반응형 일반생물학실험 | 침샘(타액선)염색체의 관찰 TIP 1. 노랑초파리의 일반적인 특징과 침샘염색체를 관찰할 수 있다. 2. 침샘염색체의 관찰을 통해서 염색체의 구조 및 기능과 유전현상과의 관계를 이해할 수 있다. 초파리의 생활사 초파리는 절지동물문, 곤충강, 쌍시목, 초파리과, 초파리 속으로 분류되며 우리나라에는 초파리과에 속한 8속 16아속 약 100종이 발견, 연구되고 있다. 초파리는 농가에서 누룩으로 식초를 만들 때 모여들므로 초파리, 또는 과일 썩은데 모이므로 과일파리로 보통 불리운다. 초파리 종류 중 모건(Morgan)이 제일 처음 사용한 종류로써 주택 부근에 많은 것은 노랑초파리이다. 따라서 보통 초파리라고 하면 노랑 초파리를 가리킬 정도이다. 이것은 몸빛이 노랑색을 띄우는 까닭에서 이름 지워진 것이며 학명은 Drosophila melan.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 20. 일반생물학실험 | 곰팡이의 분리 및 배양 TIP 곰팡이는 토양, 물, 공기 등의 자연 환경에 널리 분포하고 있으며 세균에 비해 크고 복잡한 구조를 가진 다세포의 균사상 진핵세포 생물로 그 형태가 매우 다양하기 때문에 형태학적으로 곰팡이를 분류하는 것은 실로 매우 중요하다. 배지의 pH를 낮추거나 살리실산나트륨 등의 화학 약품을 첨가하면 세균이나 효모의 발생이 억제되어서 곰팡이를 분리하기가 쉽다. 따라서 곰팡이의 내산성을 이용하여 구연산 발효에 사용되는 흑국 곰팡이를 분리한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 목적하는 장소로부터 토양을 채취한다. 2) 멸균된 생리식염수 10㎖에 1g의 토양을 취해 볼텍스 믹서로 섞는다. 3) 1㎖ Pipette을 이용해 2)로부터 1㎖를 취해서 각각을 2개의 Petri Dish에 넣는다. 4) 하나의 Petri .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 5. 일반생물학실험 | 플라스미드의 분리 TIP 세균 DNA를 구성하고 있는 염색체와 플라스미드의 차이를 알고, 이론을 바탕으로 한 플라스미드 DNA를 분리한다. 플라스미드 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 환형 DNA분자로서, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 다른 세균세포에서도, 발현이 가능하기 때문에 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 8.000rpm에서 3분 동안 원심분리를 통해 세포를 채취한다. 2) 박테리아 세포 알갱이들을 Buffer P1 250㎕으로 재부유 시킨다. 3) Buffer P2 250㎕.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 4. 일반생물학실험 | 향균력 Test TIP YG배지에 Bacillus subtilis을 도말하여 항생제를 떨어 드린 후 clear zone을 확인하여 그 이유를 알아보자. 항생제의 4가지 기본 조건 1. 선택성이 있어야 한다. 2. 잔류독성이 없어야 한다. 3. 어느 정도 기간 이후에는 밖으로 빠져 나와야 한다. 4. 항생제는 종류마다 방법 및 경오가 다르므로, 투여 방법을 자결정해야 한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 균을 YG배지에 도말한다. 2) 네임펜으로 줄을 그은 후 페이퍼 디스크를 올린다. 3) 페이퍼 디스트 위에 항생제를 각각 떨어 드린다. [일반생물학실험]향균력 Test 레포트 2. 실험 이론 및 원리 2.1. 항생제의 4가지 기본 조건 2.1.1. 선택성이 있어야 한다. 2.1.2. 잔류독성이 없어야 한다. 2.1.3... Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 2. 일반생물학실험 | Plasmid 분리 실험 & Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동 TIP E.coli를 배양해 플라스미드를 분리하고, 분리한 플라스미드를 직접 만든 Agarose gel을 이용하여 전기 영동한다. 전기영동의 원리 DNA 젤 전기영동 방법은 DNA를 크기에 따라 분리하는 간단한 방법이다. 50V-100V 정도의 전류를 장치에 흘려보낸다. DNA는 기본골격에 있는 인산기 때문에 전기영동에 사용되는 완충용액 속에서 (-)전하를 띠고 있으며 따라서 두 전극 사이에 위치해 있을 때 (+)극 쪽으로 움직이게 된다. 이 때 DNA 분자가 젤 매트릭스를 통과하는 속도는 분자량이 커질수록 늦어지며 젤의 밀도가 클수록 늦어진다. 또한 DNA의 분자량이 같더라도 구조에 따라서 움직이는 속도가 다르다. 예를 들면 supercoil된 DNA는 선형 DNA보다 빠르게 움직이는 것으로 알려져 있.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 1. 일반생물학실험 | 원형 DNA인 plasmid DNA Plasmid 세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다. plasmid의 특징은 다음과 같다. 1) 원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA)이다 2) 세포내에서 염색체 DNA와는 별개로 존재 3) 자기 스스로 복제가 가능 4) 대부분 세균에 존재하나, 일부 진핵세포에도 존재 5) 복제기점(DNA 복제의 시작점으로 숙주 범위 및 plasmid DNA의 copy를 결정)이 존재한다 6) 항생제 저항성 유전자(R인자)를 가진다. 7) 다중 제한효소 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 30. 일반생물학실험 | Plasmid DNA purification E.Coli 1. BL21은 일반적인 E.coli host와 달리 protease의 활성을 죽여놓아 단백질의 발현에 많이 사용하고 있습니다. 2. 전 생물을 통틀어서 가장 초월적인 번식속도를 자랑한다. 3. 생존능력이 뛰어난데 많은 종류의 유기물을 에너지원으로 사용 가능하고 산소나 온도의 변화에도 강해 다양한 환경에서 서식 가능. 4. 실험실에서 주로 쓰는 K-12 MG1655계열의 대장균의 경우 약 20분에 1번 세포분열을 하며 이 특성과 함께 실험적으로 상당히 쉽게 배양되는 편이라서 생물학 실험에서 잘 쓰인다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) plasmid DNA를 가지고 있는 E.Coli의 단일 콜로니를 접종한 후 Shaking incubator에서 배양한다. 2) Glur-1-CT(5㎖)를 에핀도.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 29. 일반생물학실험 | 플라스미드 추출 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자라고 한다 1953년에 미국의 유전학자 레더버그가 처음으로 플라스미드를 세균의 염색체 말고 독자적으로 증식을 할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 이름을 지었다고 한다. 쉽게 말하면 플라스미드는 세균에서 발견이 되는 염색에 이외에 DNA이고 고리모양의 이중가닥 DNA 모양으로 수천개에서 수만개의 염기쌍으로 이루어져 있다고 한다. 하나의 세포내에 여러 개 존재하고 염색체와는 독립적으로 복제가 된다는 게 특징이다. 또 생존에 필수적이지는 않지만 특정한 환경에서 생존을 하는데 유리한 유전자들이 존재한다. 또 세균에 존재하지만 효묘와 같은 진핵 생물에서도 발견이 된다고 한다. 플라스미드의 형태로는 원형 DNA의 한.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 28. 일반생물학실험 | 플라스미드 추출 TIP Mini-prep라 불리는 Alkaline lysis method을 이용하여 Plasmid DNA을 추출한다. Alkaline lysis Alkaline lysis의 기본적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrance을 부수고 DNA만을 분리하는 것이다. 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리해야 한다. 이 둘은 모두 DNA이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. chromosomal DNA는 분리 과정에서 linear형태가 되고 크기가 상당히 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있다. 실험 방법 1. Spin Down Bacterial cells 1) Harvesting ① 1.5㎖의 b.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 27. 일반생물학실험 | 플라스미드 DNA 추출 TIP Alkaline lysis (denaturation) method에 대해 알아보고 이 방법을 통해 플라스미드 DNA를 추출해본다. DNA Mini prep이란 말을 쓰는데 prep은 ‘prepartion’의 줄임말로 DNA를 소량으로 추출한다는 의미이다. plasmid를 추출하는 방법으로는 기본적으로 여러가지가 있지만 그 가운데 대표적인 방법으로 alkaline lysis (denaturation) method가 이용되고 있다. 세포내에 DNA는 일반적인 double-helix를 형태를 가지는 반면 plasmid는 동그란 모양인 supercoiled형태를 가짐으로써 pH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태 와 구조가 크게 변하지 않는다는 특징을 가지고 있다. plasmid는 주로 vector로.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 26. 일반생물학실험 | 플라스미드 DNA 추출 TIP Recombinant DNA plasmid가 들어있는 E.coli로부터 plasmid를 직접 추출하여 분자생물학적 실험의 기본이 되는 DNA관련 실험에 대해 이해한다. 외부 DNA를 E.coli에 도입시켜 형질전환이 이루어지게 하면 이 세포들은 기존에 갖고 있던 chromosomal DNA 뿐만 아니라 plasmid DNA도 갖고 있게 된다. 특정한 DNA를 확보하고 싶을 때, 그 plasmid DNA를 숙주세포에 도입한 후, 따로 분리해내면 원하는 것을 얻을 수 있다. 이 실험에서 Ampicillin이 포함된 LB배지에서 키운 형질전환된 Ampicillin 저항성 E.coli를 이용하여 특정한 plasmid DNA를 얻는다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Ampicillin이 포함된 LB배지에.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 24. 일반생물학실험 | 수정란의 관찰 TIP 포유류에 가장 유사한 발생과정을 가지는 조류 수정란의 방생과정을 관찰하여 척추동물의 발생을 학습한다. 배막과 태반 배막은 동물의 배 발생시 배를 싸고 있는 막으로 배조직의 일부가 막상으로 늘어난 것이다. 배체의 주위를 싸고 그것을 보호하거나 배조직의 호흡과 배출 등에 관계되는 양막 ·장막 ·요막이 그 대표적이고, 그 밖에 난황낭도 배막에 포함시킬 수 있다. 양막 ·장막의 일부가 관여하여 만들어지는 태반(포유류인 경우)도 또한 넓은 뜻에서 배막에 포함시킬 수 있다. 반면 태반은 태아와 모체에서 유래한 조직으로부터 형성되며, 태아와 모체 사이의 물질교환이 일어난다. 수란관 상부에서 수정된 수정란은 난할을 하면서 자궁으로 이동하여 포배상태로 자궁 내벽에 착상하게 된다. 착상한 수정란은 배발생을 진행하여.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 23. 일반생물학실험 | DPPH 항산화 실험 TIP 시료의 항산화력을 측정해 본다. 활성 산소 우리가 호흡하는 산소와는 완전히 다르게 불안정한 상태에 있는 산소이다. 환경오염과 화학 물질, 자외선, 혈액순환장애, 스트레스 등으로 산소가 과잉생산된 것이다. 이렇게 과잉생산된 활성산소는 사람 몸속에서 산화작용을 일으킨다. 이렇게 되면 세포막, DNA, 그 외의 모든 세포 구조가 손상당하고 손상의 범위에 따라 세포가 기능을 잃거나 변질된다. 실험 방법 1. 각 용액 사전 자리배치 용액을 담기전 미리 자리를 배치해두면 실험 중에 용액이 섞이는 것을 방지할 수 있고 용액 들을 담고나서도 각 칸에 어떤 용액이 담겼는지 쉽게 확인이 가능하다. DPPH 시료A + DPPH 시료A blank 시료B + DPPH 시료B blank 시료C + DPPH 시료C blan.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 7. 일반생물학실험 | Observe the mitotic chromosome of animal cells TIP 두 가지 방법을 통해 동물세포의 유사분열 염색체를 관찰할 수 있다. 유사분열이란, 유전체 양의 변화가 없는 세포분열이며 이 과정에서 방추사가 생기고 염색체가 나타나는 핵분열의 한 형식으로 간접분열이라고도 한다. 유사분열은 전기, 중기, 후기, 말기로 이루어진다. 유사분열이 일어나기 전 간기에는 느슨한 형태의 풀어진 염색체가 존재한다. 전기는 초기와 후기로 나뉘는데 전기의 초기에는 핵이 4개의 염색체를 가지고 있는 모습이며 염색체는 2가닥으로 갈라진 모습을 하고 있는데 한 가닥을 염색분체라고 한다. 전기의 후기에는 각각의 염색체가 염색분체를 2개씩 복제하며 방추체의 구조가 만들어지며 전기과정에서 핵막이 파괴되며 느슨한 염색체의 응축이 일어난다. 중기과정에서는 염색체들이 방추체의 중심을 따라 줄지어 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 3. 일반생물학실험 | 빛을 이용한 에너지 전환반응 - 광합성 TIP 지구생태계를 유지하는 광합성반응에 대해 이해하고 식물 잎에서 일어나는 광합성 반응을 빛이 있는 조건과 빛이 없는 조건에서 직접 관찰하여 빛과 광합성의 관계에 대해 확인해본다. 광합성은 녹색식물이 빛에너지를 이용하여 CO2와 물로부터 유기화합물을 생성하는 과정이며 이 과정은 녹색식물에 의해 빛에너지가 화학에너지로 전환되는 것을 의미한다. 실험 방법 1. 빛과 광합성 1) 건강한 녹색 식물(아이비)을 48시간 동안 암실에 놓아둔다. 2) 48시간 후 호일로 빛 차단막을 잎의 일부에 씌워 빛에 24시간 노출시준다.(1), 2)과정을 거친 식물과, 1)과정만 거친 식물이 준비되어 있다.) 3) 빛을 비춰준 식물과 암처리 해준 식물을 구별하여 각 식물의 잎을 떼어낸다. (암처리한 식물은 상자에서 꺼내 잎을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 8. 31. 일반생물학실험 | 그람 염색 TIP 순수배양한 미생물을 동정하기 위해 그람염색을 한다. 양성·음성균은 화학요법제에 대한 감수성뿐만 아니라 균의 증식에 필요한 영양소의 종류, 물리·화학적 자극에 대한 반응, 생산하는 독소, 병변 등 각 방면에서 차이가 있기 때문에, 양성·음성을 구분해 순수배양한 미생물을 이용할 때 필요한 정보를 알 수 있다. 그람 염색 1884년 덴마크의 의사 Gram이 고안한 특수 염색법으로, 표본을 크리스탈 바이올렛으로 물들여서 아이오딘·아이오딘화 칼륨액으로 처리한 후, 순에탄올로 씻으면, 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색으로 보인다. 그러나 그 후 여러 가지 균종이 발견되자 그 속에는 조직과 마찬가지로 에탄올 세정에 의하여 탈색되는 균도 있다는 것이 밝혀졌다. 이때 탈색되는 균을 그람음성균, 탈색되지.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 30. 일반생물학실험 | 그람 염색법 계통분류학(systematics)은 생물들의 다양성과 그들의 유연관계를 연구하는 학문이다. 계통분류학은 계통학과 생물의 특성을 규명하고 이름을 부여하며 자연적인 유연관계에 따라 그룹으로 배치하는 분류학을 함께 연계한다. 이 때 대상 생물의 형태적, 생태적, 생리적, 분자생물학적 특징을 종합하여 종을 판별하는 것을 동정이라고 부른다. 한편 세균을 동정할 때 세균은 세포의 모양에 따라 구균, 간균, 나선균 등으로 나누기도 하지만, 본 실험에서는 그람 염색법을 이용하여 세균의 형태학적인 차이에 근거해 세균을 그람 양성균과 그람 음성균으로 분류하고자 하였다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 준비된 대장균과 고초균 sample을 각각의 이름을 labeling한 슬라이드글라스에 도말하였다. 2) 실온에서 약 5분간.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 29. 일반생물학실험 | Gram Staining 그람 염색법은 1884년 Hans Christian Gram에 의해서 처음으로 개발된 방법으로 각종 검체 및 배양집락의 현미경적 검사에 이용되며 미생물에 의한 감염여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다. 이 실험은 그램 염색을 통해서 세포벽의 두꺼운 정도를 알 수 있고 또한 이 실험 방법은 박테리아 분류의 한 방법이기도 하다. 미생물은 다양한 방법으로 분류된다. 즉, 미생물의 형태나 모양에 따라 분류하기도 하지만 미생물이 생존할 수 있는 온도, 수소이온농도(pH), 수분활성도 범위에 따라 분류하기도 한다. 또 미생물은 이용하는 에너지원, 산소의 존재유무, 포자생성방법, 그리고 염색에 의해서도 분류하며, 이러한 분류는 특정목적에 맞게 임의적으로 사용된다. 이번 실험을 통해 Gram staining의 원리에 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 27. 이전 1 2 3 4 5 6 7 ··· 23 다음 반응형