일반생물학실험 | 항산화 효능 검증 및 Data 분석 - DPPH

 

 

 

TIP

 

 

Spectrophotometer의 원리와 사용법을 이해한 후 각 시료의 항산화 능력을 테스트하고 data를 비교 분석한다.

 

 

 

세포의 산화적 스트레스를 줄여주는 항산화제의 작용 기작

우리가 호흡을 하게 되면 산소가 몸속으로 유입되고 이상적으로는 우리에게 필요한 산소량만큼 호흡으로 들이마시면 좋겠지만 실제로 그렇게 정확히 맞추기는 힘들다. 특히 운동 후 가쁜 숨을 몰아쉬게 될 때도 산소를 과잉 공급할 가능성이 있다. 필요이상으로 많은 산소가 체내에 들어왔을 경우 잔여 산소 중 일부는 활성이 큰 자유기(free radical)인 활성산소가 된다. 이 반응성이 큰 자유기는 체내의 세포를 공격하게 되고 공격으로 인해 손상된 세포는 유전자의 복구 명령에 따라 복구를 시작하게 되고, 이 복구 과정에서 간혹 비정상적인 복구가 일어난다.

 

즉, 적당히 복구하는 수준을 넘어서서 과다하게 증식하는 세포가 발생한다. 이것이 암의 한 원인이다. 따라서 위와 같은 관점에서 볼 때 산소가 지나치게 많은 것도 몸에 좋지만은 않다. 하지만 산소 섭취량을 조절하는 것은 현실적으로 어렵게 때문에 몸에서 불필요한 산소로 인한 자유기를 없애주는 것이 실질적인 해결책인데, 우리가 어떤 물질을 섭취했을 경우 이 물질이 자유기가 세포를 공격하기 전에 대신 반응을 일으켜 자유기를 소모시켜 줄 수 있는데, 이 과정을 항산화 작용이라고 한다.

728x90

 

 

실험 방법

1. 실험 과정

1) control, sample의 성분을 조별로 각각 3칸씩 labeling한다.

 

2) Blank에는 80% EtOH를, DPPH에는 DPPH만 각각 200㎕씩 넣는다.

 

3) DPPH와 Blank를 각각 3칸씩 지정하여 labeling한다.

 

4) pipette을 이용하여 control에는 sample 100㎕, 80%EtOH 100㎕을 넣고, 잘 섞어준다(Pipeting).

 

5) pipette을 이용하여 sample에는 sample 100㎕, DPPH 100㎕을 넣고, 잘 섞어준다(Pipeting).

 

6) 빛이 없는 상태에서 20～30분 동안 shaking.

 

7) Spectrophotometer를 이용하여 517㎜에서 OD값을 구한다.

 

 

 

[일반생물학실험] 항산화 효능 검증 및 Data 분석 레포트