식품영양학실험 | 혈청 측정

 

 

 

TIP

 

 

여러 가지 실험 방법을 통해서 혈청에서 총지질과 중성지방, 총 콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤을 구한다.

 

 

 

혈중 지질의 적정 수준

콜레스테롤 200㎎/dl 미만, 중성지방 150㎎/dl 미만이 적정 수준입니다. LDL콜레스테롤은 13.㎎/dl 미만으로, HDL콜레스테롤은 40㎎/dl 이상으로 유지하는 것이 바람직하다.

 

혈중 HDL이 35㎎/dl 이하, 콜레스테롤치가 220㎎/dl 이상이면 관상동맥질환의 위험이 현저히 증가하는 것으로 알려져 있다. 그리고 HDL이 1㎎/dl 씩 떨어질 때마다 심장질환에 걸릴 위험이 2∼3%씩 높아집니다. 총콜레스테롤과 HDL 콜레스테롤 비는 관상동맥질환 위험의 더 좋은 지표가 되며 4:1미만이 안전하다. 이 비율이 높을 경우 낮추도록 노력해야 하며 운동을 하면 이 비율을 관상동맥 질환의 위험을 낮추는 방향으로 이동 시킬 수 있다.

 

일반적으로 혈중 지질검사에서 가장 많이 쓰이는 검사는 콜레스테롤과 중성지방(Triglyceride)측정입니다. 최근에는 HDL콜레스테롤도 많이 측정하고 있다. 콜레스테롤이 높으면 동맥경화의 위험이 뚜렷이 증가됩니다. 중성지방을 동맥경화의 위험요소로 인정하느냐에 대한 논의가 많으나 최근에는 위험인자로 보는 견해가 많다. 그러나 동맥경화성 질환 발생 위험과의 연관은 콜레스테롤이 동시에 높은 혼합형 고지혈증의 경우나 동맥경화의 다른 위험 요소들을 함께 가지고 있는 경우 위험이 더욱 높아지고 치료의 대상이 된다.

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실험 방법

1. 혈청 총 지질

1) 세 시험관 B(blank), S(standard), U(unknown sample)를 준비한다.

 

2) B에 증류수, S에 표준액, U에 혈청을 각 20㎕씩 넣는다.

 

3) 각 시험관에 진한 황산 0.2㎖를 가하고 잘 섞은 후 끓는 수조상에서 10분간 방치를 한다.

 

4) 약 10분 정도 식힌 후 phosphovanillin 시약 10㎖를 가하고 37℃ 수조상에서 15분간 반응을 시킨다.

 

5) 약 5분정도 식힌 후 540㎚에서 B를 blank로 하여 S와 U의 흡광도를 읽는다.

 

2. 혈청 중 Triglyceride

1) 혈청0.02㎖에 시약 3.0㎖를 넣는다.

 

2) 37에서 5분간 반응시킨다.

 

3) 546㎚에서 흡광도를 읽는다.

 

3. 총 콜레스테롤

1) 혈청 0.02㎖에 효소용액 3.0㎖를 넣는다

 

2) 혼합 후 37수조에서 5분간 반응시킨다

 

3) sample 및 standard의 흡광도를 500㎚에서 읽는다.

 

4. HDL-콜레스테롤

1) sample의 전조작

ⓐ 혈청 1㎖를 원심분리용 시험관에 넣는다.

ⓑ 침전시약 1.0㎖를 넣어 잘 섞는다. (너무 심하게 흔들어서는 안된다.)

ⓒ 실온에서 5분간 방치한다.

ⓓ 10분간 원심분리한다.

ⓔ 즉시 transfer pipette으로 상층액을 깨끗한 시험관에 옮겨 검체로 한다.

 

2) 정량

ⓐ 혈청 0.02㎖에 효소용액 3.0㎖를 넣는다.

ⓑ 혼합 후 수조에서 15분간 반응시킨다.

ⓒ standard 및 sample의 흡광도를 읽는다.

 

 

 

[식품영양학실험]혈청 측정 레포트