생화학실험 | α-glucosidase 저해 평가

 

 

 

TIP

 

 

α-glucosidase를 억제하면 빵, 감자, 파스타와 같은 녹말이 장에서 분해되는 것을 막아준다. 즉, 식사 후에 혈당이 증가하는 것을 늦추어 혈당을 낮추는데 도움을 준다. 그러므로 당뇨병이 있는 경우 약물로 사용할 수 있다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 α-glucosidase의 저해를 측정한다.

 

 

 

α-글루코시다제(α-glucosidase)

글루코시드 가수분해 효소를 가리킨다. 비환원 말단에 존재하는 α-D-글루코시드 결합을 가수분해하여 α-형 글루코오스를 생성하는 효소의 총칭. 단순히 글루코시다이제라고 불리는 경우도 있다. 동물, 식물. 미생물계에 널리 분포한다. 아밀라아제의 작용으로 생긴 올리고당의 글루코오스에의 분해와 배당체의 분해에 중요한 역할을 한다. 배당체와 글루코시드 결합의 종류에 대한 특이성은 기원에 따라 크게 다르다.

 

이 중에서 말토오스에 대한 특이성이 높은 효소를 말타아제(maltase) 또는 협의의 α-글루코시다아제(α-glucosidase, EC 3.2.1.20). 이소말토오스(isomaltose)를 잘 분해하는 효소를 이소말타아제(isomaltase, 또는 올리고-1,6-글루코시다아제(oligo-1,6-glucosidase, EC 3.2.1.10). 트레할로스(trehalose)에 잘 작용하는 효소를 트레할라아제(trehalase, EC 3.2.1. 28)라 부른다. 그러나 이들의 글루코시다아제도 특이성은 반드시 이름과 같지 않다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 기질을 1.5mM로 제조(in 1×PBS)한다.

 

2) 96 well plate에 시료 20㎕ 넣고 기질 100㎕를 넣는다.

 

3) 405㎚에서 흡광도를 측정한다.(Blank 값)

 

4) 96 well plate에 효소 20㎕넣는다.

 

5) 37℃에서 10분간 반응시킨다.

 

6) 96 well plate에 stop solution 60㎕를 넣는다.

 

7) 405㎚에서 흡광도를 측정한다.

 

 

 

[생화학실험]glucosidase 저해 평가 레포트