일반생물학실험 | 광합성 색소 분리

 

 

 

본 실험은 시금치의 잎을 갈아서 광합성 색소를 종이 크로마토그래피를 통해 분리하는 실험이었다. 종이 크로마토그래피는 분배 크로마토그래피의 일종으로 두 가지 종류의 서로 혼합되지 않은 용매 사이에서 혼합물들이 두 용매에 대한 분배계수가 다른 원리를 이용한다.

 

측정 방법은 이동상의 이동거리를 고정상의 이동거리로 나누면 된다. 실험결과 시금치를 갈아서 만든 색소 추출액으로 실험한 결과 첫 번째, 두 번째, 세 번째, 네 번째 모두 비슷하게 측정되었다. 그래서 측정된 결과가 맞는지 알아보기 위해 chlorophyll a를 같은 방식으로 측정하여 비교할 수 있었다. 비교한 결과 다소 차이가 있었다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 우선 시금치를 잘 씻어 큰 잎맥을 제거하고 시금치 잎 40g을 acetone 100㎖과 함께 믹서기에 넣고 충분히 간다.

 

2) 갈은 시금치를 whatman filter paper로 여과하여 색소 추출액을 얻은 후 e-tube에 조금 씩 담아간다.

 

3) petroleum ether와 acetone이 9:1로 혼합된 용액을 chromatography jar에 넣고 내부에 solvent gas가 채워지게끔 뚜껑을 닫아둔다.

 

4) 15 x 15㎝ whatman chromatography paper에 위(1㎝), 아래(2㎝)에 연필로 가는 선을 긋고 아래 선에 따라 2.5㎝ 간격으로 5개의 점을 찍고 3번째 점에는 chlorophyll a를, 나머지 네 점에는 추출액을 10번에서 20번 정도 모세관을 이용하여 찍는다.

 

5) chromatography paper를 말린 후 둥글게 말아 양변이 겹치지 않도록 stapler로 찍어 chromatography jar에 수직으로 세워 놓고 전개용매의 끝이 윗선에 도달하면 꺼내어 hood에서 20분 동안 말린다.

 

6) 각 색소의 위치를 표시하고 각 색소의 R_f 값을 구한다. 마지막으로 chromatography paper에 자외선을 조사하여 분리된 색소들의 형광성을 관찰한다.

 

 

[일반생물학실험]광합성 색소 분리

 

 

 

[일반생물학실험]광합성 색소 분리 레포트