Horse blood agar plate에서 실험미생물을 배양하여 용혈현상 유무로 안전성을 판단해보자.
용혈 현상 : 적혈구막이 터져 헤모글로빈이 세포 밖으로 유출되는 현상
1. 생체 내에서의 용혈 - 적혈구막이 선천적으로 약한 경우난 적혈구 파괴의 항진 시에 나타나며, 이형 수혈의 경우에도 발생
2. 물리적 용혈 - 진탕, 가열, 저온, 방사선, 삼투압 변화 등에 의해 용혈이 일어나기도 함.
3. 화학적 용혈 - 산, 알칼리, 지방산, 사포닌 등에 의해 발생
4. 동․식물성의 혈액 독 - 뱀, 벌, 전갈, 지네 등의 동․식물성 혈액 독에 의해서 용혈이 발생
5. 세균성 독소에 의한 용혈 - 포도구균, 연쇄구균 및 콜레라균 등의 독성에 의해서도 발생
6. 자기면역성 용혈 - 적혈구막에 대한 자기 항체가 생긴 경우에도 용혈이 일어남.
실험 방법
1. Blood plate 제조
1) blood agar base 36g/ 증류수 100㎖
2) 1)을 autoclave(121℃, 15min)한 후 50℃정도로 식을 때까지 잘 섞어준다.
3) horse blood를 7% 넣어서 잘 섞어준다. (거품이 나지 않도록)
4) 3)을 멸균된 petridish에 약 20㎖씩 부어준다.
2. hemolysis 반응
1) 7% horse blood 첨가 Blood agar base 평판배지 만들기
2) 실험균주를 streaking한다.
3) 30℃에서 48시간 배양한다.
4) 균체 주위에 투명환의 생성여부로 용혈성을 판단한다.
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