미생물실험 | 미생물의 현미경 관찰

 

 

 

Experiment 1. Gram positive/negative

1. 프레파라트 제작하기

① 우선 준비된 4개의 슬라이드 글라스에 헷갈리지 않도록 펜으로 균주명을 적어놓는다. 그리고 프레파라트 제작 후 현미경 관찰과정에서 쉽게 균들을 관찰할 수 있게끔 펜으로 균을 놓을 곳의 뒷면에 원을 그려서 영역을 표시해준다.

② Smear – 4개의 튜브에 들어있는 각각의 균들을 Pipet을 이용하여 일정량( 을 각각의 슬라이드 글라스 위에 놓는다. 사용한 피펫팁은 알코올램프에 살짝 데어주어서 균에 의한 오염을 방지한다.

③ 알코올램프를 켜고 균이 올려진 슬라이드글라스의 뒷면을 알코올램프에 물기가 없어질 때까지 살짝 가져다대댄다.

④ Staining – 먼저 준비된 Crystal violet을 슬라이드글라스위의 균에 놓는다.

⑤ washing – 약 1분후에 슬라이드 글라스의 뒷면을 약하게 흐르는 물에 대어줘서 Crystal violet을 씻겨준다.

⑥ iodine 처리 - iodine을 Pipet을 이용해서 슬라이드글라스위의 균에 놓는다.

⑦ washing – ethanol로 iodine을 씻겨낸다.

⑧ counter staining - safranin을 Pipet을 이용해서 슬라이드글라스위의 균에 놓는다.

⑨ washing - 약 1분후에 슬라이드 글라스의 뒷면을 약하게 흐르는 물에 대어줘서 safanin을 씻겨준다.

⑩ ①∼⑨과정을 거친 4개의 슬라이드 글라스위에 끝쪽부터 대각선모양으로 커버글라스를 덮어준다.

 

2. 현미경으로 미생물 관찰하기

① 준비된 프레파라트를 현미경위에 올려놓고 고정시켜준다.

② 앞서 프레파라트 뒷면에 표시한 곳을 빛의 양을 조절하고 미동,조동나사 등을 통해서 초점을 맞춰준다.

③ 낮은 배율(접안렌즈배율 X10, 대물렌즈배율 X4 = x40 )부터 시작하여 → (x100) → (x400) → 고배율(x1000)로 관찰한다.

 

 

Experiment 2. 미생물의 현미경 관찰

1. 프레파라트 제작하기

① 우선 준비된 4개의 슬라이드 글라스에 헷갈리지 않도록 펜으로 균주명을 적어놓는다. 그리고 프레파라트 제작 후 현미경 관찰과정에서 쉽게 균들을 관찰할 수 있게끔 펜으로 균을 놓을 슬라이드 글라스의 뒷면에 원을 그려서 영역을 표시해준다.

② 3개의 튜브( Streptomyces s.p , Saccharomyces cerevisiae ,Candida albicans) 에 들어있는 각각의 균들을 Pipet을 이용하여 일정량을 각각의 슬라이드 글라스 위에 놓는다.

③ 균이 올려진 슬라이드글라스를 물기가 조금 남을 때까지 알코올램프 위에 천천히 갖다 대준다.

④ 슬라이드 글라스 끝쪽부터 대각선모양으로 커버글라스를 덮어준다.

⑤ Aspergillus terreus 의 경우에는 덩어리형태로 뭉쳐져 있기 때문에 알코올램프에 달궈준 백금선을 이용하여 덩어리를 슬라이드 글라스에 놓는다. 커버글라스를 덮을 때 뜨지 않도록 커버글라스의 양쪽에서 살짝 눌러준다. 사용한 백금선은 다시 알코올램프에 달궈서 멸균시켜준다.

 

2. 현미경으로 미생물관찰하기

① 준비된 프레파라트를 현미경위에 올려놓고 고정시켜준다.

② 프레파라트 뒷면에 표시한 곳을 기준으로 빛의 양을 조절하고 미동,조동나사 등을 통해서 초점을 맞춰준다.

③ 낮은 배율(접안렌즈배율 X10, 대물렌즈배율 X4 = x40 )부터 시작하여 →(x100) →(x400) → 고배율(x1000)로 관찰한다.

 

 

 

 

[미생물실험] 미생물의 현미경 관찰 레포트