미생물학실험 | MRS Agar 배지의 제조

 

 

 

앞으로 미생물들을 연구하기 위해서는 배지에 미생물을 배양하는 것이 실험의 기초가 될 것이다. 그리고 그 베이스 위에 여러 미생물의 특성에 맞는 실험 방법 응응하여야 할 것이다.

 

 

미생물의 배양에 필요한 배지는 배양하고자 하는 미생물의 종류에 따라 그 특성에 가장 적합한 것들을 선택하여 사용해야 하는데, 이는 단순히 미생물만 배양하는 것뿐 아니라, 집락의 형태와 특성, 생화학적 특성, 당 분해 성질, 유전적 특성, 배지의 선택, 구성 성분, 제조방법에 따라 미생물의 성패가 결정되기 때문이다.

 

그래서 이번 실험을 통하여 기본적인 미생물 배양을 익히고 그 방법을 숙지 하고자한다. 본 실험은 MRS를 사용 만든 액상배지의 L. acidophilus을 고체배지를 직접 배양해 보고 배양 후 일정시간 후에 colony 형성 여부를 확인하여 평가하고자한다.

728x90

 

실험 방법

실험 1. 고체배지 제조(MRS Agar 200㎖ 제조)

① 손을 70% 알코올로 소독한 후 Cleanbench에 손을 넣는다.

 

② 250㎖ 삼각 flask(250㎖)에 MRS Broth 200㎖양인 11g와 Agar powder(1.5%) 200㎖ 양인 3g를 넣는다.

 

③ 증류수 200㎖을 메스실린더로 측정한다.

 

④ MRS Broth와 Agar powder가 든 삼각 flask에 증류수 200㎖를 넣는다.

 

⑤ 마그네틱 바를 비커에 넣고 Hotplate and stirrer를 사용하여 교반한다.

 

⑥ 교반이 끝나면 Autoclave(멸균기)에 넣고 멸균을 한다.

 

 

⑦ 멸균을 마치고나면 충분히 식히고(약 45℃정도)MRS Agar를 clean bench에서 petri dish에 약 25㎖씩 담고 굳힌다.

 

실험 2. 고체배지에 균주 접종 (Streaking)

① 손을 70% 알코올로 소독한 후 Cleanbench에 손을 넣는다.

 

② 백금이를 알코올램프를 이용하여 화염 멸균한다.

 

③ 멸균한 백금이를 접종할 고체배지에 시작점을 정하 여 식힌다.

 

④ 식힌 백금이로 접종할 균인 L. acidophilus를 살짝 찍어낸다.

 

⑤ 균을 묻힌 백금이로 시작점부분에 첫 번째 획선 배양한다.

 

 

⑥ 평판을 90° 돌린 후 첫 번째 획선 배양한 구획과 약간 중첩이 되도록 두 번째 구획에 획선 배양한다.

 

⑦ 다시 평판을 90° 돌린 후 두 번째 획선 배양한 구획과 약간 중첩이 되도록 세 번째 구획에 획선 배양한다.

 

⑧ 평판 뒷면에 균주 명과 필요한 기록을 한 후 미리 30℃로 setting된 Incubator에 18∼24시간 배양한다.

 

 

 

[미생물학실험] MRS Agar 배지의 제조 레포트