미생물실험 | Colony Isolation

 

 

 

TIP

 

 

손에서 나온 여러 균 중에서 한 종류의 균만을 분리하여 획선평판법으로 배양한다.

 

 

 

배양배지가 준비되어 모든 생명체가 없어지도록 멸균하면, 여기에 생명체를 접종하여 성장을 지원하는 생장조건 하에서 배양할 수가 있다. 실험실 상황에서 보통은 순수배양으로 액체 또는 고체 배지에 접종한다. 액체 배양 배지는 대개 1～2%의 한천(agar)으로 고형화된다. 고체 배지는 세포를 고정하여 집락(colonies)이라 불리는 육안으로 보이는 분리된 덩어리로 자라게 한다. 미생물 집락은 미생물 종류, 배양 조건, 영양 공급, 생리저인 변수에 따라서 모양과 크기가 다양하다. 어떤 세균은 전체 집락의 색깔을 나타내는 색소를 생성한다. 집락은 미생물학자가 배양의 구성과 순도를 추정하도록 해준다. 배양접시에 두 종류 이상의 집락형태가 포함되어 있으면 배양이 오염되었다는 신호가 된다.

 

배양배지는 사용하기 전에 반드시 멸균되어야 하며, 멸균(sterilisation)은 보통 고압멸균기(autoclave)에서 배지를 가열하여 한다. 멸균 배양 배지가 만들어지면 접종(inoculum)할 준비를 마치게 된다. 이것은 배양액과 멸균된 배양배지를 조작하는 동안에 오염을 방지하는 일련의 단계들로 이루어진 무균기법(aseptic techniqe)이 요구된다. 공기 유래 오염물질이 실제로 도처에 존재하기 때문에 순수 배양을 유지하기 위해서는 무균기법의 숙달이 요구된다. 분리된 집락을 따서 그것을 다시 도말하는 것(streaking)이 여러개의 다른 미생물을 포함하는 액체시료에서 순수 배양을 얻는 주된 방법이며 미생물학실험실에서 보편적인 과정이다. 순수 배양을 얻는 다른 기술들이 특이한 생장 요구성을 갖는 특정 그룹의 세균에 특화되어 개발되었다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 손의 세균이 배양된 배지에서 다른 균과 겹치지 않은 단일 colony를 찾아 표시한다.

 

2) 백금이를 분젠버너를 이용해 화염 멸균시킨다.

 

3) 백금이가 충분히 식었으면 colony를 picking한다.

 

4) 1차도말은 한쪽면에 겹치도록 하여 streak한다.

 

5) 백금이를 화염멸균한 후 충분히 식으면 2차 streak을 한다.

 

6) 반복하여 3차까지 streak 한다.

 

 

 

[미생물실험]Colony Isolation 레포트