일반생물학실험 | 색소 분리

 

 

 

식물은 태양 에너지와 간단한 몇 가지 무기 물질을 이용하여 세포에 있는 엽록체에서 에너지 화합물을 합성하고 그 과정에서 산소를 만들어 내는데 이것을 광합성이라고 한다.

 

 

 

크로마토그래피의 원리

색소 혼합물에 들어있던 색소들은 이동 속도의 차이에 의해 서로 분리 유기용매에 잘 녹는 색소가 덜 녹는 색소보다 멀리까지 이동

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실험 방법

1. 광합성 색소의 분리

1) 본 실험에서는 일정량의 시금치를 적당히 잘라 막자사발에서 methanol 10㎖과 chloroform 2㎖을 넣고 (엽록소는 물에는 녹지 않지만, 유기용매에는 잘 녹는다)막자사발로 곱게 간다. 모든 toxic한 유기용매는 첨가나 제거시 흄 hood를 이용한다.

 

2. 종이 크로마토그래피를 이용한 엽록체 색소 분리

1) 여과지를 세로 12㎝와 가로 1.5㎝ 크기로 자른다. 여과지를 한쪽 끝에서 1㎝ 되는 곳을 잘라 삼각형을 만든 다음 이곳으로부터 2㎝ 되는 곳에 연필로 선을 긋는다. 이때 여과지를 손으로 만지지 않도록 한다.

 

2) 모세관을 사용하여 준비된 엽록소 추출액을 연필로 그은 선 중앙에 점적한다. 이때 점적된 부분이 가능한 원이 되도록 한다. 완전히 말린 후 4～5회 정도 반복하여 점적한다.(색소 농축 효과)

 

3) 핀으로 여과지를 시험관 마개에 매달고 여과지가 10㎝ 되는 부분에 핀을 꼽아 미리 준비한 전개용매(Toluene)가 시험관의 눈금 5까지 들어 있는 시험관 (Hood 안에 준비)에 넣는다. 여과지가 시험관 벽면에 닿지 않도록 주의하고 전개용매에는 약 0.5㎝ 정도만 잠기도록 한다.

 

4) 전개액이 여과지위에서 시험관 눈금 35㎖ 정도까지 전개되었을 때 여과지를 꺼내어 전개액이 전개된 부분을 연필로 표시한 후 여과지를 완전히 말린다.

 

 

 

[일반생물학실험] 색소 분리 레포트