TIP
TLC의 이론과 원리 등을 배우고, 그들의 사용 방법 등을 알아본다.
TLC(Thin Layer Chromatography)는 액체 상의 크로마토그래피의 일종이며, 흡착제로 alumina-silicagel, cellulose 등을 유리관이나, 알루미늄에 얇게 입혀 미량의 시료를 쉽고 빠르게 분리하는 데에 주로 이용된다.
먼저 분리하고자 하는 미량의 시료를 TLC판에 점적한 후 적당한 용매를 선택하여 전개 용기내에서 전개시키면 모세관 작용에 의해 시료가 각기 다른 위치로 이동되며, 이 이동 위치는 흡착제와 시료간의 상대적인 흡착력에 기인된다. 전개후에 분리된 시료의 각 반점은 전개 용매가 올라간 거리와 시료 반점이 이동한 거리의 비인 Rf로 표시한다.
Rf = 시료반점의 이동거리 / 용매의 이동거리
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실험 방법
1. 실험 과정
1) TLC chamber를 준비한 후, 전개용매(eluting solvent)를 가한다.
2) TLC 하단을 0.5㎝ 거리로 연필로 평행선을 표시하고, 그 위에 모세관을 사용하여 혼합액을 1~2회 점적한다.
3) 전개병에 넣어 전개시킨다.
4) 용매가 상단 근처에 이르면 조심스럽게 꺼내어 용매가 이동한 거리를 표시하고, UV lamp or potassium permanganate 용액 등을 이용해 시료 반점 위치 확인한다.
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