분자생물학개론 | HPLC of peptides and proteins

 

 

 

TIP

 

 

1. Basic Theory and Methodology
2. Liqiud Chromatogaphy의 종류
3. High Performance Liquid Chromatography
4. Retention and Bandwidth Relationships
5. Diagram of the retention parameters that describe a chromatographic separation
6. Capacity factor, k'
7. Equilibrium Distribution Coefficient
8. Selectivity Factors(Seperation factor, α)
9. Column Efficiency (N=Theoretical Plate Number)
10. Resolution

 

 

 

Basic Theory and Methodology

크로마토그래피(Chromatography) : 혼합물의 성분물질을 이동상과 고정상을 이용하여 분리하는 방법

혼합된 시료성분이 이동상과 고정상 사이를 흐르면서 흡착, 분배, 이온교환 또는 분자크기 배제작용 등에 의해 각각의 단일 성분으로 분리되는 것을 말한다. 분리, 정성, 정량 등의 분석목적과 분리,정제, 분취 목적에 이용

 

 

1) 이동상(Mobile Phase) : 시료성분을 주입구에서 검출기까지 이동시켜주는 역할을 하며, 분석 시 시료 성분들간의 분리 정도에도 영향을 준다.

 

2) 고정상(Stationary Phase) : 컬럼 내 충진 된 물질,즉  충진제를 말하며 충진제와 시료성분과의 흡착, 분배, 이온교환, 분자 크기배제 등의 작용에 의해 혼합물이 단일물질로 분리가 일어나는 곳이다.

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Liqiud Chromatogaphy의 종류

A. Adsorption(흡착) Chromatography : 고체 정지상(Silica, alumina)에 대한 흡착 정도의 차에 의해 분리.

 

B. Partition(분배) Chromatography : 이동상과 고정상 사이에서의 분배(상대적 용해도의 차이)에 의해 sample이 retain된다.

 

C. Ion-exchange(이온 교환) Chromatography : 액체시료를 이온교환컬럼에 고압으로 전개시켜 분리되는 각 성분의 크로마토그램을 작성하여 분석하는 고속액체 크로마토그래피의 일종으로소 물 시료중 음이온(F-, Cl-, NO3-, PO4-, Br-, SO4-)의 정성 및 정량분석에 이용된다. 

 

D. Size exclusion(크기배제) Chromatography : 고정상으로 다공성 입자를 사용하여, 시료성분들이 고정상을 통과하여 나오는 경로 차에 의해 분리가 일어난다.

 

 

 

 

[분자생물학]HPLC of peptides and proteins 레포트