일반생물학실험 | 광합성 색소분리 및 측정

 

 

 

TIP

 

 

1. 종이 크로마토그래피를 이용하여 시금치 잎에서 광합성 색소를 분리하고 색소의 빛 흡수를 알아본다.
2. 분광광도기(spectrophotometer)를 이용하여 색소의 최대흡수 파장을 알아본다.

 

 

 

종이크로마토그래피

종이에 검은 수성 사인펜으로 점을 찍은 후 수직으로 세워놓고 아래 부분이 물에 잠기도록하면 물이 종이를 따라 올라가면서 사인펜 속의 색소가 분리된다. 이때 종이처럼 고정되어 있는 물질을 정지상이라 하며, 물과 같이 위로 이동하는 물질을 이동상이라 한다. 색소들은 저마다 물을 따라 올라가는 속도가 달라 분리가 가능하다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 종이크로마토그래피를 이용한 엽록체 색소분리

 

2) 여과지를 15×2㎝크기로 자른다. 한쪽 끝에서 1㎝되는 곳을 잘라 삼각형을 만든 다음 이곳으로부터 2㎝되는 곳에 연필로 선을 긋는다.(여과지는 절 때 손으로 만지지 말 것)

 

3) 연필로 그은 부분에 동전이나 자를 이용하여 식물의 잎을 밀면서 즙액을 묻힌다. 완전히 말린 후의 4～5회 정도 반복하여 점적한다.

 

4) 핀으로 여과지를 시험관마개에 매달고 전개용매가 들어있는 시험관에 넣는다.(여과지가 시험관 벽에 닿지 않도록 주의하고 전개 용매에 용지의 끝이 0.5㎝만 잠기게 한다. 여과지는 맨손으로 만지지 않으며 마개를 완전히 닫을 것(전개용매 증발방지))

 

5) 전개용매가 크로마토그래피 용지에 전개되는 상황을 지켜보면서 5분 이상 색소이 이동이 보이지 않으면 전개를 멈춘다.

 

6) 크로마토그래피용지를 꺼내서 전개된 부분을 연필로 표시한 후 여과지를 말린다.

 

7) 전개된 크로마토그래피용지를 관찰하여, 각각의 밴드가 어떤 색소를 나타내는지 적고, 각 색소의 기능에 대하여 설명하시오

 

8) 각각 밴드의 R_f값을 다음의 식으로 구한다.

 

9) 다른 색소밴드가 섞이지 않도록 주의하며 엽록소a밴드를 잘라 내어 시험관에 넣고 아세톤10㎖를 부어 유리막대로 잘 저어준다.

 

10) spectrophotometr를 이용하여 380㎚에서 700㎚까지의 파장에서 흡광도를 측정한 후 최대 흡수 파장을 알아본다.

 

11) 동일한 방법으로 다른 색소의 최대 흡수 파장도 알아본다.

 

 

[일반생물학실험]광합성 색소분리 및 측정

 

 

[일반생물학실험]광합성 색소분리 및 측정 레포트