시료 중 질소화합물을 알카리성 과황산칼륨의 존재하에 120℃에서 유기물과 함께 분해하여 질산이온으로 산화시킨 다음 산성에서 자외부 흡광도를 측정하여 질소를 정량하는 방법이다. 이 방법은 비교적 분해하기 쉬운 유기물을 함유하고 있거나 자외부에서 흡광도를 나타내는 브롬이나 크롬을 함유하지 않는 시료에 적용된다. 정량범위는 0.005 ~ 0.05㎎N이며 표준편차는 3-10%이다.
총 질소(T-N)
총 질소는 유기성 질소 및 무기성 질소의 총합을 말하며, 유기성 질소는 아미노산, 폴리펩티드 단백질을 비롯한 여러 유기화합물의 질소가 있고(단, 시험조작의 조건에서 분해되지 않은 것은 제외) 무기성 질소는 암모니아성 질소, 아질산성 질소, 질산성 질소가 있다.
질소는 대기의78%를 차지하고 있는 흔한원소지만, 많은 생물이 대기 중의 질소를 직접 이용하지 못하고, 질산염, 아질산염, 암모니아 등의 무기질소화합물이나 단백질, 핵산 등의 유기질소화합물을 이용한다. 그러나 수중에서 이와같은 형태의 질소가 일으킬 수 있는 부영양화 등의 문제 때문에 질소를 측정할 필요성이 있다.
실험 방법
1. 실험 과정
1) 시료의 전처리 : 미지시료의 전처리 과정은 과황산칼륨 분해 중 일부만을 적용한다. 시료 50㎖(질소함량이 0.1㎎ 이상일 경우에는 희석)를 플라스크에 넣고 알칼리성 과황산칼륨 용액(증류수로 대치한다.) 10㎖를 넣어 흔들어 섞은 다음 고압증기멸균기에 넣고 가열한다. 약 120℃가 될 때부터 30분간 가열 분해병을 꺼내어 방냉한다.
2) 전처리한 시료의 상등액 25㎖를 넣어 정확히 취하여 50㎖ 또는 100㎖ 용량플라스크에 옮긴다.
3) 이 용액에 염산(1+16) 5㎖를 넣어 pH2-3으로 하고 이 용액의 일부를 층장 10㎜ 흡수셀에 옮겨 검액으로 한다. 따로 물 50㎖를 취하여 시료 전처리 시험방법에 따라 시험하고 바탕시험액으로 한다. (pH를 2-3으로 맞추는 조작은 생략한다.)
4) 바탕시험액을 대조액으로 하여 220㎚에서 검액의 흡광도를 측정하고, 미리 작성한 검량선 으로부터 총 질소의 양을 구한다.
5) 검량선의 작성 : 질산성질소 표준액(0.02㎎ NO3-N/㎖) 2㎖, 4㎖, 8㎖, 10㎖를 단계적으로 취하여 100㎖ 용량플라스크에 넣고 물을 넣어 표선을 채운 다음, 이 액 25㎖씩을 정확히 취하여 각각 50㎖ 용량플라스크 또는 비색관에 넣고 염산(1+500) 5㎖를 넣은 다음 시료의 시험방법에 따라 시험하여 질소의 양과 흡광도와의 관계선을 작성한다.
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