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소박한 실험 노트 - 종합편

일반생물학실험 | 여러 조건에 따른 효소 반응 TIP pH변화, 온도, 기질의 농도에 따른 효소 반응을 비교해본다. 효소 효소란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매이다. 특정 반응물과 결합하여 활성화에너지를 낮춰 반응을 촉진하는데, 효소와 결합하는 반응물을 기질이라고 하고 효소에서 기질과 결합하는 특정 부분을 활성부위 또는 기질결합 부위라고 한다. 효소의 활성부위에 기질이 결합하여 효소`기질 복합체를 형성하고 반응 결과 생성물이 만들어지면 효소는 생성물과 분리되어 또 다른 반응에 참여한다. 기질의 입체구조와 효소의 활성부위가 맞아야만 결합하여 반응할 수 있으므로 한 종류의 효소는 주로 한 종류의 기질에만 작용한다. 이러한 효소의 성질을 기질 특이성이라고 한다. 효소의 작용에는 여러가지 것들이 영향을 미친다. 우선 효소 는 단백질 촉매이므로 단.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 12. 1.

세포생물학실험 | Factors Affecting Enzyme Function TIP 1. 온도 변화에 따른 효소 활성 변화를 이해할 수 있다. 2. pH 변화에 따른 효소 활성 변화를 이해할 수 있다. 효소일반적으로 화학반응에서 반응물질 외에 미량의 촉매는 반응속도를 증가시키는 역할을 한다. 생물체 내에서 일어나는 화학반응도 촉매에 의해 속도가 빨라진다. 특별히 생물체 내에서 이러한 촉매의 역할을 하는 것을 효소라고 부르며 단백질로 이루어져 있다. 단백질로 이루어져 있기 때문에 무기촉매와는 달리 온도나 pH(수소이온농도) 등 환경 요인에 의하여 기능이 크게 영향을 받는다. 즉, 모든 효소는 특정한 온도 범위 내에서 가장 활발하게 작용한다. 대개의 효소는 온도가 35∼45℃에서 활성이 가장 크다. 하지만 온도가 그 범위를 넘어서면, 오히려 활성이 떨어진다. 온도가 올라가면 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 16.

일반생물학실험 | 온도와 pH변화에 따른 Amylase 효소 활성 측정 TIP 1. 단백질로 구성되어 있는 효소는 생체 내에서 일어나는 화학반응의 촉매제로써 물질 대사를 좀 더 빠르게 해준다. 2. 본 실험에서 효소 α-Amylase를 이용하여 pH와 온도, α-Amylase의 농도에 따른 효소의 활성도 및 최적 활성 조건을 알아본다. 소화 섭취한 음식물을 분해하여 흡수하기 쉬운 형태로 변화시키는 일 또는 그런 작용으로 음식물을 씹는 작용에 의한 기계적 소화(소화효소가 음식물에 최대로 작용할 수 있도록 도와주는 과정 – 표면적증가)와 소화 효소에 의한 화학적 소화(영양소가 소화효소에 의해 분해되는 과정)가 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 6개의 E-tube에 (①～⑥) 1% 전분 용액을 200㎕ 넣는다. pH 실험의 경우 전분 용액 100㎕를 넣고 해당 pH 용액 1.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 12. 13.

일반생물학실험 | 효소 활성에 온도, pH가 미치는 영향 TIP 전분 분해효소인 아밀라아제를 이용하여 효소 촉매활성에 미치는 요인들 중 반응온도와 pH의 효과를 관찰한다. 세포의 물질대사과정에는 복잡한 분자를 간단한 분자로 분해하는 이화작용과 작은 분자들로부터 세포 내 고분자들을 합성하는 동화작용이 있다. 이때 반응에 참여하는 반응물질을 기질이라고 부른다. 기질과 효소의 상보적인 구조적 특성으로 인하여 각 효소들은 기질에 대한 높은 특이성을 획득하게 된다. 효소는 활성부위에서 생성물을 쉽게 만들 수 있도록 효소와 기질의 복합체를 전이상태로 전환시킴으로써 반응의 활성화 에너지를 감소시킨다. 실험 방법 1. 전분의 가수분해 1) 4℃, 100℃ 안에 있는 버퍼1+전분을 각 2㎖씩 15㎖ tube에 넣는다. 2) 37℃ 안에 있는 버퍼1+전분을 각 2㎖씩 2개의 1.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 12. 7.

일반생물학실험 | 온도와 pH가 효소에 미치는 영향 TIP 1. 온도에 따른 단백질 분해 효소의 특성 변화를 이해한다. 2. pH에 따른 단백질 분해 효소의 특성 변화를 이해한다. 3. 효소의 특징을 이해한다. 효소(enzyme) 어떤 물질들이 생명체내에서 동화와 이화작용을 통하여 분해하거나 분해된 물질로부터 새로운 물질을 만들어내는 화학반응을 일으키는 과정을 물질대사라 한다. 이 물질대사가 원활하게 생체내에서 움직일 수 있도록 도와주는 촉매와 같은 가장 중요한 역할을 하는 작용을 효소(emzyme)라 부르며 호르몬, 비타민 등도 관여하고 있다. 효소는 화학반응을 촉매 할 수 있는 특수한 단백질로 되어있다. 또한 물리, 화학적 성질을 가지는데 분자량이 작은 것은 10,000 dalton 정도며, 큰 것은 1,000,000 dalton을 넘는 것들도 있다... Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 12. 5.

일반생물학실험 | 효소의 활성 효소는 세포에서 만들어지는 단백질성의 생체촉매이다. 효소에 의해 촉매 되는 화학반응을 효소반응이라고 하지만 생체 내의 화학반응은 거의 모두가 효소반응이고, 물질대사는 모두가 효소계에 의존하고 있다.효소는 단백질이기 때문에 각종 외적 조건의 영향을 받아서 활성이 변화한다. 고온에 의한 단백질변성으로 불활성화하기도 하고, pH 등의 변화에 의해 활성에 변화를 일으킨다. 또한 활성부위에 결합하는 물질에 의해 활성의 저해가 일어나지만, 작용물질과 특이적으로 결합하는 부위가 활성부위 이외에도 있으며 이 결합에 의해 활성이 높아지거나, 저해되기도 한다. 이것은 생체에서의 대사조절에 큰 의미를 갖는다. 실험 방법 1. 기질의 농도가 효소 활성에 미치는 영향 1) 10개의 튜브를 준비한다. 2) 튜브에 버퍼를 각각 2.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 12.

일반생물학실험 | 효소의 작용 TIP 전분 분해효소인 아밀라아제(amylase)의 효소 촉매활성에 미치는 요인들 중 반응 중의 온도와 pH가 효소활성에 미치는 효과를 관찰한다. 효소 효소는 생체촉매로 자발적인 반응이나 가역적 반응에서 반응속도를 비약적으로 상승시키며, 반응평형까지 도달하는 속도 또한 증가시킨다. 보통 한 가지 형태의 물질이나 거의 비슷한 그룹의 물질들만의 반응을 촉진시키는 기질 특이성을 가지고 있다. 1. 정촉매 : 반응속도를 빠르게 만드는 물질(촉매) 2. 부촉매 : 반응속도를 느리게 만드는 물질(촉매) 참고로 아밀라아제는 정촉매이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 각각의 pH 샘플을 시험관에 3ml 씩 넣어서 3set를 준비한다. 2) 1set는 얼음, 1set는 40℃ water bath, 나머지 1set는 7.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 11.

일반생물학실험 | 아밀라아제의 활성과 온도 TIP 아밀라아제의 온도와 소화 효소의 관계를 실험해본다. 아밀라아제 소화효소(amylase) 녹말에 침을 섞어 따뜻하게 하면 아이오딘반응이 일어나지 않는데, 그 이유는 침 속의 아밀라아제의 작용 때문이다. 침 1ℓ 속에는 약 0.4g의 아밀라아제가 들어 있는데, 침이나 위액 속의 아밀라아제는 녹말을 가수분해하여 말토스를 생성하므로 소화작용에 있어서 꼭 필요하다. 아밀라아제는 고등동물뿐만 아니라, 고등식물·곰팡이·세균 등 자연계에 널리 분포한다. 다카미네[高峰讓吉]는 누룩곰팡이가 배양액에 다량의 아밀라아제를 분비한다는 것에 착안하여 타카디아스타아제(takadiastase)라고 하는 소화제를 만들었다. 또 어떤 종의 곰팡이의 아밀라아제는 녹말을 거의 완전히 가수분해하여 포도당(글루코스)으로 변화시키므로 포.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 28.

생화학실험 | α-glucosidase 저해 평가 TIP α-glucosidase를 억제하면 빵, 감자, 파스타와 같은 녹말이 장에서 분해되는 것을 막아준다. 즉, 식사 후에 혈당이 증가하는 것을 늦추어 혈당을 낮추는데 도움을 준다. 그러므로 당뇨병이 있는 경우 약물로 사용할 수 있다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 α-glucosidase의 저해를 측정한다. α-글루코시다제(α-glucosidase) 글루코시드 가수분해 효소를 가리킨다. 비환원 말단에 존재하는 α-D-글루코시드 결합을 가수분해하여 α-형 글루코오스를 생성하는 효소의 총칭. 단순히 글루코시다이제라고 불리는 경우도 있다. 동물, 식물. 미생물계에 널리 분포한다. 아밀라아제의 작용으로 생긴 올리고당의 글루코오스에의 분해와 배당체의 분해에 중요한 역할을 한다. 배당체와 글루코시드 결합의 종.. Biology/생화학 2021. 7. 22.

일반생물학실험 | 소화 효소의 활성과 온도 TIP 아밀라아제의 온도와 소화 효소의 관계를 실험해본다. 소화 몸이 흡수할 수 있을 정도의 작은 분자로 음식물을 잘게 부수는 과정으로 이러한 소화를 통해 고분자를 구성 단량체로 쪼개어 자신의 물질을 만드는 데 사용하거나, ATP를 생산하는데 사용한다. 1. 세포내 소화 : 내부에 세포 자체의 세포질을 소화시키지 않고 음식을 부수는 가수분해효소가 들어있어서 세포내에서 소화시키는 소화이다. 해면동물은 음식을 세포내 소화를 통해 소화시키는 동물이다. 2. 세포외 소화 : 세포외 소화는 동물의 외부와 연속적으로 연결된 구획 내에서 일어난다. 이러한 구획을 가지는 소화는 세포내 소화보다 더 큰 음식을 먹을 수 있게 해준다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 실험에 필요한 아밀라아제용액, 요오드용액, 베네딕트용액을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 19.

생화학실험 | Tyrosinase 활성 저해 TIP 인간의 피부색은 멜라닌의 양에 의해서 결정된다. 멜라닌의 양이 많을수록 검은색 피부를 띤다. 이러한 이유로 미백효과를 내고 싶다면 멜라닌의 합성을 저해해야 한다. 멜라닌의 합성을 저해하는 방법 중 하나는 Tyrosine을 산화하여 멜라닌을 생성하는 효소인 Tyrosinase를 저해하는 것이다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 Tyrosinase 활성 저해를 측정한다. Tyrosinase는 Tyrosine을 산소가 존재하는 곳에서 산화하여 멜라닌을 생성하는 효소이다. 그러므로 Tyrosinase의 활성을 저해시키면 멜라닌 생성이 억제된다. Tyrosinase를 통해 Tyrosine이 산화되면서 주황색을 띠지만, Tyrosinase 활성이 저해되면 Tyrosinase을 통한 Tyrosine의 산화반응.. Biology/생화학 2021. 7. 10.

일반생물학실험 | 효소의 활성 측정 TIP 1. pH의 변화에 따른 효소의 반응속도를 비교하고 최적의 pH를 알아낸다. 2. 온도변화에 따른 효소의 반응속도를 비교하고 최적의 온도를 알아낸다. 효소(enzyme) 일반적으로 화학반응에서 반응물질 외에 미량의 촉매는 반응속도를 증가시키는 역할을 한다. 생물체 내에서 일어나는 화학반응도 촉매에 의해 속도가 빨라진다. 특별히 생물체 내에서 이러한 촉매의 역할을 하는 것을 효소라고 부르며 단백질로 이루어져 있다. 단백질로 이루어져 있기 때문에 무기촉매와는 달리 온도나 pH(수소이온농도) 등 환경 요인에 의하여 기능이 크게 영향을 받는다. 즉, 모든 효소는 특정한 온도 범위 내에서 가장 활발하게 작용한다. 대개의 효소는 온도가 35∼45℃에서 활성이 가장 크다. 하지만 온도가 그 범위를 넘어서면, .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 29.

일반생물학실험 | 단백질 정량 우리 몸을 구성하는 중요한 물질 중 하나인 단백질. 단백질은 효소로도 작용하기도 하고 우리 몸의 조직을 구성하기도 합니다. 다양한 용도에 쓰인 단백질이 세포나 샘플에 얼마나 포함되어 있는지 그 농도와 양을 구하기 위해서 단백질 정량이라는 실험을 합니다. 단백질 정량은 대부분의 생명과학 실험의 기본이며 대학원생들이 굉장히 많이 하는 실험이라고 알려져 있습니다. 이번 실험에서는 주어진 수용액에 녹아있는 단백질 양을 정량하는 데에 Bradford assay 방법을 사용하였으며 여러 농도의 용액을 사용하여서 흡광도와 농도간의 관계나 패턴이 있는지에 대해서 알아보았습니다. Bradford assay 방법에 사용하는 브래드포드 지시약은 평상시에는 녹갈색을 띄고 있다가 단백질과 결합하면 청색을 띄는 특징이 있고 색이.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 19.

일반생물학실험 | 생체 거대분자의 특성과 기능 분석(방선균배지) TIP 1. 미생물이 생산하는 단백질과 탄수화물 분해효소에 대해 알아본다. 2. 미생물 효소에 의한 활성이 온도와 pH에 따라 영향을 받음을 확인한다. 효소는 생물체에서 합성되어 생체 화학반응에 관여하여 반응을 촉진하는 생체 촉매를 말한다. 촉매란 자기 자신은 반응에 의해 소모되거나 변성되지 않고, 매우 적은 양으로 화학 반응의 속도에 영향을 미치는 물질을 효소의 촉매라고 한다. 화학반응을 촉매 시키기 위하여 사용하는 촉매는 모두 무기질인데 비하여 생물체 내의 반응을 촉진시키는 촉매인 효소는 모두 단백질이다. 효소의 구성은 주성분인 단백질이 있다. 효소는 입체적인 구조를 가지고 있어서 효소의 작용을 받는 물질인 기질과 특이하게 결합하는 활성 부위를 가진다. 단백질로만 구성된 효소의 예로는 펩신, 아밀라아.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 28.

일반생물학실험 | 기질농도에 따른 효소의 반응속도 어떤 물질들이 생명체내에서 동화와 이화작용을 통하여 분해하거나 분해된 물질로부터 새로운 물질을 만들어내는 화학반응을 일으키는 과정을 물질대사라 한다. 이 물질대사가 원활하게 생체내에서 움직일 수 있도록 도와주는 촉매와 같은 가장 중요한 역할을 하는 작용을 효소(enzyme)라 부르며 호르몬, 비타민 등도 관여하고 있다. 효소는 화학반응을 촉매 할 수 있는 특수한 단백질로 되어있다. 또한 물리, 화학적 성질을 가지는데 분자량이 작은 것은 10,000 dalton 정도며, 큰 것은 1,000,000 dalton을 넘는 것들도 있다. 효소 중에는 열에 약하며, 비단백질성 유기화합물이 있어야 활성을 찾는 아포효소와 보조인자가 복잡한 유기화합물인 조효소가 있는데 이들이 촉매작용을 통하여 완전한 효소분자가 되었을 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 23.

일반생물학실험 | 제한효소를 통한 DNA 분해와 전기 영동 TIP 추출해낸 DNA를 제한 효소를 사용하여 여러 개의 DNA 조각으로 분리한 후, 전기영동을 통하여 원하는 DNA 분자가 유입되었는지를 확인한다. 본 실험에는 DNA를 제한 효소로 절단하는 과정이 포함되어 있다. 제한 효소는 원래 세균이 침투한 외래 DNA를 변형 및 파괴시키기 위하여 존재하는 효소이다. 그러나 이 제한 효소는 그 세균의 DNA도 절단할 수도 있기 때문에 그것을 방지하기 위해 세균은 자신의 DNA에 메틸화(methylation)을 하는 등의 방법을 통해 자신의 DNA를 보호한다. 제한 효소는 이중 나선 구조로 된 DNA의 회문식 염기서열, 즉 앞으로 읽으나 뒤로 읽으나 염기서열이 같은 모양을 하고 있는 특징적인 염기서열을 인식하여 절단한다. 잘린 후의 DNA 말단의 모양은 두 종류가 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 1.

일반생물학실험 | 침의 소화작용 TIP 온도의 변화에 따라 침속의 amylase에 의해 녹말(starch)이 분해되는 현상을 관찰하고, 효소를 알아본다. 효소의 개념 및 작용 효소는 일종의 촉매이지만 일반적으로 무기촉매와 상당히 다른 성질을 가지고 있다. 효소는 동물, 식물 그리고 미생물체에서 생산되는 단백질과 같은 고분자의 물질과 특수한 화학구조를 가진 작은 분자가 서로 결합한 일종의 복합체이다. 즉 단백질로 된 교질담체와 비단백질로 된 보결군이라는 활성기가 모여서 된 것이다. 효소(holoengyme) = 아포효소(apoenzyme) + 보결군(prosthetic group) 엿기름 등으로 밥을 삭이면 식혜가 되고 콩은 미생물의 작용으로 된장, 간장이 되고 동물체내에서 식물이 간단한 물질로 분해되고 이것이 다시 복잡한 물질로 합성되.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 1.

일반생물학실험 | Measurement of Microbiological Activity and Growth TIP 유기물이 산화하면서 Electron을 발생한다. 여기서 Electon → [H+]를 미생물이 받아들이는데 실험을 통해서 -INT를 가함으로써 이 INT가 [H+]를 intercept하여 색을 변화시킨다. 생물학적 처리방법은 폐수내에 존재하는 유기물중에서 생물에 의해서 분해 가능한(Biodegradable) 유기물을 미생물을 사용하여 소기시키는 방법으로 이때 이용되는 미생물은 원생동물, 조류, Bacteria가 있다. 효소(Enzyme)의 역할 효소란 소량으로도 화학반응속도를 촉진시키는 것으로 생체내의 고분자 화합물로 된 생체촉매(Biocatalyst)이다. 1. 효소의 구조 생체내에 존재하는 효소는 단순단백질(Simple Protein)이나 단백질과 단백질이 아닌 물질이 결합된 복합단백질(Comp.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 10. 27.

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