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  미생물공학실험 | 미생물 배양 배지 제작 및 세균배양 TIP  미생물을 배양할 수 있는 배지를 만들어 보고 직접 세균을 배양해 본다.   미생물 배양미생물을 인공적으로 증식시키는 것을 배양이라고 한다. 진균, 세균, 랩토스피라 등은 무세포 배지에서 배양되지만 리케치아, 바이러스는 무세포 배지에서는 증식되지 않으므로 살아 있는 세포를 필요로 하는데, 부화란배양법, 조직배양법 등에 의해서 배양된다. 세균을 배양할 때에는 균종에 따라 각각 최적조건의 배지 선택이 중요하지만 바이러스, 클라미디아, 리케치아의 경우에는 최적세포의 선택이외에 숙주세포의 생명을 잘 유지하면서 배양해야 한다.  실험 방법1. 실험 과정1) LB Agar 분말 8g을 증류수 200mL에 넣는다. 2)  121℃, 1.5atm, 15-20 min 멸균조건으로 멸균한다. 3)  멸균된 배지를 .. Biology/미생물학 2024. 10. 2.

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  미생물학실험 | 멸균법 멸균(sterilization) 살균, 병원체 및 그 외의 미생물을 물리적, 화학적 방법의 자극을 가하여 죽이는 일 멸균 방법 1. 물리적 소독 멸균법 열, 압력, 증기 또는 전기적 에너지를 이용하여 모든 미생물을 파괴, 억제하는 방법으로, 일반적인 기구와 방포 및 물품 등을 소독, 멸균할 때 흔히 이용된다. 증식능력이 있는 미생물이나 곰팡이 등이 존재하지 않는 상태(무균상태)로 만들어 내는 과정. 2. 화학적 소독멸균법 화학약품이나 가스를 사용하여 미생물을 파괴하거나 성장을 억제하는 방법으로 열소독을 할 수 없는 기구나 물품을 소독, 멸균할 때 이용된다. . 실험 방법 1. 실험 과정 1) 멸균기를 거치지 않은 대장균과 멸균기를 거친 대장균을 루프 앤 니들을 사용하여 각각의 배지에 묻힌다. 2) 신체 .. Biology/미생물학 2023. 8. 1.

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  생물화학공학실험 | 생물 반응기의 온도제어시스템 설치 TIP 미생물 배양 실험에 있어서 미생물을 대량으로 배양하기 위해 또는 배양환경 인자의 영향을 관찰하기 위해 사용되는 생물 반응기의 조작요령에 대해 알아본다. 생물반응기 생물반응기는 특정 물질이나 세포를 생산하기 위해 또는 특정 반응을 수행하기 위해, 생물체를 조절된 환경하에서 키울 수 있도록 만든 용기의 총칭이다. 생물 반응기는 발효조라고도 불리나, 엄격한 발효의 의미는 미생물의 혐기적 배양을 말하므 로, 대부분의 배양이 호기성임을 감안하여 생물 반응기라는 용어가 보편적으로 쓰 이고 있다. 따라서 적당한 생물 반응기의 선택을 위해서는 키우려는 생물체 및 원 하는 생산물의 생물학적, 생화학적인 특성, 물리 화학적 성질뿐만 아니라 이들 특성에 따른 전체 공정의 설계와 생산물의 판매전략 등까지 고려되어야 한.. Engineering/화학생물공정 2023. 4. 24.

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  일반생물학실험 | Lycopene 배양 및 추출 발효와 부패의 차이 발효는 미생물의 작용에 의해 유기물이 분해되어 사람에게 유용한 물질이 생성되는 현상이다. 특정한 조건(온도, 시간, 무산소상태)에서만 발효가 일어나며, 발효균은 초산과 젖산, 알코올 등 좋은 효소를 분비하여 유해균을 무력화시킨다. 발효를 이용하여 만든 음식은 대표적으로 치즈, 요구르트, 막걸리, 와인, 맥주, 김치 등이 있다. 부패는 생물의 유해나 배설물 등 질소를 함유하는 유기물질이 혐기성 세균에 의해 불완전하게 분해되는 현상이다. 혐기성 세균에 의해 유기물질이 펩톤, 아미노산 등으로 분해되면서 아민, 황화수소가스, 암모니아가스, 메탄이 형성되어 악취가 풍기고 유해한 독성 물질이 발생한다. 실험 방법 1. lycopene 배양 1) 배양조건을 확인하고 배지를 만든다. Strain D.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 20.

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  미생물제어 | 식품미생물 제어법 TIP 미생물 제어는 여러 조작이 있으나 이들 조작의 주된 것을 단위 조작으로서 정리하면 제균, 살균, 정균, 격리(차단)으로 나누어 볼 수 있습니다. 미생물 제어를 위한 기기는 이들 단위조작을 단일 기능 혹은 다른 단위 조작을 복수 조합하여 기능할 수 있게 만드는 것입니다. 이번 호에서는 미생물 제어를 위한 기본 단위 조작에 관해 알아보도록 하겠습니다. 제균 식품공장의 미생물 제어에서 제균방법은 균의 제거, 분리, 흡착 등이 있습니다. 구체적으로는 세정(제거), 여과, 침강, 원심분리(이상 분리), 전기 집진(흡착) 등이 사용되고 있습니다. 살균 살균은 크게 가열살균과 비가열살균(냉살균)으로 나누어 볼 수 있습니다. 1. 가열살균 1) 습열․건열 살균 : 피가열물의 전도에 따라 가열 2) 저온․고온 살.. Biology/미생물학 2022. 11. 9.

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  보건환경미생물학실험 | Observation of the expressed protein via SDS-PAGE TIP SDS-PAGE를 통해서 미생물이 발현한 단백질을 크기로서 구분해내고자 한다. 2-D electrophoresis 후에 그 튜브는 수직판 겔의 윗부분과 수평적으로 위치하고 단백질의 그 튜브 밖으로 나와서 크기에 따라 분리되는 젤로 이동한다. 그것이 2-D gel이며, SDS가 사용되고, 계면활성제는 단백질의 소수성 부위에 붙어 모두 음전하를 만든다. 단백질은 같은 전하이므로 전하보다는 M.W.에 의해 분석된다. 음전하를 띠는 단백질은 양전하 쪽으로 이동한다. 실험 방법 1. IPTG Induction 1) pPSC1(pPROEX-1 + pnrB)가 도입되어 있는 E. coli BL21을 LB에서 37℃ overnight로 배양한다. 2) 계대배양으로 pPSC1 : LB를 1:100 또는 1:50으.. Engineering/환경 | 토양 | 폐기물처리 공학 2022. 10. 11.

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  생명과학실험 | Gram Staining TIP 1. 그람 염색의 화학적, 이론적 기초를 파악하고 그람 양성과 음성의 박테리아를 구분할 수 있다. 2. 그람염색을 통해 미생물을 그람양성과 그람음성으로 분류한다. 그람염색을 통해 미생물을 분류할 수 있다. 그람염색법의 원리 그람 염색을 하기 위해선 관찰하고 싶은 세포에 염색액을 묻힌 후 요오드용액처리를 한다. 그 후 에탄올로 세포를 씻게 되면 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색(염색액의 색)으로 보이게 된다. 자주색으로 균이 보이게 되기 때문에 그람염색법을 이용하여 균을 관찰할 수 있었다. 하지만 에탄올 처리 과정에서 특정균의 경우에는 탈색되는 경우가 있다. 그래서 그람염색을 할 때 에탄올 처리 과정에서 탈색 되지 않는 세균을 그람 양성균이라 하고 탈색되는 균을 그람 음성균 이라고 한다... Biology/생명 과학 | 공학 2022. 7. 30.

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  환경미생물학실험 | Gram staining 미생물은 세균, 바이러스, 곰팡이, 원생동물, 효모 등의 여러 가지 형태로 나뉘어진다. 환경미생물을 간단히 확인하는 방법으로는 현미경 관찰이 우선적으로 이야기되는데 세균은 너무 작아서 관찰하기가 어렵다. 따라서 염색을 함으로써 미생물을 염색하여 세포와 배경간의 충분한 대조를 주어 현미경 관찰을 보다 쉽게 할 수 있다. 이러한 염색법의 종류에는 여러 가지가 있다. 단염색(simple stain), Gram stain, 항산성염색(Acid fast staining), 아포염색(Spore staining) 등이 그 종류이다. 그 중 우리는 이번 실험에서 Gram staining으로 E.coli와 bacillus를 염색하고 광학현미경을 통하여 관찰할 것이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Take a few .. Biology/미생물학 2022. 7. 25.

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  일반생물학실험 | Gram Staining TIP 1. Gram staining의 원리와 방법을 숙지한다. 2. Gram(+)균과 Gram(-)균을 관찰하여 미생물 분류의 기본을 익힌다. 세균의 세포벽의 구조 차이를 이용하여 분류하는 기초적 세균염색법의 일종으로 1984년 Christian Gram이 창안, 현재는 1921년 Hucker의 개선된 방법이 사용되고 있다. 이것은 세균을 크게 2군으로 분류할 수 있다는 점에서 오래 전부터 사용되어 왔으며 가장 기본적인 염색 방법이다. 우선 열고정시킨 세균을 염기성 색소로 염색한 후, I2-KI 혼합용액으로 처리한 다음, 아세톤 또는 알코올로 탈색하여 다른 색소로 염색한다. 처음에 염색한 색소로 염색되는 것을 Gram(+)라고 하고, 두번째 염색색소로 염색되는 것을 Gram(-)라 한다. Gram(+).. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 25.

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  화학공정실험 | 미생물 성장속도 실험 - Escherichia coli 의 성장속도 TIP 1. 미생물의 성장 속도에 대해 이해한다. 2. E.coli 의 배양에 관하여 알고, 배경이론에 따라 성장곡선을 그려본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 배양액, 삼각플라스크 준비하여 배양액 (LB Broth)를 제조한다. ① Yeast(5g) + Tripton(10g) + NaCl(10g) + Water로 total 1L를 autoclave로 멸균하여 LB medium을 준비한다. 2) 오염에 민감하므로 멸균 준비를 한다. ① 깨끗한 250㎖ armed flask와 stopper를 준비하여 autoclave로 멸균 처리한다. ② 고온, 고압의 멸균기로 멸균한다. 3) 배양을 할 Clean Bench의 조작한다. ① UV turn off → Fan on → FL on ② Clean Bench에 .. Engineering/화학생물공정 2022. 6. 14.

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  에너지공학실험 | 바이오가스 - 메탄발효 바이오가스는 미생물 등을 이용하여 하수나 동물의 분변 등을 분해할 때 생산 되어지는 수소, 메탄과 가스들을 의미합니다. 이것을 적정 과정을 통하여 메탄가스 또는 수소가스로 바꿀 경우 석유 소비의 일부를 보충할 수 있는 대체자원으로 활용이 가능하다. 실험 방법 1. 실험 조건 메탄발효를 통해 메탄을 포집을 확인하기 위한 재료로 음식물, 포도, 나무와 나뭇잎을 각각 넣은후 발효재를 넣고 밀봉을 하여 햇빛이 잘 드는 창가에 놔두었습니다. 2. 실험 과정 1) 각각 빈 통에 실험 재료를 넣고 뚜껑에 구멍을 조그맣게 뚫어, 메탄발효로 생성되는 메탄을 포집하기 위한 테들러 백을 설치하였습니다. 2) 뚜껑에 구멍을 뚫은 틈을 촛농으로 밀폐시키고, 용기와 뚜껑 사이의 틈은 파라핀 필름으로 밀봉하여 틈 사이로 메탄가스가.. Engineering/에너지공학 2022. 5. 22.

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  일반생물학실험 | 원생동물의 관찰 TIP 원생동물은 세포벽이 없는 진핵성 단세포 미생물로서 보통 운동성을 가진다. 이러한 원생동물을 관찰하고 운동기관에 따라 편모충류, 위족충류, 섬모충류, 포자충류로 분류해본다. 또한 각 운동기관의 특징과 구조를 파악하고 학습하도록 한다. 원생동물(protozoa) 모두 종속영양체(Heterotroph)로 주로 음식물(세균, 다른 원생생물, 또는 이들의 사체분해물)을 세포내로 삼켜서 영양을 섭취하는 원생생물을 의미한다. 진핵세포의 생물체로 대부분 광합성을 하지 않으며 이분법으로 번식하는 단세포 생물로 운동기관(섬모,편모,위족 등)을 지닌 비교적 복잡한 구조를 하고 있고 무색이다. 원생동물은 진핵세포의 일반적 특징과 세포의 크기(세포보다 훨씬크다)에 의하여 박테리아와 쉽게 구별되고, 조류와는 엽록소가 없기.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 8.

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  산업미생물학실험 | 하수처리 미생물을 이용한 수질정화 하수는 일반적으로 오수와 우수로 구성된다. 오수는 가정에서 발생되는 생활하수, 공장이나 사업장에서의 폐수, 지하수 등이 섞여 있는 물이며, 우수는 빗물이 도로 등의 배수로를 통하여 모여진 물을 말한다. 일반적인 하수처리 과정은 하수의 고형물질들을 제거한 뒤, 미생물을 이용하여 유기물을 분해하여 제거하는 과정을 거친다. 유기물의 측정기준은 BOD(biochemical oxygen demand)와 COD(Chemical Oxygen Demand)가 있는데, BOD는 미생물에 의해 이화될 수 있는 유기물만 포함하며, COD는 망간법과 크롬법을 통해 분해된 유기물을 측정한다. 위의 처리 과정을 거친 후에도 오염물질이 일부 남아있으며, 남아있는 무기성 이온, 영양염류 등은 하천, 호소, 해역에서 부영양화와 적조현.. Biology/미생물학 2021. 11. 4.

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  일반생물학실험 | 신체미생물 관찰 TIP 실제 우리 주변에서 생활하면서 접하게 되는 것들에게서 미생물을 배양함으로써, 주변에서 볼 수 있는 균의 종류를 알고, 우리 주변에 출현하는 미생물의 종류와 위생 상태를 점검할 수 있다. 미생물의 순수분리배양법 미생물의 순수 분리는 단일 세포에서 자라난 세포 집단인 순수배양(pure culture)로 각각의 종의 특성을 연구하기 위해 필요하다. 미생물을 순수 분리하는 방법에는 여러 가지가 있다. 1. 획선평판법 : 루프나 면봉을 이용해서 배지의 한쪽 끝에 접종한 다음 몇 가지 형태를 그리면서 표현 전체레 획선을 긋는다. 첫 번째 부분에 획선을 그은 다음에는 루프를 다시 멸균시키고 첫 번째 부분에서 접종원을 취해서 두 번째 부분에 획선을 긋는다. 이 방법은 비교적 쉽고 single colony를 분리.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 21.

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  일반생물학실험 | 미생물 유전정보 분석 TIP 균을 장기간 보관할 수 있는 stock solution와 균을 배양학 위한 LB agar 배지를 직접 제작해본다. 이 과정에서 마이크로피펫을 포함한 다양한 실험 기구들의 사용방법을 익힌다. 또한 PCR과 겔 전기영동의 원리를 이해하고 이를 활용해 배양한 균의 염기서열을 직접 산출해낸다. 산출된 염기서열을 sequencing과정을 통해 미생물의 종을 확인해보며 Hydrolysis test, 그람염색법 그리고 Oxidase, catalase test을 이용해 실험으로 확인할 수 있는 균들의 특징을 확인해 보는 것까지가 이번 실험의 목표이다. 실험 방법 1. 배지 제작 및 미생물 배양 1) 플라스크에 증류수를 150㎖와 LB media 3.75g, Agar 2.25g를 넣는다.(단, LB media와 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 1.

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  일반생물학실험 | Transformation - 미생물에서 재조합 단백질 발현 TIP  E.coli의 transformation 실험을 통해서 유전 공학에 많이 쓰이는 transformation의 기작을 이해하고, 그 방법을 익힌다.   형질전환(TRANSFORMATION)형질전환이란 수용세포에 노출된 DNA가 흡수, 통합, 발현되는 과정을 나타내며 몇몇의 박테리아 사이에서 자연적으로 일어나는 현상이다 (예로 Stretococcus와 Bacillus). 대장균을 포함한 다른 종은 외부DNA를 흡수할 능력이 없다. 이러한 한계점을 극복하기 위해서 수용세포로 DNA를 삽입하기 위한 인공적인 방법이 고안되었고 수많은 실험생물에 적용되었다. 움직이게 할 수 있는 DNA의 2번째 방법인 형질전환은 1928년 Fred Griffith에 의해 발견되었다.  형질전환은 유전자 형태에서 수용성 C.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 20.

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  일반생물학실험 | 알코올 발효 TIP 효모에 의한 알코올 발표 정도가 당의 종류에 따라 어떻게 다른지 설명할 수 있다. 발효 대략 적으로 말해서 산소가 없는 상태에서 미생물에 의하여 당류가 알코올과 이산화탄소로 분해되어 알코올을 생성하는 발효이다. 미생물에 의한 탄수화물의 무산소적 발효의 일종으로, 당 또는 다당류에서 최종적으로 에탄올과 이산화탄소를 생성하는 것이다. 반응식은 C6H12O6 → 2CH3CH2OH＋ 2CO2이다. 이러한 작용을 하는 미생물로 가장 잘 알려진 것은 우리가 실험에서 사용하는 효모이며, 글루코스, 프럭토스, 말토스, 슈크로스를 발효시킬 수 있다. 알코올발효는 미생물(특히 곰팡이)이나 고등식물에서 볼 수 있으나, 대부분의 동물조직에서는 알코올발효가 일어나지 않고, 탄수화물은 산소가 없는 상태에서 분해되어 젖산을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 16.

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  생물학개론 | 미생물의 유전 TIP 1. 미생물 세균 DNA 2. DNA복제 3. DNA 수선 4. 재조합 5. 전위 6. 형질도입 7. 플라스미드 8. 접합 9. 형질전환 미생물 세균 DNA 디옥시리보핵산 또는 DNA는 생물체의 유전 물질로서 유전자들이라는 기능적 단위로 구분되어있다. 거의 전부의 유전자는 폴리펩티드들 또는 단백질들을 암호화한다. 나머지 유전자들은 단백질로 만들어지지 않는 RNA분자를 암호화한다. 유전자의 염기 서열은 그것이 암호화 하는 폴리펩티드의 구조를 결정한다. DNA의 염기 서열의 안정적인 복제는 생물체의 고유의 특징이 그 자손에게 그대로 전달되는 것을 보장한다. DNA는 5‘에서 3’ 방향으로만 중합된다. 뉴클레오티드의 전구물질은 뉴클레오시드 5‘ 이며 늘어나는 DNA사슬에 중합되면서 두 개의 인산을 소실.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 2.