반응형 일반생물학실험 | Bradford법을 이용한 단백질의 정량 분석 TIP Bradford법을 이용하여 단백질 정량을 하고 이를 바탕으로 Standard curve를 그린다. 단백질 정량을 하는 이유단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양,또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생화학 실험에 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우 다른 분야와 달리 실험 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워, 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘 못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다. 이러한 이유 때문에, 단백질을 정확하게 정량하는 것은 매우 중요하다. 실험 방법1. 실험 과정1) 주어진 BSA 2㎍/㎖ 용액 0.8 ㎖ , 증류수 3.2 ㎖ 를 마이크로 피펫으로 취하여 혼합하여 희석한다.(BSA 농도는 400㎍/㎖이 된다... Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 6. 17. 분석화학실험 | 탄산수소나트륨과 탄산나트륨 혼합물의 정량 역적정 부피분석에 있어서 농도를 알고 있는 한 쪽 산 또는 염기용액의 부피를 사용하여 다른 염기 또는 산을 적정하고, 지시약으로 중화점을 확인해 나가는 것이 액체의 산성 ·염기성을 알기 위한 정상적인 방법이다. 이것에 대하여 역적정은 간접적으로 적정을 행하는 방법이다. 예를 들면, 농도를 모르는 수산화칼륨 10㎖와 농도 1㏖의 염산 20㎖를 가하여 혼합액이 산성을 띠게 한다. 이 혼합액 속의 과잉의 산의 양을 측정하기 위하여 1㏖의 수산화나트륨용액을 중화될 때까지 적정을 행한다. 이 중화점에 이르기까지에 소요된 수산화나트륨의 부피가 10㎖였다고 하면 20-10=10㎖, 즉 1㏖의 염산 10㎖는 원래의 수산화칼륨 10 ㎖ 속의 염기 총량에 해당하게 되는 것이다. 즉, 수산화칼륨의 농도가 1㏖인 것을 알 수.. Chemistry/분석화학 2023. 4. 4. 생화학실험 | 단백질의 정량분석 TIP Lowry method와 Bradford method를 사용하여 단백질(protein)의 농도를 측정한다. 단백질의 정량 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로 280 ㎚에서 흡광도를 측정하는 방법과 단백질의 농도에 따른 색의 변화를 이용하여 분석하는 방법이 있다. 색의 변화를 이용하는 비색정량분석 (colormetric analysis)에는 Bradford법, Biuret법, Lowry법, Bicinchoninic acid법 등이 있다. 280 ㎚의 파장에서의 흡광도 측정 방법은 tyrosine이나 tryptophan 잔기의 흡광도를 측정하는 방법으로 장점으로는 분석이 빠른 것을 들 수 있으며, 단점으로는 tryptophan의 함량 변화에 따라 흡광도가 틀려지고 같은 파장의.. Biology/생화학 2023. 3. 30. 일반화학실험 | 비타민 C 분석(Analysis of Vitamin C) TIP 산화-환원 반응을 기초로 하는 직접 요오드 적정(iodimetric titration)을 이용하여 비타민 C를 분석한다. 비타민 C(일명 아스코브산(ascorbic acid))는 공기 중에서 천천히 산화되어 의약품과 과일, 채소 등의 음식물에 들어있는 비타민 C는 실제 표기된 양보다 적을 수 있다. 그래서 실제로 비타민 C가 얼마나 들어 있는지 분석해 보는 것이 이번 실험이다. 비타민 C를 분석하는 데에는 산화-환원 반응을 기초로 한 직접 요오드 적정(iodimetric titration)을 활용한다. 실험 방법 실험 A. 표준 비타민 C로써 요오드 표준화 1) 50㎖ 뷰렛을 소량의 요오드 용액으로 헹군 후, 요오드 용액을 2/3정도 (약 30㎖) 채우고 소량의 요오드 용액을 뷰렛 끝으로 흘려 보.. Chemistry/일반화학 2023. 3. 27. 기기분석실험 | 안트라센(Antracene)의 정량분석 TIP FLD 검출기와 외부표준물법을 이용하여 미지 시료 속 Antracene을 정량분석한다. 안트라센 1832년 프랑스의 J. B 뒤마에 의해 콜타르 속에서 발견되어, 석탄을 뜻하는 그리스어 anthrax를 따서 명명되었다. 벤젠 고리 3개의 축합 고리가 있는 방향족 탄화수소 C14H10. 무색 결정으로, 녹는점 216℃, 끓는점 342℃이다. 벤젠·톨루엔·클로로포름 등의 유기 용매에는 녹지만, 물에는 녹지 않는다. 안트라퀴논을 환원시키는 방법으로 합성할 수도 있으나 공업적으로는 안트라센유(油)를 석출하여 얻는 안트라센케이크에서 분리 정제한다. 콜타르에 함유되며 염료 등의 합성 원료가 된다. 특히 산화하여 얻어지는 안트라퀴논은 염료 중간물로서 중요하다. 신틸레이터로서도 사용되고, 유기 반도체로서 흥미를.. Chemistry/기기분석 2023. 3. 13. 분석화학실험 | 인산의 정량분석 실험 요약 미지시료 내 P2O5의 %함량을 구하기 위해 UV-Vis흡수분광법을 실시하여 검정곡선법을 통해 확인한다. 그 과정에서 Beer-Lambert의 법칙이 사용되며, 흡광도를 측정하기 위해 UV-Vis spectrometer를 이용한다. 검정곡선의 함수식 계산을 통해 미지시료의 농도를 구하고, 그것을 이용해 인산의 %함량을 구할 수 있다. 실험 개요 분광광도법은 물질의 농도를 분석하는데 간편하고 정확성이 뛰어나 오래 전부터 이용되고 있다. 분광광도법의 기본원리를 숙지, 분광분석기의 원리를 이해하고 시료 처리 기법을 습득하여 빛의 흡수관계, 농도 및 빛의 흡수광량과의 상호작용을 이해한다. 실험 방법 1. 발색 시약 제조[메타바나드산 암모늄 용액 + 몰리브덴산 암모늄 용액] 1) 메타바나드산 암모늄 용.. Chemistry/분석화학 2023. 3. 8. 분석화학실험 | UV-VIS Spectrum을 이용한 코카콜라 속 카페인 정량 분석 TIP 분광광도법을 이용하여 콜라속 카페인의 양을 정량한다. UV 분광법 물질에 따른 가시 적외선의 흡수는 그 분자의 바닥상태에 있는 전자가 광에너지 (E=hv)를 흡수하여 들뜬 상태로 전의함으로써 일어난다. 이 흡수의 크기는 파장에 따라 다르며 파장에 따른 흡수스펙트럽은 물질의 특유한 것이다. 분자내의 전자가 전이를 일으키는데 큰 에너지가 필요하며 자외선 혹은 가시광선이 흡수 된다 . 이러한 성질을 이용하여 시료를 분석하는 것을 가시 자외선 흡수스펙트럽법이라고 한다. 가시 자외선 광도계는 일정한 파장에서 흡광도를 측정할 수 있을 뿐만 아니라 시간의 추이에 따른 흡광도의 변화 일정범위에 걸친 파장에 따른 흡광도의 변화들을 측정할 수 있다. 분광광도법에서 측정하고자 하는 양은 흡광도 이다. 그러나 흡광도를.. Chemistry/분석화학 2022. 12. 14. 일반화학실험 | 착물화법 TIP 착물화법 적정을 위한 EDTA용액을 표준화 시키고, 자연수 내의 경도를 측정한다. 적정 적정이란 일정한 부피(V1)의 미지농도(M1)의 시료에 농도(M2)를 알고 있는 물질을 일정 지점(V2)까지 첨가하는 실험 방법입니다. 적정에서는 반응이 완료될 때까지 적정제를 계속해서 넣어줍니다. 측정에 적합하게 되도록 적정 반응의 종료를 쉽게 관측 할 수 있어야 합니다. 적정이 완료됨을 확인을 위해 센서로 측정하는 전위차법 혹은 색상 표시기 등 적절한 방법을 이용해 반응을 표시해야합니다. 적정을 한 반응은 빠르고 완전하고 분명하게 관찰 할 수 있어야 합니다. 적정하기 힘들시 화학 반응의 화학량론을 이용해 분석 물질 함량을 계산 할 수 있습니다. 적정법의 종류로는 다음과 같습니다. 시각 적정인 지시약 적정법이.. Chemistry/일반화학 2022. 11. 9. 일반화학실험 | 양이온 제3족의 정성분석 TIP 양이온 3족은 침전이 되지 않아 양이온 2족과 구별되고, 염기성에서 수산화물을 형성하는데 대표적으로 Cr3+, Al3+, Fe3+, Ni2+,Co2+, Zn2+및 Mn2+등이 있다. 이 원소들은 알칼리 용액에서 황화물 침전을 만들기 때문에 분리가 되며 특히 착염 형성 반응을 응용하여 확인 반응을 하게 된다. 실험 방법 1 시료 용액 1) 각각 0.1M의 Fe3+, Al3+, Cr3+, Ni2+용액을 1㎖씩 혼합하여 그 혼합 용액 1㎖를 취하여 사용한다. 2 Cr의 산화 및 난용성 수화물의 분리 1) 시료 용액 1㎖를 작은 시험관에 넣고 3% H2O2 3방울을 가한다. 2) 6M NaOH 15방울을 가하여 용액을 센 염기성으로 만든다. 3) 1분간 저어 준 다음 조심스럽게 끓여서 여분으로 넣은 H2.. Chemistry/일반화학 2022. 2. 27. 분석화학실험 | 과산화수소 및 탄산칼슘 정량 TIP 1. 과망간산칼륨 표준용액을 이용해 과산화수소와 탄산칼슘 정량을 산화-환원적정법을 통해 구하는 것이다. 2. 산화환원적정에서 과망간산칼륨 표준용액이 산화제로써 어떻게 분석물질과 반응하는지를 이해하고, 화학식을 통해 탄산칼슘을 정량하기 위해서는 어떻게 실험식을 세워야 하는지에 대해 이해도 필요하다. 산화-환원적정은 산화제의 산화력과 환원제의 환원력을 이용하여 시료속의 분석물을 완전 산화 또는 환원시키는데 필요한 양을 측정함으로서 분석물을 정량하는 방법이다. 실험 방법 1. 과산화수소(H2O2) 정량 1) H2O2 1 ㎖와 증류수 50 ㎖를 삼각플라스크에 넣는다. 2) 10% H2SO4 10 ㎖를 1삼각플라스크에 넣는다. 3) 0.1 N-KMnO4 로 적정하며 무색에서 분홍색이 되는 지점을 종량점으로.. Chemistry/분석화학 2022. 2. 2. 분석화학실험 | 황산이온의 정량 TIP 무게 분석법(침전법)을 이용하여 황산바륨의 무게로부터 황산염이온의 정량을 구한다. 황산염 이온을 포함한 용액에 염화바륨을 가했을 때 생성되는 침전물을 감압여과 한 후에 강열하여 얻은 황산바륨의 무게를 측정하고 분자량 비율을 이용하여 황산이온의 무게를 정량한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 도가니를 전기로에 600℃에서 15분간 가열한 뒤 데시케이터에서 식힌다. 2) 부피 플라스크에 순수한 Na2SO4 0.5g을 녹인 증류수 200㎖에 진한 HCl 1㎖를 용액에 가한다. 3) 부피 플라스크에 AgNO3 8.5g을 증류수에 녹여 500㎖, 0.1M의 AgNO3수용액을 만든다. 4) 부피 플라스크에 BaCl2 5.21g을 증류수에 녹여 500㎖, 0.05M의 BaCl2 수용액을 만든다. 5) 2)번.. Chemistry/분석화학 2022. 1. 24. 분석화학실험 | 0.1N 과망간산칼륨 표준액의 조제와 표정 TIP 산화되거나 환원될 수 있는 물질을 산화제 또는 환원제의 표준용액으로 적정하여 그 소비된 양으로부터 정량하는 산화-환원 적정법을 다룬다. 산화제로서는 가장 흔히 쓰이는 과망간산칼륨 용액을 선택하고 옥살산나트륨으로 표정한다. 산화 환원 적정 산화·환원 반응을 이용한 적정으로 산화제를 표준액으로 하는 경우를 산화 적정, 환원제를 표준액으로 하는 경우를 환원 적정이라고 한다. 적정의 종말점 판정은 지시약의 변색이나 전위차 적정이 일반적이다. 산화는 전자를 잃는 (산화수가 증가하는) 반응을 말하고, 환원은 전자를 얻는 (산화수가 감소하는) 반응을 말한다. 산화 환원 반응에서 어떤 원자가 전자를 방출하면 방출한 전자수 만큼 원자의 산화수가 증가되고, 반면에 전자를 받으면 원자는 반은 전자수 만큼 산화수가 감.. Chemistry/분석화학 2021. 12. 15. 일반화학실험 | Vitamin C의 분석 TIP 1. 비타민 C에 대해 알아보자 2. 산화-환원 분석 실험을 통하여 일정량 속에 들어 있는 비타민C의 양을 구해보자 3. 비타민 C가 신체에 어떤 영향을 미치고 그 이유를 알아보자 Vitamin C 선원들에게 많이 발병한 괴혈병에서 유래. 학명은 ascorbic acid이며 화학식은 C6H8O6이다. 쉽게 산화되어서 환원제로 많이 사용되며 알칼리에 불안정하고 약산에 안정하다. 직접 요오드 적정법 요오드가 산화제 역할을 하는, I2 + vitamin C ⇒ 2I- + 산화된 vitamin C + 2H+ 의 반응식을 이용한다. 소모된 I2의 양을 알면 함께 반응한 vitamin C의 양 또한 구할 수 있다. (적정법) I2의 합성 I2는 맹독이고, 불용성이므로 다음의 반응을 이용한다. KIO3 + 5.. Chemistry/일반화학 2021. 9. 11. 일반생물학실험 | 단백질의 정량 및 정성 분석 TIP 정성분석(뷰렛방법)을 통해 단백질의 포함 유무를 분석하고 정량분석(BCA법)을 통해 단백질의 양을 측정한다. 단백질 모든 단백질은 널리 존재하는 20가지 종류의 아미노산이 특징적인 선상의 서열로 공유결합된 것이다. 이러한 각 아미노산은 각각의 특유의 화학적인 성질을 나타내는 곁사슬을 가지고 있으며 이 20가지 종류의 전구체 분자로 된 집단은 단백질 구조의 언어로 쓰이는 알파벳과 같다고 볼 수 있다. 단백질은 몇 개의 아미노산 잔기로 이루어진 비교적 간단한 펩타이드에서 분자량이 수백만이나 되는 거대한 중합체(polymer)까지 존재한다. 아미노산은 R기의 극성과 전하(pH7에서)에 따라 5가지 종류로 분류할 수 있다. 비극성, 지방족 R기 알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 글라이신, 메싸이오닌, .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 8. 일반화학실험 | 제산제와 아스피린의 정량 TIP 위산과다에 복용하는 제산제 등은 염기이며, 감기약으로 복용하는 아스피린은 약산이다. 따라서 앞에서 제조하고 표준화한 염산과 수산화나트륨 표준 용액으로 제산제 및 아스피린을 적정 할 수있다. 여기서는 식용소다(탄산수소 나트륨) 아스피린을 약염기~강산 및 약산-강염기 시료의 제산제 적정법으로 적정하여 두 가지 시료의 순도를 결정하는 실험을 수행한다. 중화적정 산과 염기가 반응하여 중화가 일어날 때 양적 간계를 이용하여 농도를 모르는 산-염기의 농도를 결정하는 것을 중화적정이라고 한다. 산염기 적정 수용액에서의 중화 반응을 이온방정식으로 표시하면 다음과 같다. H3O+ + OH- ↔ 2H2O 이 반응은 용액에서 일어나므로 용액이 농도를 생각하지 않을 수 없다. ㏖e농도의 용액의 일장한 양에 들어 있는 .. Chemistry/일반화학 2021. 6. 12. 일반화학실험 | 음이온 분석 TIP 1. 용액 중에 녹아있는 음이온의 점적 분석으로 특성을 확인한다. 2. CO32-, SO42-, I-의 음이온의 화학적 특성을 이해하고, 미지 시료의 음이온 분석에 응용하여 본다. 용액 속에 녹아있는 음이온을 확인할 때에는 음이온마다 독특한 확인 방법을 사용하는 것이 일반적이다. 본 실험에서는 CO32-, SO42-, I-의 음이온들을 점적 분석(spot analysis)을 통해서 확인한다. 이 분석 방법에서는 소량의 시료 용액에 적당한 시약을 떨어뜨려서 시료에 포함된 음이온과 독특한 반응을 일으키게 함으로써 음이온을 확인한다. 이때 시료에 여러 가지 성분이 포함되어 있는 경우에는 한 성분이 다른 성분의 검출을 방해할 수 있기 때문에 조심해야 한다. 이런 경우에는 점적 분석을 하기 전에 이들 성분.. Chemistry/일반화학 2021. 5. 17. 일반화학실험 | 음이온의 확인 - 점적분석 TIP 용액 중에 녹아있는 음이온의 점적분석으로 특성을 확인 한다. 점적분석 (Drop analysis) 정성분석에 사용되는 미량분석. 반점분석이라고도 함. 시약과 시료를 점적판 또는 거름종이로 만든 반점지 위에 떨어뜨리고 그 발색반응을 이용한다. 점적 분석 방법에서는 소량의 시료 용액에 적당한 시약을 떨어뜨려서 시료에 포함된 음이온과 독특한 반응을 일으키게 함으로써 시료에 포함된 음이온을 확인한다. 시료에 여러 가지 성분이 포함되어 있는 경우에는 검출을 방해하는 성분들을 분리 또는 용액의 pH를 변화시키거나 가리움제를 사용한다. 특수한 기구를 필요로 하지 않고, 시약·시료 모두 소량으로 되고 조작에 큰 공간도 필요로 하지 않는데다가 반응결과도 매우 예민하다. 주로 금속이온·유기화합물 및 작용기의 검출이.. Chemistry/일반화학 2021. 4. 25. 일반화학실험 | 혼합물의 퍼센트(%) 조성 결정 TIP 정량분석의 하나인 중량분석법으로 %를 결정한다. 물질을 분석하는 방법 물질을 분석하는 방법으로는 크게 정성 분석과 정량 분석이 있다. 정성분석은 화학분석법 중에서 시료가 어떤 성분으로 구성되어 있는지 알아내기 위한 분석법의 총칭이며 GC, LC, IR, UV 등이 있다. 정량분석은 물질을 구성하는 양적 관계를 명확하게 하는 분석법의 총칭이며 중량분석, 용량분석, 비색분석 등이 있다. 중량분석(gravimetric analysis) 어떤 물질을 구성하고 있는 성분 중에서, 목적하는 성분을 홑원소물질 또는 화합물로서 분리시키고 이들의 무게를 측정함으로써 목적하는 성분의 양을 결정하는 방법을 말한다. 표준시료를 필요로 하지 않는 몇 개 안되는 절대법의 하나이며, 주성분으로서 함유되어 있는 성분의 정량에.. Chemistry/일반화학 2021. 4. 15. 이전 1 2 3 다음 반응형