묵은 쌀이나 변질된 쌀은 전혀 색깔이 나타나지 않는다. 쌀의 종류 1. 햅쌀(the year's crop of rice) : 그 해에 새로 난 쌀 2. 묵은 쌀(staled rice) 수확 후 장기간 저장되어 오래된 쌀로 행정적으로는 미곡 연도를 경과하여 다음 연도산미가 수확된 뒤의 작년도 산미를 가리킨다. 고미화(古米化)에 의해 생물적 변화(발아능이나 효소활성의 저하), 화학적 변화(전분, 단백질, .. Engineering/식품 영양 | 공학 2020. 4. 15. 생화학실험 | Enzyme assay TIP 340㎚에서의 NADH 흡광도 변화를 통해 LDH 활성도를 확인 할 수 있다. Enzyme 각종 화학반응에서 자신은 변화하지 않으나 반응속도를 빠르게 하는 단백질을 말한다. 즉, 단백질로 만들어진 촉매라고 할 수 있다. 단백질로 이루어져 있기 때문에 무기촉매와는 달리 온도나 pH(수소이온농도) 등 환경 요인에 의하여 기능이 크게 영향을 받는다. 즉, 모든 효소는 특정한 온도 범위 내에서 가장 활발하게 작용한다. 대개의 효소는 35∼45℃에서 활성이 가장 크다. 하지만 온도가 그 범위를 넘어서면, 오히려 활성이 떨어진다. 온도가 올라가면 일반적으로 화학반응 속도가 커지고 효소의 촉매작용도 커지지만, 온도가 일정 범위를 넘으면 효소의 단백질 분자구조가 변형을 일으켜 촉매기능이 떨어지기 때문이다. 또한.. Biology/생화학 2020. 4. 14. 일반생물학실험 | 카탈라아제 효소 TIP 우리 몸의 생체 촉매인 효소의 기작에 대해 이해하고, 시료에 따라 다르게 나타나는 효소의 반응에 대해 알 수 있다. 또한 온도가 효소의 활성에 어떤 영향을 미치는지 알아본다. 효소의 역할 효소는 생체의 에너지 발생 반응, 단백질 합성, 근수축, 난자와 정자의 형성, 세포 분열, 유전자 복제 등 모든 생명 현상을 매개한다. 효소는 우리 일상생활과도 대단히 밀접한 관계가 있다. 술은 효모에 의한 발효로 얻어지지만 실은 효모의 효소에 의하여 이루어지는 것으로 이 효소만 있으면 발효가 일어나 술을 빚을 수 있다. 효소는 세제로도 이용되고 있고, 요즘 각광받는 유전공학도 여러 효소에 의해 가능하다. 또한 혈당량 측정 등 각종 시약에도 이용된다. 효소는 기질과 결합하여 기질을 산화 (oxidase) 또는 환.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 3. 26. 생화학실험 | pH에 따른 Lipase의 분해도 측정 TIP 효소인 Lipase는 pH, 온도등에 요인에 따라 활성도의 차이가 있다. 그중 pH에 따른 Lipase의 활성도를 측정하고, 그중 가장 optimal한 pH를 알아본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Phosphate buffer의 pH에 따라 Phosphate buffer 9500㎕, p-NPB 300㎕, Lipase bead 1ea를 넣어 3개의 sample을 만든다. buffer P-NPB Lipase bead pH6 9500㎕ 300㎕ 1ea pH7 9500㎕ 300㎕ 1ea pH8 9500㎕ 300㎕ 1ea 2) 위의 3개의 sample을 incubator 25°C에서 반응시킨다. 3) 각각의 sample을 10분, 20분, 30분, 40분 에 500㎕씩 취한 후 각각의 pH에 맞는 p.. Biology/생화학 2020. 3. 23. 식품가공학실험 | F0 Monitor를 이용한 동결시간 예측 비교 분석 냉동은 식품에 함유된 수분 중 미생물, 효소, 화학적 반응 등에 이용 가능한 수분을 불활성화시키는 과정으로 식품의 저장기간을 연장하기 위한 수단으로 이용되고 있다. 냉동이란 보통 식품을 빙점 이하의 온도에서 처리하는 것을 말하는데 이때 식품은 많은 변화를 하게 된다. 천연식품 중에서 특히 수분이 60~90%의 범위에 있는 육류, 수산물, 청과물 등을 동결하는 일이 많은데 이들 식품을 동결하면 온도는 급격히 직선적으로 하강하여 식품의 빙결점에 도달하게 된다. 이때부터 식품에 함유된 수분이 얼기 시작하는데, 식품의 빙결점은 식품의 종류에 따라 차이가 있으며 대략 –1 ~ -2℃의 범위에 있는 경우가 대부분이다. 이때, 동결시간, 즉 동결속도는 냉동제품의 품질 뿐만아니라 동결장치의 선택과 동결공정의 경제성에도.. Engineering/식품 영양 | 공학 2020. 3. 22. 일반생물학실험 | 카탈라아제의 활성도 TIP 1. 생명체 내부에 들어있는 과산화수소 분해효소인 카탈라아제의 기능을 이해하고 이를 실험을 통해 확인한다. 2. 효소의 최적 온도를 이해하고 실험을 통해 온도에 따라 효소의 활성도가 변함을 알아보자. 카탈라아제의 작용 1811년 과산화수소를 발견한 Louis Jacques Thenard에 의해 발견되어 1900년 Oscar Loew 가 카탈라아제라는 이름을 붙였다. 1969년 카탈라아제의 아미노산 배열이 규명되고 3차원 구조가 밝혀진 것은 1981년이다. 산소에 노출되어 살고 있는 거의 모든 호기성 세포의 퍼옥시좀에 존재한다. 카탈라아제의 완벽한 촉매 기전은 규명되지 않았지만 과산화수소를 2단계의 과정을 거쳐 신속하게 과산화 수소를 분해한다. 첫째 과산화 수소 한 분자가 결합하여 분해된다. 산소 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 3. 22. 일반생물학실험 | 효소반응실험 - 카탈라아제 반응 TIP 1. 효소의 정의와 반응 과정을 설명할 수 있다. 2. 효소반응(카탈라아제 반응)을 이해할 수 있다. 카탈라아제 효소의 한 종류. 효소란 어떤 물질이 여러개로 나누어질 때 이를 도와주는 물질로, 자신은 변하지 않는 것을 말한다. 카탈라아제는 과산화수소가 물과 산소로 나누어질 때 이를 도와주는 물질이다. 이 물질은 산소를 싫어하는 성질이 있는 세균을 제외한 거의 모든 생물체 안에 들어 있다. 생물체가 신 진대사를 하면, 몸 안에는 과산화물이 쌓인다. 이 때 카탈라아제는 몸 안에 과산화물이 쌓이는 것과 몸의 조직이 손상되는 것을 막아준다. 실험 방법 1. pH에 따른 카탈라아제 활성 검사 1) 시험관 3개에 산성, 중성, 염기성 용액을 각 4㎖씩 넣는다. 2) 나머지 시험관 3개에는 0.3% 과산화수.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 3. 12. 일반생물학실험 | Catalase 효소의 성질 생화학의 역사에 대한 많은 부분은 효소연구의 역사이다. 생체계에 있어서의 촉매반응이 일어난다고 하는 것에 대하여는 분비물에 의해서 고기가 소화 되거나, 전분이 타액이나 각종 식물 추출액에 의해서 당으로 변한다는 관찰을 통해서, 이미 18세기 초에 인정되었다. 그 후 생물학적 촉매반응(현재는 이것이 효소반응이라는 것이 밝혀졌다.)에 관한 많은 예가 보고되었다. 1850년대에 Louis Pasteur는 효모에 의해서 당이 발효되어 알콜이 생성되는 반응이 “발효계”에 의해서 촉매된다고 생각했다.그는 발효계[후에 효소(Enzyme)라고 명명 되었다.]가 살아있는 효모세포의 구조로부터 분리할 수 없는 것이라고 하는, 수년동안 지배적으로 시인되었던 견해를 발표하였다. 한편, 1897년에 Eduard Buchner가.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 2. 25. 일반생물학실험 | 온도와 pH의 변화에 따른 Amylase 효소 활성 측정 TIP 1. 온도와 pH 농도의 변화가 Amylase효소의 활성에 어떤 영향을 끼치는지 알아본다. 2. 온도와 pH농도 변화에 따른 Enzyme 활성도의 확인 효소는 촉매 작용을 하는 생체 물질이다. 한 개 또는 그 이상의 반응물이 일시적으로 결합하는 단백질이다 (모든 효소가 단백질은 아니다.). 효소는 반응의 에너지장벽-요구되는 활성에너지의 양-을 낮추어줌으로써 반응이 빨리 일어나도록 한다. 효소가 이러한 촉매 반응을 일으키기 위해서는 적어도 하나 이상의 반응물과 결합하여야 한다. 대부분의 경우 효소와 기질 사이의 결합은 강력한 공유결합이 아니고 수소결합이나 이온결합 또는 반응물 분자의 소수성 부위에 부착되는 형태 등으로서, 이들 결합은 매우 약하다. 결국 효소와 기질 사이의 만족할 만한 결합은 이러한.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 1. 22. 제약분석 | DNS assay - 아밀라아제 효소 정량 TIP 1. DNS method를 이용한 환원당 정량 2. 효소(아밀라이제)의 역가분석 α-Amylase assay 알파-아밀레이스(α-아밀레이스, α-amylase)는 아밀레이스의 한 종류로 셋 이상의 α-1,4연결 포도당 단위를 갖는 다당류에서 α-1,4 글리코사이드 결합을 가수분해시키는 효소이다. 흡광도 Beer's law에 의하면, 흡광도와 몰농도는 비례한다. x축은 농도로 넣고, y축은 흡광도이다. A = Elc (즉, 흡광도= 몰흡광 계수 × 몰농도 × 셀의 길이) A : optical density, absorption의 세기입니다. (UV 측정시 실제 얻는값, 흡광도) c : molar concentration 몰농도, e : e×tinction coefficient 몰흡광 계수 l : 셀.. 보건의료/의약학 2020. 1. 15. 의공학실습 | AFM의 기능 및 조작방법 Subnanometre resolution에서 생물 세포의 기능적 구성요소를 관찰, 조작, 탐색할 수 있는 능력을 갖춘 AFM은 나노바이오 기술에서 새로운 가능성을 많이 만들어냈다. 이미징 기술에서 다기능 'lab-on-a-tip'으로 진화하면서 AFM기반의 force spectroscopy는 분자 인식 및 단백질 폴딩의 매커니즘을 연구하고 수용체 관련 단백질의 국부적인 탄력성, 리간드 상호작용을 연구하는데 많이 쓰인다. AFM 캔틸레버 어레이는 피코 몰 감도를 갖다는 생체분석물의 검출을 가능하게 하여 의학진단 및 환경 모니터링을위한 새로운 길을 열어준다. 여기서 우리는 AFM의 급속한 발전에 의해 제공되는 좋은 기회를 살펴본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) AFM의 laser위치를 조정하여 캔틸레버.. 보건의료/의약학 2019. 12. 26. 면역학실험 | ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent assay) TIP 1. 실험을 통해 ELISA가 어떻게 수행되어지고 진단 테스트에 적용되는지 배운다. 2. antigen-antibody, receptor-ligand, enzyme-substract 간의 특정한 protein-protein interaction에 대해 이해할 수 있다. ELISA 효소면역측정법이라 불리는 ELISA는 sample에서 antibody나 antigen의 존재를 찾는데 사용되는 생화학적 방법이다. antigen-antibody 반응을 enzyme 표지를 이용하여 enzyme에 대한 substrate를 첨가하여 antigen-antibody 결합체에 붙은 enzyme의 양을 enzyme이 substrate에 대해 작용하여 발색반응이 일어난 정도를 분광 광도계로 측정함으로써 정량하는 방법이.. Biology/면역학 2019. 11. 29. 이전 1 2 3 다음 반응형