일반화학실험 | Thin layer Chromatography - 얇은막 크로마토그래피

 

 

 

TIP

 

 

1. 미량의 물질을 분리 또는 정제하는 방법으로 쓰이는 크로마토그래피에 대해 이해한다.
2. 혼합물을 분리 및 정제를 해 본다 

 

 

 

Definitions of adsorption chromatography

1. 이동상(Mobile phase)이 고정상(Stationary phase)을 통과할 때 시료성분들이 두 상에 대해서 서로 다른 분포를 갖는 상분포(phase distribution)의 원리이다.

 

2. 성분이 컬럼을 통과하면서 분배가 이루어지며 분배 계수로도 나타낸다.

 

3. 각 성분들은 서로 다른 이동속도에 따라 분리 되어 크로마토그램을 만들게 된다.

 

4. 복잡한 혼합물에서 두 가지 상(Phase)의 분배 차이 이용한다. 즉, 소량의 시료 용액을 컬럼에 주입하면 이동상은 시료를 이동시킨다. 각 성분은 충진물에 흡착과 탈착이 연속적으로 이루어지면서 충진물과의 친화력의 차이만큼 각각 이동속도가 느려진다. 각 성분 x는 컬럼을 통과하면서 고정상(s, 충진물을 말함)과 이동상(m) 사이에서 분배가 이루어지며 분배의 정도가 어느쪽으로 치우쳤는지(이동상 혹은 고정상)를 분배계수로 나타낼 수 있다

(a) physical methods of separation

(b) two distinct phases are involved(Stationary, mobile)

(c) separation results from differences in the distribution constants of the individual sample components between the two phases.

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실험 방법

Part I - Plate Spotting

1. 실리카겔이 도포된 유리판을 3㎝ x 10㎝ 크기로 자른 다음, 한쪽 끝에서 약 1cm 떨어진 곳에 연필로 흐리게 출발선을 긋는다.

 

2. 이 선의 중앙에 X표를 하고 여기에 색소 혼합액을 찍은 유리 모세관으로 가볍게 접촉시켜 둥글게 스며들게 한다.(spotting)

 

Part II - TLC Developing

3. 전개용매를 유리병에 묻지 않도록 주의하면서 1㎝ 정도 채운다

 

4. 앞에서 준비한 plate를 유리병에 넣어준다

 

 

5. 유리병의 뚜껑을 꼭 닫아 용매가 증발되지 않도록 한다.

 

6. 용매가 유리판의 위 끝에서 1~2㎝ 정도까지 올라 갔을 때 유리판을 꺼내 용매가 올라 온 자리에 용매선을 표시

 

Part III - R_f Calculating

7. Plate를 말린 다음 자외선 램프를 이용하여 Spot 전개를 확인

 

8. R_f 값 계산

 

9. 위의 과정을 전개 용매에 비율을 달리하여 각각의 경우에 대한 시료의 R_f 값을 계산하여 시료의 성질을 비교

 

 

 

 

[일반화학실험]Thin layer Chromatography 레포트