생명과학실험 | Chick - embryo 발생과정 관찰 chorioallantoic membrane(CAM) assay

 

 

 

TIP

 

 

1. 모델생명체인 Chick의 발생과정을 관찰한다.
2. Chick embryo 혈관형성에 all-trans-retinoic acid가 미치는 영향을 분석한다.

 

 

 

척추동물의 모든 기관, 조직은 발생 초기에 형성되는 초기 삼배엽(ectoderm, mesoderm, endoderm)에서 발생된다. 본 실험에서는 초기 삼배엽과 이에서 유래되는 기관들을 관찰한다.

 

혈관은 처음으로 배아 바깥에 형성되며, chorioallantoic membrane(CAM)에서의 혈관형성은 화학물질이 혈관형성에 미치는 영향 분석법으로 자주 사용된다. 본 실험에서는 retinoic acid가 혈관형성에 미치는 영향을 분석한다.

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실험 방법

1. Chick embryo의 준비

1) 계란의 덜 뾰족한 둥근 부분을 핀셋으로 조심스럽게 뚫어 공기를 제거한다.

 

2) 계란 측면에 tape를 붙인 후, tape가 부차괸 부분을 가위로 오려낸다.

 

3) Retinoic acid 또는 70% ethanol(10㎕씩) 처리한 filter paper를, 각각 배아를 가리지 않도록 embryo의 혈관부분에 올려둔다. (2개의 embryo에 Retinoic acid를 처리한 filter paper를 올리고, 1개의 embryo에 ethanol을 처리한 filter paper를 올림. 우리 조는 2개의 embryo에 동량의 Retinoic acid를 처리하였다.)

 

4) Penicillin-streptomycin(anti-biotics, 200㎕)을 투여하고 tape로 계란을 봉한다. (외부에서 병원균이나 감염물질이 들어가서 다른 요인에 의해 배아가 발달되지 못하는 것을 막기 위함)

 

5) 37℃ Incubator에서 키운다.

 

6) 약 2일 후 혈관형성의 정도를 관찰한다.

 

2. Chick embryo 발생 관찰

1) 기능을 조사 한 구조들이 관찰되는 slide를 차장서 관찰하고, 그림을 그린 후 각 발생 stage를 기록한다.

 

 

 

[생명과학실험]Chick - embryo 발생과정 관찰 chorioallantoic membrane(CAM) assay 레포트