에너지공학실험 | 당 분석

 

 

 

TIP

 

 

흡광도를 이용해 목질계 시료내 당의 양을 측정한다.

 

 

 

목질계 바이오매스는 광합성을 통하여 생합성되는 식물류와 폐목재류, 볏짚류 등을 포함하는 개념으로써 해부학적 구성상 셀룰로스 40～60%, 헤미셀룰로스(hemicelluloses) 20～40%, 리그닌(lignin) 10～25%으로 이루어진 복합고분자인 리그노셀룰로스가 그 주성분이다.

 

 

 

실험 방법

1. 실험 과정

1) 목질계 시료를 건조한다.(40℃이하)

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2) 시료를 분쇄한다.(크기가 작을수록 좋음)

 

3) 분쇄한 시료의 일부를 취해서 고형물 함량을 측정한다.

 

4) Test tube(20x150㎜)에 시료 0.3±0.001g을 넣는다.

 

5) 시료가 든 Test tube에 72% H₂SO₄용액(4℃냉장보관)을 3㎖첨가한다.

 

 

6) Test tube를 Shaking Incubator에 넣고 30℃(100rpm)에서 1시간 동안 가수분해 한다.

 

7) Test tube에 84㎖의 증류수를 첨가하여 100㎖ Vial에 넣는다.

 

 

8) Vial의 무게를 잰다.

 

9) Vial을 121℃에서 1시간동안 autoclave한다.(총 반응시간은 2시간 30분 정도)

 

10) Vial을 상온에서 식히고 무게를 잰다.

 

11) Vial의 시료를 Test tube에 4㎖를 취해서 CaCO₃로 중화시킨다. 거품이 생기지 않을 때까지 저어주고 상등액을 pH paper에 찍어 pH7～8로 중화한다.

 

 

12) 상등액을 취해 원심 분리기(15분 15,000rpm)에 넣어 원심 분리한다.(2회)

 

13) 0.1㎖를 취해 Test tube에 넣고, 증류수 0.9㎖, DNS 3㎖를 넣는다.

 

14) 끓는 물에 Test tube를 넣어 5분간 반응 시킨다.

 

 

15) 실온에서 식힌 후 UV-VIS spectrometer의 580nm에서 흡광도를 측정한다.

 

 

16) 아래와 같이 11개의 샘플을 만들어 Standard curve를 구한다. 이 샘플들을 가지고 13)～15)를 거쳐 각각의 흡광도를 구해 11개의 데이터를 이용하여 Standard curve를 구함.

 

 

 

[에너지 공학 실험] 당 분석 레포트