1. 철 표준용액의 흡광도를 측정하여 농도-흡광도 관계를 파악하고, Beer 법칙과 standard 용액의 농도(Fe 함유량)-흡광도 식을 이용, Vitamin 정 중 철을 정량한다.
2. 분광광도법을 이용하여 시중에서 파는 비타민 정 중의 철의 함량을 분석할 수 있다.
3. 비타민에 들어있는 철을 산에 녹여 히드로퀴논에 의해 환원하여 착물을 만들어 정량을 구할 수 있다.
4. UV/visible spectrometer를 이용하여 unknown sample이 어떤 착물인지 그리고 농도를 알아낸다
본 실험은 Fe(Ⅱ)의 1,10-phenanthroline complex와 Fe(Ⅲ)의 thiocyanate complex의 uv/vis spectrum를 찍어 이들의 spectrum을 구별하고 unknown sample이 주어졌을 때 앞의 spectrum들과 비교하여 어떤 착물인지를 알아내어 본다.
실험 방법
Step 1
∘ Fe가 함유된 Vitamin 1정을 100㎖ 비커에 놓고, 후드에서 6M HCl 25㎖와 함께 15분간 가볍게 끓인다.
∘ 용액을 100㎖ Volmetric Flask에 직접 거른다. 비커와 거름종이를 소량의 물로 씻는다.
∘ 식힌 후, 표 선까지 묽히고 잘 섞는다.
∘ 이 용액 5.00㎖를 새 100㎖ Volumetric Flask에서 묽힌다.
Step 2
∘ Fe Standard Solution 10.00㎖를 Pipet으로 비커에 취하고, pH 종이로 pH를 잰다.
∘ pH가 약 3.5에 이를 때 까지 sodium citrate 용액을 한 방울씩 방울 수를 세면서 가한다.
Step 3
∘ Fe Standard Solution 10.00㎖를 피펫으로 100㎖ 부피플라스크에 취하고, 위의 단계 2에 들었던 citric acid 용액의 방울 수 만큼 가한다.
∘ Hydroquinone 용액 2.00㎖와 O-phenanthroline 용액 3.00㎖를 가하여 물로 표선까지 묽히고 잘 섞는다.
Step 4
∘ Fe Standard solution 5.00, 2.00, 1.00㎖로부터 용액의 세 개를 더 만들고, 철이 들어있지 않은 바탕용액도 만든다.
∘ sodium citrate 용액은 철 용액에 비례해서 넣는다.
Step 5
∘ 철이 든 비타민 정의 용액 10.00㎖를 pH 3.5로 하는데 필요한 sodium citrate의 방울 수를 구한다.
Step 6
∘ 비타민 정을 녹인 용액 10.00㎖를 피펫으로 100㎖ Volumetric Flask에 옮긴다.
∘ 필요한 양의 citric acid, Hydroquinone 용액 2.00㎖, o-phenanthroline 용액 3.00㎖를 가한 다음, 표선까지 묽히고 잘 섞는다.
Step 7
∘ 용액을 적어도 10분간 그대로 둔다. 10분 후 508㎚에서 각 용액의 absorbance를 잰다.
∘ 기준 큐벡에는 증류수로 채우고 Fe Standard solution의 흡광도에서 바탕용액의 absorbance를 빼준다.
(Fe의 흡광도를 정확히 알기 위해)
Step 8
∘ 철 표준용액의 ㎍에 대한 absorbance의 그래프를 그린다.
∘ 각 용액에서 Fe(O-phenanthroline)32+ 의 몰농도를 구한다.
Step 9
∘ 검정곡선을 이용하여 비타민 정 중에 함유된 철의 ㎍ 수를 구한다.
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