미생물실험 | Gram staining과 현미경을 이용한 관찰

 

 

 

TIP

 

 

현미경을 이용하여 gram staining을 한다.

 

 

 

Gram positive 와 negative bacteria의 차이점

특 성	Gram 양성균	Gram 음성균
1. 세포벽 구조	두께(15∼80nm), 단층(single layer)	두께(15∼80nm), 삼층(triple layer)
2. 세포벽 조성	저지질(1∼4%). Peptidoglucan은 단층에 존재한다. 주성분은 세균 세포의 건물량의 50% 이상, teichoic acid가 있다.	고지질(11∼22%). Peptidoglucan은 내부 강인층에 존재한다. 주성분은 세균 세포의 건물량의 10% 정도, teichoic acid가 없다.
3. Penicillin에 대한 감수성	보다 많은 감수성이다.	보다 적은 감수성이다.
4. 염기성 색소에 한 생육저지(crystal violet)	생육은 현저히 저지된다.	생육은 저지되지 않는다.
5. 영양 요구도	비교적 복잡하다.	비교적 단순하다.
6. 물리적 붕괴에 대한 저항	저항성이 크다.	저항성이 낮다.

 

positive(좌)와 negative(우)

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 슬라이드에 NaCl을 떨어뜨렸다.

 

2) 슬라이드에 3종류의 세균을 도말했다.

 

3) 알코올램프로 도말한 부위를 고정했다.

 

4) Crystal violet 한 방울을 떨어뜨리고 1분간 반응시켰다.

 

5) 흐르는 물로 슬라이드 뒷면으로 물을 흘려보내어 washing했다.

 

6) Iodine 한 방울을 가하여 1분간 반응시켰다.

 

7) 흐르는 물로 washing했다.

 

8) 탈색제로 30초간 탈색시켰다.

 

9) 흐르는 물로 washing했다.

 

10) Safranin O 용액 한 방울을 떨어뜨린 후 1분간 반응시켰다.

 

11) 흐르는 물로 washing했다.

 

12) 건조시킨 후 현미경으로 관찰했다.

 

 

 

[미생물실험]Gram staining과 현미경을 이용한 관찰 레포트