미생물 실험 | 현미경의 관찰 및 염색 - 여러 가지 미생물 염색법

 

 

 

TIP

 

 

다양한 균들과 곰팡이를 여러 가지 방법으로 염색 및 관찰하여 보고 각각의 특징을 알 수 있다

 

 

 

Staining의 종류

1. 염색의 이유

미생물은 무색투명하고 곰팡이나 효모에 비해서 크기가 작고 명암의 차이가 크지 않기 때문에 현미경으로 관찰하기 쉽지 않으므로 염색을 해서 관찰하면 쉽게 검체 내의 세균의 유무와 균 양을 간단히 알 수가 있고 세균의 염색상과 형태를 보아서 균종이 추정되어 세균의 동정방향을 결정할 수 있으며, 세균 감염증 진단에 도움이 된다.

 

또한 조기에 항생물질의 선택방침을 결정할 수 있다. 현미경으로 세균을 관찰할 때는 살아있는 상태로 검경하는 신선표본과 고정한 상태에서 색소로 염색하여 검경하는 고정염색표본이 있다. 신선표본은 세균의 운동상태나 형태, 크기 등이 관찰되고, 고정염색표본은 염료에 대한 친화성의 차이에 의한 형태의 관찰과 세균을 분류할 때 쓰인다.

 

염색 (Stain)	단순염색 (Simple staining)	형태 및 크기관찰
		배열 관찰
	감별염색 (Differential staining)	세균의 분류	Gram stain
			Acid fast stain(항산성 염색)
		특수구조 관찰	편모염색
			아포염색
			핵염색
			협막염색

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단순염색(simple staining)

박테리아를 단일색소용액으로 염색하는 간단한 염색방법으로 다음순서에 의한다.

1. 목적 : 한 종류의 색소액을 이용하여서 한 번만 염색하는 방법으로 세균의 형태나 배열을 볼 때 이용한다.

원리 : 슬라이드 위에 도말된 균체를 한가지 염색약으로만 염색하는 방법이다. 세균의 핵산물질과 단백질물질은 대체로 음전하를 띄므로 이들과 강하게 결합할 수 이Ts,s 염기성 염색시약을 쓰면 염색이 휠씬 더 잘 된다.

 

2. 시약

① Loeffer의 alkaline methylene blue 액 : 핵은 청색으로 짙게 염색되며 세포질은 연하게 염색된다. 농즙, 분비물에서 임균을 검출할 때 자주 이용하는 염색액이다. 1～2분

② Pfeifer의 fuchsin 액 : Ziehl의 석탄산 fuchsin 액을 증류수로 5～10배 희석한 액으로 세균을 빨갛게 염색한다. 15～30초

 

3. 판독 : 배경은 밝게 나타나고 균체는 사용한 염색시약에 따라서 색깔이 다르게 나타난다

Methylene blue : 청색

Crystal violet : 보라색

Carbol fuchsin : 분홍색

 

4. 염색 과정 : 1. 도말 → 2. 건조 → 3. 고정 → 4. 염색 → 5. 세척 → 6. 건조 → 7. 검경

 

 

 

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