생화학실험 | Siderophore type detection 및 발색반응을 통한 siderophore의 작용기 확인

 

 

 

TIP

 

 

Siderophore type이 무엇인지 확인하고, column 후 그 타입이 발색한 시료를 모아  Silicagel TLC를 통해 나타난 스팟의 발색반응을 통한 siderophore의 작용기를 확인한다.

 

 

 

column chromatography

① 유리관과 같은 원기둥 모양의 관에 산화알루미늄이나 이온교환수지 등을 충전한 것

 

② column에 시료용액을 통과시키면 시료용액 중에 함유된 여러 물질이 분리되어 층상으로 column 속에 위치

 

③ 각 물질은 적당한 용리액을 흘림으로써 각 성분을 추출

 

 

TLC(Thin layer chromatography, 박층 크로마토그래피)

① 정지상으로 흡착제인 실리카겔이나 알루미나를 유리판 위에 얇게 입힌 정지상판과 이 판 위를 흐르는 용매를 이동상으로 하였을 때 TLC기판에 spotting된 물질은 이동상인 용매와 고정상인 흡착물질에 의해 경쟁이 일어나서 물질이 분리

 

② 종이크로마토그래피에 비해 전개 시간이 짧고 분리능률이 양호하며, 강한 산, 시약 등을 발색시약으로 사용

 

③ TLC는 column chromatography를 위한 최적의 elution solvent를 찾는데 유용하게 사용되며 아주 적은 양으로도 시료를 분석한다.

728x90

 

 

siderophore1.1. Siderophore type이 무엇인지 확인하고, column 후 그 타입이 발색한 시료를 모아  Silicagel TLC를 통해 나타난 스팟의 발색반응을 통한 siderophore의 작용기를 확인한다.

① 미생물이 철(Ⅲ)을 흡수하기 위해 체외로 분비하는 펩티드성 킬레이트물질

 

② 철, 중금속과 결합해 미생물이 이용할 수 있는 형태로 변환시키고, 미생물은 이 결합체를 다시 체내로 흡수해 중금속을 섭취

 

③ 세포질에서 만들어진 siderophore는 세포밖으로 나와 철과 Fe(Ⅲ)-siderophore 결합체를 형성, 이 결합체는 미생물의 막단백질을 통해 세포 속으로 들어가 Fe(Ⅱ)로 환원

 

 

 

[생화학실험]Siderophore type detection 및 발색반응을 통한 siderophore의 작용기 확인 레포트