배지(medium)
미생물을 배양하고 옮기거나 저장하는 데 사용되는 고체 또는 액체 물질
1. 사용목적에 의한 분류
① 일반배지 : 대량증식용 배지
② 선택배지(selective medium) : 특정 균종의 성장을 도모하고 다른 미생물의 성장을 억제함으로서 원하는 균종만 선택적으로 배양하기 위하여 사용하는 배지
③ 분별배지(differential medium) : 배지에 특수한 생화학적 지시약을 넣어줌으로서 한 종의 미생물을 다른 종과 구별할 수 있게 하는 배지
2. 배지형태(상태)에 의한 분류
① 고체(고형)배지(solid medium) : 액체배지에 한천(agar) 등의 고형화 물질이 일정량 포함된 것, 미생물의 분리 및 보존을 위해 사용됨(일반적으로 한천(agar)을 1.5~2.0% 정도 넣어서 고형화시킴)
∙ 평탄배지(Plate medium) : 페트리 접시에 일정량의 배지를 넣어 굳힌 것, 주로 세균의 분리 배양, colony의 관찰에 이용됨
∙ 고층배지 : 시험관에 배지를 1/2 높이로 분주, 멸균한 것을 바로 세운 그대로 응고 시킨 것
② 액체(액상)배지(liquid medium) : 고형화 물질이 첨가되지 않은 액체상태의 배지
실험 방법
Part.1 배지 만들기
1) 영양배지(Nutrient broth)를 정량하여 삼각플라스크에 넣고 증류수를 넣어 녹인다.
2) 호일로 입구를 막은 뒤 121℃에서 15분간 autoclaving한다.
3) 멸균이 끝난 뒤에는 clean bench에서 작업을 하며, Plate에 배지를 분주할 때는 두께가 4~5㎜ 정도 되도록 천천히 붓는다.
4) 배지가 단단히 굳을 때까지 clean bench안에 plate를 방치한다.
5) 만들어 놓은 plate를 보관할 때에는 4℃ 냉장고에 보관한다.
Part.2 균주 접종 & 배양
1) 미생물 시료를 만들어진 배지에 접종도구(백금이, 삼각유리막대)를 사용하여 도말한다.
2) 배지(plate)를 37℃ 배양기(incubator)에 뒤집어서 넣고 18~24시간 배양한다.
3) Plate 배지에 자라는 콜로니들을 관찰한다. (색깔, 크기, 모양, 광택, 질감 등)
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