1. HPLC(High Perfomance Liquid Chromatography)의 개요
2. HPLC의 종류 (컬럼, 판)
3. LC방법 선택시 고려 조건
4. HPLC 방법의 선택 원칙
5. HPLC 구조 및 장치
6. 분리 메카니즘
7. 분리도 증대의 원칙
8. 액체 크로마토그래피의 종류
HPLC(High Perfomance Liquid Chromatography)의 개요
1. 높은 감도
2. 정확한 분석
3. 비휘발성 성분이나 열적으로 불안정한 물질을 쉽게 분리 분석
4. 취급 물질의 종류 : 아미노산, 단백질, 헥산, 탄화수소, 탄수화물, 약품, 테르노이드, 살충제, 항상제, 스테로이드, 금속-유기물, 여러 가지 무기물
5. 종류별 분리 메카니즘
1)분자량이 작은 이온성 화학종의 경우 : 이온교환 크로마토그래피
2) 비금속 화학종과 구조 이성질체 및 지방족 알코올에서 지방족 탄화수소와 같은 화합물의 분리 : 흡착 크로마토그래피
3)극성이 작고 비이온성인 화학종 : 분배 크로마토그래피
HPLC의 종류 (컬럼, 판)
LC방법 선택시 고려 조건
1. 시료의 성질(즉, 분자량, 수용성 및 지용성, 이온성 및 비이온성)
2. 요구하고 있는 분리인자의 형태
3. 실험상의 용이점(즉, 시료채취, 실험조건 결정, 컬럼의 안정성, 컬럼의 유효성, 컬럼 충전, 실험의 용이성)
1) 정상상 크로마토그래피 : 극성이 큰 정지상을 사용, 이동상으로 비교적 극성이 없는 용매를 사용하는 것
2) 역상 크로마토그래피 : 정지상은 비극성이고 가끔 탄화수소를 사용하며, 이동상은 물, 메탄올 또는 아세트니트릴과 같이 비교적 극성인 용매를 사용
4. 정상 및 역상 용리
1) 액체 크로마토그래피의 발전 과정을 보면 정지상은 보통 극성이고, 이동상은 비극성이 일반적이었다. 그러나, HPLC에서는 이와 반대의 시스템을 더 많이 쓰고 있다.
2) 일반적으로, 이동상이 비극성이고 정지상이 극성인 경우를 정상 용리(normal elution)라 하고, 이와 반대의 경우를 역상 용리 (reversed phase elution)라 한다.
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