미생물실험 | API Test

 

 

 

TIP

 

 

1. API kit를 이용하여 각 균주의 반응과 미지의 시료에 포함된 균주를 알아볼 수 있었다. 
2. API kit를 이용하여 미생물을 동정해 보고 생화학적 특성을 알아본다. 즉, 형태적, 배양적 특성으로는 속(genus)만을 동정할 수 있으며, 종(species)까지 최종적으로 규명하기 위해서는 생리 생화학적 조사가 필요하다. 따라서 형태적 특징 및 배양의 특징만으로 세균의 속(genus)종(species) 특성을 관찰하기는 어렵기 때문에 미생물마다 나타내는 생리, 생화학적 대사를 관찰하여 미생물에 따라 나타나는 특이한 효소 작용을 알아내어 미생물 동정 및 분류에 이용할 수 있다 
3. kit의 각 항목에 대하여 색의 변화를 통해 결과를 판단한다.

 

 

 

API kit 사용 원리

API kit는 biochemical test, assimilation test 그리고 fermentation test를 이용한 동정법이다.

 

Biochemical test는 saline용액에 시험균을 현탁하여 건조된 기질이 들어있는 kit의 cupules에 접종하여 배양 후 발색시약을 첨가하여 물질의 대사유무를 색의 변화로써 판정하는 방법이다.

 

Assimilation test는 최소배지에 현탁한 시험균을 탄수화물이 유일한 탄소원으로 들어있는 kit의 cupules에 접종 배양한 후 시험균이 이들 당을 이용할 수 있는지 여부를 탁도 변화로써 판정하는 방법이다.

 

Fermentation test는 당으로부터 산을 생산하여 pH의 변화로 판정하는 방법이다.

 

 

API kit 종류

1. API 20E

① 장내세균, Gram(-) 간균의 동정

② 23종류 biochemical test를 이용

 

2. API 20NE

① 장내세균 이외의 Gram(-) 간균의 동정

② 12종류의 assimilation test와 8종류의 biochemical test를 이용

 

3. API 50CH

① Bacillus와 Lactobacillus의 동정

② 49종류 당 test를 통해 미생물 대사를 분석 (Test 보기)

③ API 50CHB(Bacillus 동정용), API 50CHL(Lactobacillus 동정용)

 

4. API 20C AUX

① 효모의 동정

② 19종류 assimilation test이용

 

 

실험 방법

1. 스트립의 준비

① Incubation box를 준비하고 증류수를 tray에 부어서 수분을 유지하도록 한다.

 

② Tray의 끝에 균주의 정보를 기록한다.

 

③ 스트립을 tray위에 올려 놓는다.

 

2. 접종액의 준비

① 앰플을 수직이 되도록 한 손으로 잡고 뚜껑의 평평한 부분으로 엄지손가락의 압력을 가한다.

 

② Suspension medium의 앰플을 열고 하나의 colony를 취한 후 골고루 부유되도록 한다.

 

3. 스트립의 준비

① ‘□’은 큐풀까지 균액으로 가득 채운다 나머지는 큐풀을 제외하고 튜브만 채운다.

 

② ‘＿’는 혐기적 조건을 만들어 주기 위해 mineral oil로 큐풀을 채운다.

 

③ 스트립 위에 뚜껑을 덮는다.

 

④ 호기적인 상태에서 37°C, 24시간 동안 배양한다.

 

4. 스트립의 리딩

24시간 배양한 후 판독표를 참조하여 결과를 읽는다.(판독표는 참고 다음에 부착)

 

 

 

[미생물실험]API Test 레포트