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  일반물리학실험 | 자외 및 가시분광광도계 원자 및 분자 스펙트럼모든 원자 및 분자는 전자기 복사선을 흡수하는 고유한 특정 주파수를 가진다. 원자 스펙트럼은 원자 내 전자가 일정한 에너지 상태에서 다른 상태로 전이할 때 흡수 또는 방출되는 빛의 스펙트럼을 말한다. 원자의 전자는 에너지를 흡수하며 들뜬 상태가 되고, 다시 빛을 방출하며 바닥 상태가 된다. 원자 내 전자의 전이는 원자의 전자 궤도의 에너지 준위 변화로 인해 일어나는데, 원자 내에서는 에너지가 양자화 되어 있기 때문에 전자 전이 시에 구할 수 있는 에너지는 불연속적이다. 또 각 원자는 고유한 전자 궤도의 에너지 준위를 가지고 있기 때문에 특정 스펙트럼을 가진다. 분자 스펙트럼은 분자의 에너지 준위 사이에서 전이가 일어날 때 관찰되는 빛의 스펙트럼이다. 분자의 에너지 준위는 전자의 상태.. Engineering/물리학 2024. 3. 14.

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  생화학실험 | 단백질 정량(Lowry 법) TIP 어수리의 추출 희석액으로부터 어수리의 단백질을 Lowry법으로 정량한다. Lowry법 알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu2+이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. 발색의 정확한 기작은 밝혀지지 않았지만 Cu2+ 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시킨다. 이러한 반응 결과 강한 푸른색을 생성하며 그 강도는 tryptophan과 lysine양에 영향을 받는다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01～1.0㎎/㎖의 경우에 측정가능하다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 교반 추출액(10000ppm 용액)을 1000ppm으로 희석하여 마이크로튜브에 넣고 Vort.. Biology/생화학 2023. 3. 24.

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  일반생물학실험 | 양파 표피세포 속의 세계 TIP 식물세포인 양파 표피세포를 재료로 생명현상이 일어나는 가장 기본적 단위인 세포의 구조를 광학 현미경으로 살펴보고, 세포를 잘 관찰하기 위해 사용되는 염색의 원리를 알아본다. 세포막은 인지질, 단백질, 당으로 이루어진다. 인지질은 2중층(단일막)으로 구성되는데 인산과 지방산으로 이루어지며 인지질층의 바깥쪽은 친수성(인산)끼리 맞닿아 있고, 안쪽은 소수성(지방산)끼리 맞닿아 있다. 세포의 막에서 핵, 미토콘드리아, 엽록체 등은 2중막으로 되어 있고, 소포체, 골지체, 리소좀, 액포 등은 단일막, 인과 리보솜은 비막 구조로 되어있다. 식물세포는 세포벽으로 인해 모양이 뚜렷한 다각형 모양일 것이라 예상된다. 광학현미경을 이용하여 식물세포를 관찰할 때는 염색약을 이용하여 세포나 세포 내용물을 염색한다. 대.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 12. 22.

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  일반생물학실험 | 여러 조건에 따른 효소 반응 TIP pH변화, 온도, 기질의 농도에 따른 효소 반응을 비교해본다. 효소 효소란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매이다. 특정 반응물과 결합하여 활성화에너지를 낮춰 반응을 촉진하는데, 효소와 결합하는 반응물을 기질이라고 하고 효소에서 기질과 결합하는 특정 부분을 활성부위 또는 기질결합 부위라고 한다. 효소의 활성부위에 기질이 결합하여 효소`기질 복합체를 형성하고 반응 결과 생성물이 만들어지면 효소는 생성물과 분리되어 또 다른 반응에 참여한다. 기질의 입체구조와 효소의 활성부위가 맞아야만 결합하여 반응할 수 있으므로 한 종류의 효소는 주로 한 종류의 기질에만 작용한다. 이러한 효소의 성질을 기질 특이성이라고 한다. 효소의 작용에는 여러가지 것들이 영향을 미친다. 우선 효소 는 단백질 촉매이므로 단.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 12. 1.

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  생명과학실험 | 단백질 분리정제 및 기능분석 TIP 1. DEAE Sepharoge anion exchange chromatography를 통한 단백질 분리 2. Column chromatography를 이용하여 Alkaline phosphatase를 분리한다. AP의 정제과정 1. AP가 outer membrane과 inner membrane 사이에 존재하는 경우, osmotic shock을 주어 outer membrane만 깨지게 한다. 2. Spheroplast 상태일때 centrifuge를 하면 supernatant와 pelet으로 분리된다. (이때, AP는 sup. 에 존재한다) 3. AP의 크기를 이용하여 dialysis를 하여 size 별로 분리한다. Bovine의 경우는 homodimer상태로 kDa=160-180 이다. 4. Bov.. Biology/생명 과학 | 공학 2022. 11. 2.

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  보건환경미생물학실험 | Observation of the expressed protein via SDS-PAGE TIP SDS-PAGE를 통해서 미생물이 발현한 단백질을 크기로서 구분해내고자 한다. 2-D electrophoresis 후에 그 튜브는 수직판 겔의 윗부분과 수평적으로 위치하고 단백질의 그 튜브 밖으로 나와서 크기에 따라 분리되는 젤로 이동한다. 그것이 2-D gel이며, SDS가 사용되고, 계면활성제는 단백질의 소수성 부위에 붙어 모두 음전하를 만든다. 단백질은 같은 전하이므로 전하보다는 M.W.에 의해 분석된다. 음전하를 띠는 단백질은 양전하 쪽으로 이동한다. 실험 방법 1. IPTG Induction 1) pPSC1(pPROEX-1 + pnrB)가 도입되어 있는 E. coli BL21을 LB에서 37℃ overnight로 배양한다. 2) 계대배양으로 pPSC1 : LB를 1:100 또는 1:50으.. Engineering/환경 | 토양 | 폐기물처리 공학 2022. 10. 11.

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  분자생물학실험 | Agarose gel electrophoresis TIP 일정한 pH의 전해질 용액 중에 단백질과 같은 입자를 부유시켜 전기장 내에 놓으면 이 입자는 전하를 띠어 반대 전극으로 이동하는데 이 현상을 전기영 동이라 하고 Agarose gel electrophoresis를 실험하자. 겔 전기영동 겔은 콜로이드(colloid) 용액이 굳어진 상태를 말하는 것이다. 전기영동이란 말은 전기적인 힘에 의해 전하를 띤 입자가 이동하는 것을 가리키는 표현이다. 따라서 겔 전기영동은 전류를 흘려주어서 전하를 가진 입자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기술이다. DNA 나 RNA의 경우 주로 아가로스를 사용하고, 단백질의 경우 폴리아크릴아마이드 등을 굳혀서 겔을 만든다. 구조나 크기 등 입자의 성질에 따라서 겔을 통과하여 이동하는 속도가 달라지게 된다. 겔에 홈을.. Biology/분자생물학 2022. 9. 30.

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  식품분석학실험 | 조단백질 함량 측정 TIP 1. 식품에 함유된 단백질은 아미노산으로 되어 있고 아미노산에는 질소가 포함되어 있다. 2. 질소의 양을 먼저 측정한 후 질소계수를 곱하여 단백질의 양을 구한다. 비지 비지는 두부제조의 부산물로 마쇄한 대두로부터 두유를 압착하고 남은 찌꺼기이며 두유로 추출되지 않은 불용성성분과 압착되지 않고 남은 두유로 이루어진다. 대두로부터 두유를 제조할 때, 비지가 되는 비율은 대두의 마쇄 정도나 가수량에 좌우되지만 대략 대두 고형분의 1/3～1/4이다. 실험 방법 1. 분해 1) 비지 1g을 유산지에 싸서 분해관에 넣고 분해촉매제 2g을 넣는다.(공시험을 위해 시료를 넣지 않은 유산지와 분해촉매제를 넣는다) 2) 진한황산 30㎖를 조심스럽게 분해관에 넣고 내용물을 진한황산에 충분히 적신다. 3) 분해관을 분.. Engineering/식품 영양 | 공학 2022. 9. 2.

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  식품기초실험 | 우유에서 casein 분리 및 Biuret 반응 단백질의 정색반응다수의 아미노산으로 된 단백질의 여러 가지 반응기 함유의 조건에 따라 여러 가지 화학반응을 사용한다.  Biuret반응정확성은 떨어지지만 신속하게 미량의 단백질을 정량할 필요가 있을 때 많이 이용되는 방법이다  실험 방법1. 실험 과정1) skim milk 2g을 물 50㎖에 녹인다. 2) skim milk 용액 50㎖에 40～42도 온수 150㎖를 가해 혼합한 후 10%초산을 가해 섞어주며 ph paper를 이용하여 pH를 4.5～4.6으로 조정한다 3) pH가 4.5～4.6이 되면 상온에서 20분간 정치하여 casein이 침전하도록 한다. 4) 상등액을 버리고 5N NaOH를 첨가하여 casein을 용해한다. 5) 여기에 1% CuSO4 용액 1～2㎖를 가해 색을 관찰한다.    [기.. Engineering/식품 영양 | 공학 2022. 7. 11.

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  세포생물학실험 | SDS-Page TIP  SDS-PAGE는 DNA를 전기영동으로 분리하여 크기를 알아보듯이 단백질도 SDS를 이용하여 전하는 모두 잃게 하고 크기에 의해 분리되게 만들어 전기영동을 통해 단백질의 크기를 알아본다.   Sodium dodecyl sulfate-polyacryamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)는 단백질을 정제하는 동안 이를 monitor하고, 정제된 단백질의 동질성(homogeneity)을 알기 위한 가장 좋은 방법이다. SDS-PAGE는 일반적으로 단위체의 분자량을 결정하고, 정제된 단백질의 단위체 구성을 알기 위해 사용된다. SDS-PAGE는 더 깊은 연구를 위한 충분한 단백질을 얻기 위해 scale up될 수 있다.   실험 방법1. 실험 과정1) 각 lane 별로 30㎕.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 30.

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  세포생물학실험 | Estimation of Protein TIP  단백질이 포함된 미지의 시약에 담긴 단백질의 총량을 알아낸다.   Lowry's method알칼리성에서 단백질의 펩타이드 결합과 구리가 반응해 Cu2+ 이온을 생성하는 뷰렛반응 원리를 이용한 방법이다. 구리이온의 화학변화에 영향을 주는 화합물이 존재할 경우 단백질 정량 측정을 간섭하게 되는데, 이를 위해 분적 전에 제거하거나 영향이 없을 정도로 희석하여야만 한다.  실험 방법1. 실험 과정1) 실험에 사용할 용액들을 제조한다.① Working standard 제조- Bovin serum albumin 10㎖를 증류수 100㎖에 용해시킨다.(stock solution)- Stock solution 10㎖를 증류수 100㎖에 희석시킨다. ② Folin’s phenol 시약 제조- Folin’s ph.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 24.

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  세포생물학 | 세포막의 물질수송 TIP 1. 세포막의 물질수송 2. 막 수송 3. 막 수송의 단백질 4. 결론 세포막의 물질수송 1. 막의 생물학적 역할 단백질, 지질, 탄수화물이 막 구조를 구성함으로써 독특하고 복잡한 생리적 특성을 가지는 특수한 물리적 배열을 가지게 된다. 언뜻 볼 때, 막의 경계는 단지 세포와 세포소기관의 민감한 내부를 외부 환경으로부터 격리하기 위한 보호막으로 생각된다. 막의 이런 역할도 중요하지만, 이들 막은 세포의 생명 현상 유지에 결정적인 다른 기능들을 수행한다. 막은 물리적 경계로서 세포의 모양과 형태를 결정하고, 세포의 성분들은 한데 묶어 놓으며, 세포의 구조적 통합성을 유지한다. 막 구조는 조직과 세포 내의 생화학적 활성을 조직화하고 구획화 한다. 그러나 세포는 완전히 격리된 상태에서는 생명을 유지할 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 14.

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  일반화학실험 | 혼합물 분리하기 TIP 1. 물질의 성질을 이용하여 혼합물을 분리할 수 있음을 안다. 2. 고체와 액체의 혼합물, 서로 섞이지 않는 액체 혼합물을 분리할 수 있다. 3. 일상생활에서 혼합물의 분리가 이용되는 예를 안다. 여과지 접는 방법 여과지는 원형의 이등분하고, 이것을 다시 이등분하여 4절로 접은 후에 원추형으로 하여 깔대기에 밀착시킴 → 4절 여과지의 경우 여과 면적이 원형의 반밖에 되지 않으므로 여과면적을 크게 할 목적으로 깔대기에 맞추어서 약간 편 후 깔대기에 밀착시킴. 여과지를 밀착시킨 깔대기는 깔대기에 두고 그 후에는 여과액을 받을 용기의 기벽에 깔대기의 끝이 접촉되도록 해둔다. 실험 방법 1. 흙탕물 분리하기 1) 흙탕물을 어떻게 맑은 물로 만들 수 있을까요? ① 비가 온 후에 강물이 매우 흐려진 것을 본.. Chemistry/일반화학 2022. 3. 15.

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  일반생물학실험 | 온도와 pH변화에 따른 Amylase 효소 활성 측정 TIP 1. 단백질로 구성되어 있는 효소는 생체 내에서 일어나는 화학반응의 촉매제로써 물질 대사를 좀 더 빠르게 해준다. 2. 본 실험에서 효소 α-Amylase를 이용하여 pH와 온도, α-Amylase의 농도에 따른 효소의 활성도 및 최적 활성 조건을 알아본다. 소화 섭취한 음식물을 분해하여 흡수하기 쉬운 형태로 변화시키는 일 또는 그런 작용으로 음식물을 씹는 작용에 의한 기계적 소화(소화효소가 음식물에 최대로 작용할 수 있도록 도와주는 과정 – 표면적증가)와 소화 효소에 의한 화학적 소화(영양소가 소화효소에 의해 분해되는 과정)가 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 6개의 E-tube에 (①～⑥) 1% 전분 용액을 200㎕ 넣는다. pH 실험의 경우 전분 용액 100㎕를 넣고 해당 pH 용액 1.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 12. 13.

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  일반생물학실험 | 세포 구성분자의 확인 TIP 1. 생물학 실험에 필요한 실험 기구 및 도구의 명칭과 사용방법을 익힌다. 2. 생물체의 중요한 고분자 물질인 탄수화물, 단백질, 지질의 구성과 기능을 이해하고 발 색 반응에 의한 생물학적 분자의 검정법에 대해 알아본다 실험 방법 1. 탄수화물 확인 - 요오드 시험 1) 증류수에 녹인 10% 녹말을 깨끗한 시험관 A에 1㎖ 넣는다. 2) A시험관에서 0.1㎖을 B시험관에 옮긴 뒤 B시험관에 증류수 0.9㎖을 넣고 잘 섞는다. 3) B시험관에서 0.1㎖을 C시험관에 옮긴 뒤 C시험관에 증류수 0.9㎖을 넣고 잘 섞는다. 4) 10% 요오드 용액(100㎕)을 3개의 시험관에 넣고 부드럽게 섞어준다. 2. 단백질의 확인 - 뷰렛 시험 1) 시험관 3개를 준비하고 A시험관에는 1% albumin 1㎖을,.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 10. 5.

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  기기분석실험 | Dialysis TIP Dialysis 원리를 알고 튜브 안쪽의 농도와 바깥쪽 농도를 비교해 본다. 그리고 양 쪽의 농도가 같아 지는 시간을 알 수 있을 것이다. 시료중의 buffer를 교환하거나 탈염하기 위한 가장 일반적인 방법이 투석과 겔여과이다. 한외농축의 경우는 용액을 가압해서 일반적으로 물 분자나 저분자를 제거하지만, 투석의 경우는 대단히 얇은 막(20～100㎛) 재생 cellulose제 다공성 막을 이용하여 자연 확산에 의해서 외액과 내액 간에서 저분자의 교환을 행한다. 아래 표에 나타낸 것처럼 3개의 회사로부터 여러 종류의 공경(한계 분자량)이나 여러 size를 가진 투석막이 판매되고 있다. 통상의 단백질에 대하여서는 Visking Celluolse Tubing(Viskase사)의 것도 좋지만, 저분자량의 .. Chemistry/기기분석 2021. 9. 18.

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  생화학실험 | Elastase 저해 활성 평가 TIP 펩타이드는 단백질 성분으로, 길고 짧은 아미노산으로 구성되어 있다. 단백질층을 쌓아주는 역할을 한다. 대부분의 펩타이드는 수분 결합(수분을 끌어들이는) 기능을 한다. 그리고 이론적으로는 피부 손상을 복구하라고 명령하는 세포 대화 성분이다. 이러한 이유로 주름개선효과를 내고 싶다면 펩타이드의 분열을 저해해야 한다. 펩타이드의 분열을 저해하는 방법 중 하나는 펩타이드 결합의 분열하는 과정에서 촉매역할을 하는 효소인 Elastase를 저해하는 것이다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 Elastase 활성 저해를 측정한다. 엘라스틴(Elastin) 엘라스틴은 콜라겐과 함께 결합조직에 존재하고 고무탄력성과 같은 신축성이 있는 단백질이며 조직의 유연성, 신축성에 관여하고 있다. 따라서 신축이 항상 반복되는 .. Biology/생화학 2021. 7. 21.

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  분자생물학실험 | Cell Migration assay TIP Cell migration을 유도하고 chemotaxis의 원리를 이해한다. Chemokines 케모카인은 약 100여개의 아미노산으로 구성된 작은 단백질들의 집단으로, 선택적으로 백혈구 소집단의 세포접합, 화학유인작용, 활성화 등을 조절하는 cytokine을 말한다. 케모카인의 이러한 기능 때문에 이들이 염증반응에서 중추적인 역할을 하는 것이다. 케모카인은 림프조직 분아니라 비림프조직에서도 만들어져, 백혈구들이 림프조직이나 일반조직에서 이동하는 과정을 조절한다. 또한 케모카인은 혈관을 통과하여 조직으로 침투한 백혈구를 농도의 차이를 이용하여 염증부위로 유인하는 작용 (chemotaxix)도 나타낸다. 케모카인은 연속된 두개의 cystein의 위치에 따라 CC chemokine과 CXC chemo.. Biology/분자생물학 2021. 7. 8.