일반생물학실험 | 원형질분리, 용혈현상 및 삼투현상 관찰

 

 

 

물질의 유입 또는 유출 방법에는 크게 능동수송과 수동수송이 있다. 본 실험에서는 이 둘 중 식물, 동물 세포에서의 수동수송에 따른 현상을 관찰하여 농도마다 어떤 차이가 나는지 확인해볼 것이다. 특히 수동수송 중에서 삼투현상, 원형질 분리, 용혈현상에 관한 실험을 하며 농도별 현상을 관찰한다. 특히 삼투현상은 농도별 PEG를 다르게 하여 농도별 어떠한 차이가 있는지 확인한후 추세선을 그려 확인하도록 한다.

 

결과적으로 농도가 높을수록 삼투압이 높아지는데 이는 추세선이 그려진 그래프를 통해 확인할 수 있다. 두 번째로 원형질 분리 또한 농도별로 세포막과 세포벽이 어떻게 변화하는지에 중점을 두어 관찰한다. 결과적으로 농도가 높을수록 밀착되어있었던 세포막과 세포벽이 떨어져 쪼그라드는 현상을 확인할 수 있다. 마지막으로 동물세포 내에서의 관찰인 용혈현상은 식물세포와 달리 세포벽이 없기 때문에 그 차이에 유의하며 관찰을 진행한다. 결과적으로 세포벽이 없어 발생한 팽윤현상 때문에 뭉개진 적혈구를 확인할 수 있다. 본 실험들은 모두 농도차이에 실험결과가 차이나므로 농도를 다르게 하는 것을 주의해준다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 가장 먼저 원형질 분리를 관찰할 실험을 위해서 양파와 slide glass, cover glass, 해부용 칼, DIW, 0.9% NaCl, 10% NaCl, Filter paper, Microscope를 준비해준다.

 

2) 양파를 두껍게 자르게 되면 세포가 겹쳐 정확한 관찰을 할 수가 없으니 최대한 얇게 잘라준다. 이 양파 속껍질을 slide 위에 각각 올려놓고 양파위에 DIW, 0.9% NaCl, 10% NaCl을 각각 10μl씩 떨어뜨려준다.

 

3) 그 후 cover slip을 덮고 현미경으로 관찰 하여준다.

 

4) 두 번째로 용혈현상을 관찰하기 위해서 Lancet, slide glass, cover glass, DIW, 0.9% NaCl, 10% NaCl, filter paper, Microscope를 준비하여 준다.

 

5) Lancet을 사용해 실험자의 피 셋방울을 Slide glass위에 떨어뜨린다.

 

6) 그 다음 각각 DIW, 0.9%, 10% NaCl을 떨어뜨려 잘 섞은 후 Cover glass를 덮고 400배에서 관찰해준다.

 

7) 삼투현상을 관찰하기 위해서 1000㎥ 비커, 5㎥ pipette tip, Tubing closure, Cellulose dialysis membrane, Clamp & stand, 10, 20, 30% PEG, Congo red solution, DIW, Polygloves, Parafilm을 준비하여 준다.

 

8) 가잔 첫 번째로 Dialysis membrane을 DIW에 activation 시켜준다.

 

9) 그 다음 파라필름을 사용해서 연길시켜 연결부가 꽉 조여 바람이 새지 않는지 확인해준다.

 

10) 이때 잘 밀봉하지 않으면 실험에 실패할 수 있으니 주의한다.

 

11) 그 다음으로 closure을 사용해 밀봉을 가해주고 PEG와 0.1% Congo red mixture를 피펫 위로 주입한다.

 

12) 그 후 고정시킨뒤 증류수에 넣어주고 5분간격으로 용액의 상승을 기록한다.

 

13) 이때 10%, 20%, 30% PEG를 각각 실험하여 용액의 상승 정도를 비교하여준다. 이때 Congo red는 유독한 물질이므로 polyglove를 착용해야함에 주의한다.

 

 

 

[일반생물학실험]원형질분리, 용혈현상 및 삼투현상 관찰 레포트