일반생물학실험 | DPPH 항산화 실험

 

 

 

TIP

 

 

시료의 항산화력을 측정해 본다.

 

 

 

활성 산소

우리가 호흡하는 산소와는 완전히 다르게 불안정한 상태에 있는 산소이다. 환경오염과 화학 물질, 자외선, 혈액순환장애, 스트레스 등으로 산소가 과잉생산된 것이다. 이렇게 과잉생산된 활성산소는 사람 몸속에서 산화작용을 일으킨다. 이렇게 되면 세포막, DNA, 그 외의 모든 세포 구조가 손상당하고 손상의 범위에 따라 세포가 기능을 잃거나 변질된다.

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실험 방법

1. 각 용액 사전 자리배치

용액을 담기전 미리 자리를 배치해두면 실험 중에 용액이 섞이는 것을 방지할 수 있고 용액 들을 담고나서도 각 칸에 어떤 용액이 담겼는지 쉽게 확인이 가능하다.

 

DPPH	시료A + DPPH	시료A blank	시료B + DPPH	시료B blank	시료C + DPPH	시료C blank	시료D + DPPH	시료D blank
ㄱ	ㄴ	ㄷ	ㄹ	ㅁ	ㅂ	ㅅ	ㅇ	ㅈ
DPPH 100㎕ + 증류수 100㎕	시료A 100㎕ + DPPH 100㎕	시료A 100㎕ + 에탄올 100㎕	시료B 100㎕ + DPPH 100㎕	시료B 100㎕ + 에탄올 100㎕	시료C 100㎕ + DPPH 100㎕	시료C 100㎕ + 에탄올 100㎕	시료D 100㎕ + DPPH 100㎕	시료D 100㎕ + 에탄올 100㎕

 

2. 각 용액 만들기

1) 마이크로 피펫을 돌려 100㎕로 맞추어 놓는다. 피펫 앞쪽에 피펫팁을 꽂고 미리 용액을 덜 어내는 연습을 반복한다. 피펫이 손에 익으면 피펫팁을 새로 끼운뒤 실험을 시작한다.

 

2) 100㎕짜리 피펫으로 ㄴ과 ㄷ자리에 아로니아 용액을 한번씩 넣는다.

 

3) 피펫팁을 새로 갈아끼우고 100㎕짜리 마이크로 피펫으로 ㄹ와 ㅁ자리에 비폴렌 용액을 한번씩 넣는다.

 

4) 피펫팁을 새로 갈아끼우고 100㎕짜리 마이크로 피펫으로 ㅂ과 ㅅ자리에 비폴렌 용액을 한번씩 넣는다.

 

5) 피펫팁을 새로 갈아끼우고 100㎕짜리 마이크로 피펫으로 ㅇ과 ㅈ자리에 비폴렌 용액을 한번씩 넣는다.

 

6) 피펫팁을 새로 갈아끼우고 100㎕짜리 마이크로 피펫으로 ㄷ과 ㅁ과 ㅅ과 ㅈ자리에 에탄올을 한번씩 넣는다.

 

7) 피펫팁을 새로 갈아끼우고 100㎕짜리 마이크로 피펫으로 증류수를 ㄱ자리에 한번 넣는다.

 

8) 피펫팁을 새로 갈아끼우고 빛에 민감한 DPPH용액을 은박지에서 꺼내 100㎕짜리 마이크로 피펫으로 ㄱ, ㄴ, ㄷ, ㄹ, ㅁ, ㅂ, ㅅ, ㅇ, ㅈ 자리에 한번씩 넣는다.

 

9) 오류가 발생할 수도 있기 때문에 이 모든 과정은 총 3번씩 시행한다.

 

10) 용액이 담긴 틀을 뚜껑을 덮은뒤 손을 틀 바닥면에 대지 않고 옆면을 잡은뒤 빛이 없는 서랍안으로 넣고 20분을 기다린다.

 

11) 20분이 지난뒤 서랍을 열어 틀옆면을 잡고 조심스레 꺼낸후 용액이 담긴 틀을 기계에 넣고 기기 화면에 나타난 표를 이용해 결과를 도출한다.

 

 

 

[일반생물학실험]DPPH 항산화 실험 레포트