일반생물학실험 | 혈구세포관찰 및 혈액형판정

 

 

 

TIP

 

 

1. 광학현미경으로 보이는 혈구세포의 특징을 이해한다.
2. 항원항체반응을 이용하여 혈액형 판정의 원리를 이해한다.

 

 

 

ABO 혈액형

ABO 혈액형은 각 혈액의 적혈구가 갖는 항원의 기호에 따라 A, B, AB, O형의 4가지로 나눈다. 이러한 항원은 유전적으로 결정되는 것이며, 각 인종에 따라 그 표현형의 출현 빈도는 각각 다르다. 한편 혈장에는 항원 A, B에 대하여 각각 α(항A)와 β(항B)항체가 있다. 수혈을 할 경우에는 혈액을 제공하는 사람과 받는 사람의 혈액형 사이에 수혈가능 여부를 반드시 검사해야 한다. 부적합한 혈액형 사이에서 수혈을 하면 항원-항체 반응에 의한 적혈구의 응집현상이 일어나 위험한 부작용을 가져오며, 심한 경우에는 생명에까지 위협을 받게 된다.

 

수혈에 있어서 문제가 되는 것은 공혈자의 적혈구가 수혈자의 혈장 내의 항체에 의해 일어나는 응집현상 뿐이며, 반대로 공혈자의 혈장에 의해 수혈자의 적혈구가 응집되는 일은 거의 없다. 왜냐하면 후자의 경우, 공혈자의 혈장내 항체는 수혈자의 혈장에 의해 수혈즉시 희석되기 때문이다. 그러므로 O형 혈액형인 경우 적혈구에 항원이 없으므로 응집이 일어날 수 없고, 또 혈장내 항체는 수혈자의 혈장에 의해 곧 희석되므로 이를 만능 공혈자라 부른다. 또한 AB형은 이와 정반대의 현상을 나타내므로 만능수혈자라 한다.

 

 

혈구 세포

혈구세포에는 적혈구, 백혈구, 혈소판 3가지로 구분되어 있으며 적혈구(Red blood cell)은 혈구를 구성하는 세포중에 가장 많은 비율을 차지하고 있다. 하지만 사람을 포함한 포유류들의 적혈구는 무핵 세포이고, 그 외에 모든 척추동물들은 유핵 세포이다. 왜냐하면 사람의 적혈구에는 생성초기에는 핵이 있었지만, 성숙되면서 핵이 사라지기 때문이다. 적혈구의 역할은 헤모글로빈과 결합하여 산소를 세포로 운반하는 역할을 하는데 헤모글로빈이 혈색소를 지니기 때문에 적혈구는 붉게 보인다. 적혈구의 생성장소는 성인의 경우 늑골, 흉골, 추골에서 생성되며 100～120일 정도 수명을 가지고 있으며 수명을 다한 적혈구는 지라 혹은 간에서 파괴 되어 그 성분은 재활용 된다.

 

백혈구(white blood cell) 즉, leukocytes는 핵이 있는 큰 둥근 세포로 백혈구는 혈색소가 없기 때문에 흰색으로 보이며 숫자 또한 적혈구보다 적다. 백혈구는 질병을 일으키는 미생물(병원체)을 파괴하여 인체를 보호하고 식세포작용(phagocytosis)으로 죽은 조직과 다른 세포 찌꺼기를 제거하는 일을 주로 한다. 그리고 백혈구의 수명은 매우 다양하여 과립구는 단 몇시간을 살 수 있지만, 림프구는 경우에 따라서 몇 년간을 살 수 있다.

 

혈소판(platelets)은 더 큰 거대핵세포의 작은 세포조각으로 정상적으로 혈액 1mm³당 150,000～450,000개의 혈소판이 있으며 혈소판은 적골수에서 생산되며, 수명은 5～9일 정도며 혈소판의 생산을 혈소판형성작용(thrombopoiesis)이라고 한다.

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실험 방법

1. 혈액형 판정

1) 혈액채취

① 소독솜을 이용하여 손가락 끝을 닦는다.

② 일회용 란셋으로 손가락 끝을 딴다.

③ 혈액을 슬라이드 글라스 양쪽 편에 한 방울씩 떨어뜨린다.

항혈청 A, 항혈청 B 시약을 각각 한 방울씩 떨어뜨린다.

잘 섞어준 후에 관찰한다.

 

2. 도말 및 염색

1) 혈액도말 - Slide glass method (wedge smear method)

① 새 slide glass의 우측 끝에서 1.5 ㎝ 정도 안쪽 부위에 혈액 한 방울을 놓는다.

② Spreader(미는 유리)를 우측 손으로 쥐고 혈액에 접촉시켜 고르게 퍼지면 30도 각도를 유지하여 천천히 (힘을 가하지 말것) 같은 힘으로 slide 좌측방향으로 쭉 민다. 도말을 끝 부분은 예리하게 절단되어야 한다.

③ Blood film을 공기 중에서 자연 건조시킨다.

 

2) Wright stain method

① methanol로 30초간 고정시킨다. 슬라이드를 기울여 methanol을 제거한다.

② 도말표본에 Wright solution 15방울정도 떨어뜨리고 2-5분정도 고정 및 염색시킨다

③ 동량의 완충용액을 염색액 위에 중첩시켜서 표면에 금속성의 물질이 형성될 때까지 입으로 살며시 좌, 우에서 교대로 불어준다. : 4-5분이면 염색이 끝난다.

④ 수돗물(tap water)로 30초간 씻고 건조시킨다.

⑤ 커버글라스를 덮고 현미경으로 검경한다.

 

 

 

[일반생물학실험]혈구세포관찰 및 혈액형판정 레포트