일반생물학실험 | 소변 검사

 

 

 

TIP

 

 

소변 검사를 통해 탄수화물과 단백질의 정성을 분석해 본다.

 

 

 

실험 방법

1. 탄수화물의 분석방법 : 기본적으로 비색 측정 방법을 이용한다.

페놀. 황산 실험 : 페놀과 황산 수용액을 이용, 탄수화물을 분해하면 푸르푸랄 또는 푸르푸랄 유도체가 만들어지고 푸르푸랄이 페놀과 반응. 화합물을 만들면 이를 480㎚의 흡광도로 측정.

 

Furfural + Anthrone → 착색물질 (청록색)

 

Fehling 실험 : 당의 환원력에 기초한 비색측정법으로 알칼리 존재하에서 당의 산화가 이루어지는 동안 Cu++이 Cu+으로 환원되는 것에 기초 단당류에 타르타르산 용액과 알칼리 구리용액을 섞어 가열하고 식힌 뒤 460㎚에서 흡광도를 측정.

 

CuSO₄ + 2OH^- ↔ Cu(OH)₂ ··· 맑은 청록색

2Cu(OH)₂ → Cu₂O + H₂O + [O] ··· 담적갈색 침전

 

2. 뇨의 정성실험

1) 뇨의 일반적인 특성

① 정상인의 경우 24시간 뇨량 : 평균 1,000～1,600㎖

② 담황색으로 혼탁도는 투명하며 pH 5.0～7.0의 약한 산성을 띤다.

③ 뇨 속의 미량 성분인 휘발성 유기산에 의해 냄새 유발

 

2)Glucose

① 정상인의 경우 24시간 동안 뇨를 통해 130mg 정도의 glucose 를 배설

② 적은 양이므로 정량분석 불가능/ 당뇨의 경우 검출 가능

③ 글루코스의 표준 용액을 0.5mM을 몇 단계로 희석 (0.2㎖, 0.4㎖, 0.6㎖) 하여 이들의 흡광도를 측정, 표준 검량선을 작성한 뒤 sample의 흡광도를 비교하 여 농도를 계산

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3. Benedict 법

1) 2.5㎖의 benedict 시약에 뇨를 4방울 정도 넣고 1~2분 동안 가열한 뒤 상온에서 식혀 변화를 관찰

 

2) 탄수화물의 환원성을 이용하는 방법으로 황산구리에 탄산수소나트륨 같은 알칼리성 물질을 넣어 황산구리가 수산화구리 (Cu(OH)2) 가 되고 이것이 환원성을 가진 탄수화물에 의해 환원되어 적갈색의 Cu2O로 변함

 

3) 베네딕트 반응식

 

CuSO₄ + Na₂CO₂ + 2H₂O → Cu(OH)₂ + Na₂SO₄ + CO₂ + H₂O

2Cu(OH)₂ + RCHO → 2CuOH + H₂O + RCOOH

2CuOH → Cu₂O↓ + H₂O

 

4. 단백질의 정성실험(가열법)

1) 단백질은 여러 종류의 시약과 반응하여 고유의 색을 나타내는데 이것은 단백질을 구성하고 있는 특수한 아미노산의 잔기나 카르복실기 또는 아민기와 반응으로 나타나는 정색반응이다. 이 반응을 통하여 단백질의 유무를 확인 할 수 있다.

 

2) 가열법 이외의 다른 방법들

Biuret 반응 Ninhydrin 반응 Xanthoprotein 반응

Millon 반응 Sakaguchi 반응 Nitroprusside 반응 침전 반응

 

3) 정상인의 뇨 : 24시간 동안 20～80㎎의 단백질이 배설 150㎎ 이상이면 신체이상

 

4) 단백뇨의 분류

분류	심한 단백뇨	중등도 단백뇨	최소 단백뇨	기능성 단백뇨
배출량	>3.5g/day	1.0~3.5g/day	<1.0g/day	임신, 신생아

 

 

 

[일반생물학실험]소변 검사 레포트