분석화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피를 이용한 아미노산 정성분석

 

 

 

TIP

 

 

In this experiment it would be the amino acid qualitative analysis using thin layer chromatography.
Phenylalanine, Tyrosine, will find two Aspartate, amino acids unknown Glysine and components through experiments.

 

 

 

본 아미노산 정성분석 실험에 사용되는 방법은 얇은 막 크로마토그래피이다. 얇은 막 크로마토 그래피의 원리는 정지상을 흡착제인 실리카겔이나 알루미나를 유리판 위에 얇게 입힌 정지상 판과 이 판 위를 흐르는 용매를 이동상으로 하였을 때, 시료 성분들이 두상에 대한 서로 다른 분배를 나타내므로 분리가 되는 방법이다. 이 방법을 통해 성분이 결정된 아미노산 Glycine, Tyrosine, Phenylalanine, Aspartate와 정체를 모르는 미지의 아미노산 2개를 같이 얇은 막 크로마토그래피를 통해 분석하여 미지의 아미노산의 성분을 알아보는 실험이다.

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실험 방법

1. TLC Plate 준비 및 용매 전개

1) 10×10 크기의 TLC plate를 준비한다. Plate의 표면에 손을 대지 않도록 조심하며 아래로부터 2㎝ 지점에 연하게 연필로 선을 표시한 다음 선 위에 적당한 간격으로 5개의 지점을 표시하고 labeling 한다.

 

2) 각 표시 위에 아미노산 용액과 미지시료를 점적한 후 plate를 건조 시킨다. 점적된 시료의 지름은 작을수록 좋다.

 

3) TLC chamber 또는 Beaker에 TLC plate의 아래 부분이 충분히 잠길 정도의 TLC 용매를 넣고 filter paper로 beaker의 내부를 둘러서 용매를 흡수 하도록 한다. 뚜껑 또는 Wrap으로 덮은 후 포화시킨다.

 

4) TLC plate를 용기에 넣고 뚜껑을 덮은 후, 용매를 약 85% 정도 높이까지 전개 시킨다.

전개가 완료되면 TLC plate를 꺼내서 용매가 이동한 거리를 연필로 표시 하고 완전히 건조 시킨다.

 

2. 아미노산 발색 및 표시

1) TLC plate를 hood로 옮긴 후 ninhydrin 용액을 뿌린다. 뿌릴 때는 흡입 및 접촉에 유의한다. 완전히 말린 후 따뜻한 hot plate에서 부드럽게 가열하여 발색 한다. 아미노산은 청보라색으로 나타난다. 발색 된 부위의 중심을 연필로 표시한다.

 

3. 아미노산의 동정과 R_f값 계산

 

 

 

[분석화학실험]얇은 막 크로마토그래피를 이용한 아미노산 정성분석 레포트