일반생물학실험 | 식물 색소 분리

 

 

 

광합성 반응의 개략

광합성이란 빛에너지를 화학에너지의 형태로 변환시키는, 식물을 포함하여 엽록체를 가지고 있는 생물들이 행하는 동화 반응이다. 엽록체는 현탁액인 스트로마와 그 안에 납작한 주머니 모양이 쌓인 라멜라 구조를 하고 있는 그라나로 이루어진다. 광합성은 명반응과 암반응으로 이루어졌으며 각각 그라나와 스트로마에서 그 반응이 진행된다. 광합성의 전체 식은 다음과 같다.

 

 

이 중 물을 광분해하여 산소와 NADH₂를 만드는 과정이 명반응이며, CO₂로 포도당을 만들어내는 과정이 암반응이다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 시험관에 용매를 5㎖ 넣고 내부에 용매기체가 포화되도록 기다린다.

 

2) 여과지를 tube에 적당한 크기(1.5 × 12㎝)로 자르고, 한 쪽 끝을 잘라 뾰족한 모양을 이루게 한다.

 

3) 끝에서 2.5㎝ 띄고 연필로 선을 긋는다.

 

4) 엽록소 추출물은 시금치 3g에 100% aceton 3-5㎖ 정도를 넣고 빠른 속도로 갈아서 만들고 이를 원심분리하여 상등액을 이용한다.

 

5) Pasteur pipette을 이용하여 엽록소 추출물을 연필로 그은 선 중앙에 원 모양으로 점적한다(말려가면서 3-4회 반복 점적).

 

6) 여과지를 이쑤시개에 고정시킨 후, 전개 용매가 들어 있는 tube에 넣어 약 0.5㎝정도만 용매에 잠기도록 한다. 이 때 3M paper가 시험관 벽에 닿지 않도록 주의한다.

 

7) 이 방법을 이용하여 몇 가지 색소가 분리됨을 확인하고, 각 색소의 Rf 값을 구한다.

 

8) 위의 여과지에 나타난 여러 밴드 중 가장 두드러지게 나타나는 녹색밴드 부위를 다른 색 밴드가 섞이지 않도록 잘라낸다.

 

9) 잘라낸 것을 e-tube에 담고 1㎖의 아세톤을 부은 후 잘 흔든다.

 

10) Spectrophotometer를 이용하여 380㎚에서 700㎚까지의 파장에서 20㎚ 간격으로 흡 광도를 측정하여 그래프를 그려 최대 흡수파장을 알아본다.

 

 

 

[일반생물학실험] 식물 색소 분리 레포트