식품미생물학실험 | 세균의 접종과 배양

 

 

 

TIP

 

 

세균을 액체배지와 고체배지에 접종하고 배양해 봄으로써 배지의 종류를 익히고 실험기구 사용법을 습득한다.

 

 

실험 방법

1. 고체배지 → 액체배지

1) 백금이의 끝이 빨개질 때까지 가열하여 멸균한다.

 

2) 멸균한 백금이를 E. coli가 없는 고체배지의 사이드에서 온도를 확인한다. (치직 소리가 나지 않을 정도, 고체배지가 녹지 않을 정도)

 

3) E. coli가 있는 고체배지에서 백금이로 E. coli를 딴다. (백금이에 힘을 주지 않고 고체배지의 겉면에 살짝)

 

 

4) 백금이에 붙어 있는 E. coli를 액체배지에 넣어 살살 흔들어 털어낸다.

 

5) E. coli를 접종한 액체배지를 37°C의 incubator에 넣고 24시간 배양한다.

 

6) 배지를 확인한다.

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2. 액체배지 → 고체배지

1) 시작 전 액체배지는 밑에 가라앉아 있기 때문에 vortex mixer을 사용해 흔들어준다.

 

2) Streaking(획선평판법)

➀ 백금이의 끝이 빨개질 때까지 가열하여 멸균한다.

➁ 멸균한 백금이를 고체배지의 사이드에서 온도를 확인한다. (치직 소리가 나지 않을 정도, 고체배지가 녹지 않을 정도)

➂ E. coli가 있는 액체배지에 백금이를 담가 E. coli를 채취한다.

➃ 고체배지에 지그재그로 백금이로 Streakig을 하여 E. coli를 도말한다. (강하게 하면 E. coli가 손상될 수 있으므로 약하게 한다.)

 

 

➄ 도말한 고체배지를 뒤집어서 37°C의 incubator에 넣고 24시간 배양한다.

➅ 배지를 확인한다.

 

3) Spreading(도말평판법)

➀ 멸균된 Micro pipet에 Tip을 부착해 원하는 만큼의 양인 100㎖로 맞춘다.

➁ E. coli가 배양된 액체배지에서 Micro pipet을 사용해 E. coli를 채취한다.

➂ 고체배지 위에 채취 액을 도포한다.

➃ 알코올을 충분히 묻힌 삼각봉을 알코올램프의 불에 가열하여 멸균한다.

➄ 멸균한 삼각봉을 고체배지의 사이드에서 온도를 확인한다. (치직 소리가 나지 않을 정도, 고체배지가 녹지 않을 정도)

 

➅ 고체배지 위에 있는 채취 액을 멸균한 삼각봉으로 넓게 도말한다.(삼각봉을 문지를 때, 강하게 하면 E. coli가 손상될 수 있으므로 약하게 하고 매끈하다가 거친 느낌이 날 때까지 문지른다.)

➆ 도말한 고체배지를 뒤집어서 고압증기 멸균기에 넣고 24시간 배양한다.

➇ 배지를 확인한다.

 

 

 

[식품미생물학실험]세균의 접종과 배양 레포트