분자생물학개론 | Cell Banking

TIP

 

 

1. 세포주 동결보존의 필요성
2. 동결에서 세포에 나타나는 현상
3. 동결보존제의 종류 및 역할
4. 동결보존 방법
5. 해동방법
6. 무혈청 배지를 이용한 장기 동결보존

 

 

 

세포주 동결보존의 필요성

1) 의약품 생산에 있어서 동물세포는 장기간 동안 세포주의 특성을 유지할 수 있어야 한다.

2) 동결보존에 의해 세포 배양 및 유지의 어려움 극복 가능

3) 세균이나 mycoplasma 의 오염을 방지

4) 세포주의 형질 전환 방지

5) 실험 및 생상의 재현성을 확립하는데 중요한 역할을 함.

 

 

동결에서 세포에 나타나는 현상

1) 온도 급속히 냉각 시, 세포막 외부가 먼저 동결되어 형성된 얼음 결정에 의해 세포막 파괴 및 각종 세포기관에 손상과 같은 세포내부의 물리적 손상이 나타남

2) 온도 천천히 냉각 시, 세포 내 액이 세포 밖으로 충분히 유출되면서 세포 내부 얼음결정이 천천히 형성되고, 크기가 작은 입방체를 형성하여 세포막 및 세포기관에 큰 손상을 입히지 않음

3) 온도 너무 천천히 냉각 시, 세포 내 용매가 밖으로 빠져나오고 세포외부가 고장액으로 작용하여 세포 내외부가 고장액으로 작용하여 세포 내․외부 삼투압 차이 발생하여 세포막 손상, 세포액의 점도와 pH변화가 발생

 

 

동결보존제의 종류 및 역할

1) 세포막 투과성 동결 보존제

2) Glycerol, dimethylsulfooxide (DMSO), glycol 등

3) 동결 시, 세포 내의 수분을 대체에 의한 수분량 감소로 얼음결정 형성 억제

4) 세포막 비투과성 동결보존제

5) sucrose, raffinose, lactose, trehalose, albumin, serum 등

6) 세포동결 직전에, 세포 내 수분을 유출시켜 세포 내외의 삼투평형을 유지하여 세포막 손상방지

 

 

 

 

[분자생물학]cell banking 레포트