미생물학실험 | Escherichia coli의 순수 분리 및 배양

 

 

 

미생물에 대한 연구 시, 미생물의 생태적, 생화학적, 분자생물학적 등 다양한 생물학적 특징을 밝혀야 하며 이를 위해 목표하는 미생물을 순수 분리하고 배양할 필요가 있다. 다른 종류의 생명체가 섞여 있지 않은 단일 종의 미생물의 배양을 순수 배양이라 하며, 적절한 환경에서 다른 미생물의 노출 및 오염 없이 배양해야 한다. 미생물의 배양은 미생물의 먹이가 되는 배지(media)를 이용하며, 배지의 상태에 따라 액체 배지와 고체 배지로 나눈다. 본 실험에서는 Luria Bertani media (이하 LB 배지)를 이용하여 실험하였으며, LB배지는 Escherichia coli (이하 E.coli)의 생장에 필요한 질소, 탄소, 비타민, 및 무기염류 등을 제공한다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 액상의 LB배지에 spread plate method로 배양된 E.coli를 inoculating loop and needle로 소량 획득하여 새로운 LB배지에 streaking으로 접종한 후 petri dish를 덮는다

 

2) 새로운 고형의 LB배지에 pipette과 micropipette tip을 이용하여 액상의 LB배지에서 배양한 E.coli 용액을 농도 별로 50㎕씩 취해 떨어뜨린 후 petri dish로 덮는다

 

3) 떨어뜨린 E.coli 배양액을 spreader로 고형의 LB배지의 표면에 도말한 후 petri dish로 덮는다

 

4) 각각의 petri dish는 배지가 위로 가도록 뒤집어 incubator에 넣고, 37℃에서 약 24시간 동안 배양한다

 

 

[미생물학개론]미생물의 순수분리

 

 

[미생물학실험]Escherichia coli의 순수 분리 및 배양 레포트