병원미생물실험 | 토양 속 미생물 채취 및 배양 및 streaking을 이용한 부차 배양

 

 

 

TIP

 

 

토양을 채취한 후 그 속의 미생물의 배양 방법을 습득한다.

 

 

 

미생물은 눈에 보이지 않는 생명체를 말하며, 주로 세균과 곰팡이 그리고 바이러스가 대표적인 생명체이다. 특히. 세균은 다양한 자연환경에 존재하며, 일반적으로 독립적으로 생활하고 있다. 세균을 배양하기 위해서는 배양하고자 하는 세균의 특성을 고려하여 잘 자랄 수 있는 환경을 제공해 주여야 한다. 이러한 환경에는 온도와 pH가 중요하다. 온도는 배양기를 이용하여 조절하며, pH는 배지를 만들 때 조정한다.

 

준비된 배지에 세균을 접종하기 위해서는 다른 미생물이 들어오지 않도록 무균조작을 하여야 한다. 일반적으로 무균조작을 위하여 clean bench를 사용하는데, 이는 외부의 공기가 침입하지 않도록 차단 막을 만들고, 외부로부터 오염된 공기가 들어가지 않도록 차단장치를 마련한 박스형의 공간을 말한다.

 

무균실이 없을 경우에는 실험대를 잘 소독하고 알코올램프를 여러 개 장치한 다음 일부의 공간에 오염된 공기가 들어오지 않게 한 다음 조작하면 어느 정도의 무균조작이 가능하다. 비록 무균조작을 위한 시설도 갖추어지고 모든 재료나 도구를 멸균하였다 하더라도, 그들을 무균적으로 이용하지 않으면 여전히 오염의 기회를 제공하게 된다.

 

예를 들어 clean bench에서 작업할 때 더러운 손으로 작업한다든지, 상자 앞에서 기침을 하거나 잡담을 함으로서 무균조작의 효과를 상쇄시키는 행동들은 삼가야 할 것이다. 그 외에도 실험에 많이 사용되는 micropipette, pipette, 용액 등을 취급할 때에는 가능하면 오염의 가능성을 줄일 수 있도록 조작하여야 무균조작을 성공적으로 실행할 수 있을 것이다.

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실험 방법

1. 토양 미생물 배양

① 유기물이 풍부한 토양을 채취 한다.

 

② petri dish에 채취한 토양을 적당히 넣고 멸균된 dH₂O 을 충분히 잠길 정도로 붓고 잘 흔든다.

 

③ 토양이 가라 앉으면 피펫으로 500㎕, 1/10, 1/100희석해서 Nutrient agar 배지, Czapek-Dox agar 배지에 도말한다.

 

④ Czapek-Dox agar 배지 25℃, Nutrient agar 37℃ incubator에 배양.

 

2. 토양 미생물 streaking

① clean bench에 알콜 램프를 켜고, 알콜로 주변을 닦는다.

 

② 백금이를 화염멸균을 한 후 식힌다.

 

③ 균주를 조금 떠서 좁은 범위 내에서 수차례 왕복하여 세균을 streaking 한다. 3단 streaking 한다.

 

④ 백금이를 다시 화염멸균 한 후, 뒷정리 한다.

 

⑤ Streaking된 배지는 뒤집어 37도 incubator에 넣어준 후 12∼13시간 배양한다

 

 

 

 

[병원미생물실험] 토양 속 미생물 채취 및 배양 및 streaking을 이용한 부차 배양 레포트