화학공정실험 | 미생물 성장속도 실험 - Escherichia coli 의 성장속도

 

 

 

TIP

 

 

1. 미생물의 성장 속도에 대해 이해한다.
2. E.coli 의 배양에 관하여 알고, 배경이론에 따라 성장곡선을 그려본다.

 

 

 

실험 방법

1. 실험 과정

1) 배양액, 삼각플라스크 준비하여 배양액 (LB Broth)를 제조한다.

① Yeast(5g) + Tripton(10g) + NaCl(10g) + Water로 total 1L를 autoclave로 멸균하여 LB medium을 준비한다.

 

2) 오염에 민감하므로 멸균 준비를 한다.

① 깨끗한 250㎖ armed flask와 stopper를 준비하여 autoclave로 멸균 처리한다.

② 고온, 고압의 멸균기로 멸균한다.

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3) 배양을 할 Clean Bench의 조작한다.

① UV turn off → Fan on → FL on

② Clean Bench에 손을 넣기 전 손과 70%알코올을 분무하여 내부를 소독한다.

 

4) 삼각플라스크의 재 소독한다.

① 다시금 오염되었을지 모를 삼각플라스크를 알코올램프로 소독한다.

 

5) Seed culture : LB medium 10㎖ + lB plate에 키워든 E.coli를 하나 따서 접종한다.

① culture temperature 37℃

② culture time 12～16시간

③ Main cluture : LB medium 100㎖을 aramed flask에 정량 한 뒤, seed culture 1㎖을 접종한다.

 

6) 대장균을 배양 시킨다.

① 삼각플라스크 안에 배양시킬 대장균과 배지를 넣고 37℃, 200rpm incubator에서 배양한다.

 

7) UV-Spectrophotometer 작동시킨다.

① Lamda 20 실행시키고 Blank를 설정한다.

 

8) 각 시간에 따른 배양기내의 미생물 농도 계속적으로 측정한다.

 

 

 

[화학공정실험]미생물 성장속도 실험 레포트