유리판 위에 얇게 실리카 겔을 입힌 정지상과 이동상인 적당한 용매에 대한 시료 성분들의 분해의 차이를 이용하여 혼합물을 분리하는 방법을 얇은 막 크로마토그래피라 한다. 이 실험에서 몇 가지 빛깔이 다른 물감을 예로 하여 크로마토그래피법을 이해할 수 있다.
크로마토그래피(chromatography)
크로마토그래피(chromatography)는 분배평형에 기초를 둔 중요한 분리기술이다. 크로마토그래피의 어원은 chroma로 '색'을 의미하는데, 최초의 크로마토그래피 분리가 색을 지닌물질을 대상으로 행하여졌기에 붙여진 명칭이다. 크로마토그래피의 원리는 용질이 되는 화학종이 이동상(mobile phase)(고정상에 비해 이동하므로)과 고정상(stationary phase)으로 불리는 두 상 사이에서 서로 교환되는 연속추출과정이다.
크로마토그래피란 각 화합물들은 고정상인 흡착제에 대한 친화성의 차이에 따라 용매와 인력이 강한 성분 분자들은 다른 성분들보다 더 빠른 속도로 고정상을 지나 움직이게 되어 고정상의 여러 영역에 걸쳐 띠를 형성한 성분들이 이동하게 된다는 분별, 흡착의 원리를 이용하여 어떠한 혼합물을 분리, 정제, 정성, 정량 및 확인하는 방법이다. 즉, 크로마토그래피는 성분 물질의 확인용으로 실험을 하기에, 용매와 한 성분의 스며 올라간 높이의 비는 일정하므로 이 비를 알면 어떤 물질인지 알 수 있다.
실험 방법
1. 실험 과정
1) 알리자린 옐로우, 메틸렌 블루, 페놀 레드의 0.1% 에탄올 용액을 만들고 각각을 조금씩 시험관에 넣고 흔들어 혼합물을 만든다.
2) 용매는 1-부탄올과 에탄올 및 2M 암모니아 용액을 60:20:20의 비율로 섞어서 약 5분 동안 잘 흔들어 분액깔대기 속에서 두 층으로 갈라지게 방치한 다음 맨 윗 층의 용액을 사용한다.(∴분리가 잘 되지 않기 때문에 일정한 시간이 지난 후 상액을 쓰면 된다.)
3) 실리카겔이 묻은 얇은 막의 판을 하나 택하여 하단에서 약 1㎝의 거리에 연필로 실리카겔 위에 하단과 평행한 선을 긋는다.
4) 모세관을 사용하여 이 선상에 각 물감용액 한 방울씩과 물감의 혼합용액 한 방울씩을 묻혀서 판 하나에 지름이 1~2㎜정도 되는 반점 2개를 만든다.
5) 물감용액이 들어 있던 용매가 모두 증발하도록 약 1~2분간 방치한 다음, 이 판을 용매가 약 0.5㎝ 깊이로 들어 있는 비이커에 세워서 시료 반점이 용매에 잠기지 않도록 놓고 시계접시로 비이커를 덮어둔다.
6) 용매가 판을 따라 올라가서 막의 상단 근처에 다다르면 판을 꺼내어 말린다
댓글