현미경에 관한 전반적인 지식 및 사용법을 습득한다.
현미경의 역사
현미경에 관한 기록은 AD 1000년경 그리스와 로마시대의 렌즈의 사용 때부터이다. 미세한 사물을 확대하기 위하여 렌즈를 사용하였지만 현재로서는 그 기원을 밝히기에는 기록이 부족하다. 현재의 현미경과 같은 구조를 지닌 현미경 (Multiple lens) 을 발명한 사람은 1590년대의 네덜란드사람인 얀센 (Zacharias Jansen) 과 John Lipperhey이다. 당시의 발명품은 주로 해양탐사를 위해 사용되어 그 형태는 망원경의 모습을 하고 있었다.
반세기 후의 현미경은 17세기 네덜란드 사람인 레벤후크 (Anthony van Leeuwenhoek :1632~1723) 와 로버트 후크 (Robert Hooke) 에 의해 현재의 현미경의 모태가 되었다. 17세기 이후 1882년부터 독일의 광학 기술자인 칼 짜이츠 (Karl Zeiss)가 렌즈 가공기술을 개발하면서부터 현미경의 기술이 발전하게 되었다. 이후 20세기에 들어서면서 의학, 재료, 금속, 신소재, 환경 등 수많은 분야에서 현미경이 쓰여 과학과 의학 분야에서 눈부신 활약을 하게 된다. 최근에는 반도체, 신소재 분야에서 표본의 미세구조를 관찰하고 측정하는데 사용되기도 한다.
세포의 길이 측정
물체의 크기를 측정하기 위해서는 대안 마이크로미터를 사용한다. 현미경 시야에서 관찰되는 대안 마이크로미터의 눈금의 길이는 배율에 따라 달라지므로 어떤 배율에서 대안 마이크로미터의 한 눈금의 길이는 얼마인지를 측정한 뒤 물체의 크기를 측정한 후 계산을 하여야 한다, 대안 마이크로미터의 한 눈금의 길이를 측정하기 위해서는 대물 마이크로미터를 사용하여야 한다. 대물 마이크로미터의 눈금과 대안 마이크로미터의 눈금이 일치하는 지점을 찾은 후 대안 마이크로미터의 한 눈금이 얼마의 길이를 나타내는지를 계산하여야 한다.
일반적으로 대물 마이크로미터현미경에 관한 전반적인 지식 및 사용법을 습득한다.는 길이 1㎛의 구간을 100둥분 한 눈금이 새겨져 있기 때문에 결국 한 눈금이 10㎛의 크기이다. 따라서 대안 마이크로미터 10눈금에 해당 되는 대물 마이크로미터의 눈금이 3이라면 대안 마이크로미터 한 눈금은 3㎛이다. 이렇게 대물렌즈의 배율에 따라 대안 마이크로미터의 눈금을 결정한 후, 대물 마이크로미터를 제거하고 시료가 있는 슬라이드를 재물대 위에 얹어 놓고 관찰하여, 물체의 길이가 대안 마이크로미터의 눈금 몇에 해당되는지를 센 후, 이것과 이미 측정한 대안 마이크로미터 한 눈금의 길이를 곱하면 물체의 실제 길이를 계산할 수 있다.
실험 방법
1. 현미경의 종류, 구조 및 기능
1) 광학현미경
① 헌 신문지의 글자 하나를 잘라 슬라이드 글라스 위에 놓고 물을 한 방울 떨어뜨린다.
② 기포가 생기지 않도록 커버글라스를 비스듬히 세워서 천천히 눕혀서 덮는다.
③ 준비된 프레파라트를 재물대 위에 올려놓고, 프레파라트가 대물렌즈에 거의 닿을 때까지(닿지는 않도록) 옆에서 보며 조동나사로 재물대를 천천히 올린다.
④ 대안렌즈로 들여다보며 재물대를 서서히 내려 상이 나타나도록 한다.
⑤ 미동나사로 상이 더욱 또렷하게 보이도록 초점을 조절한다. 단, 쌍안현미경의 경우 diopter 조절 링을 회전시켜 두 눈의 diopter를 맞춘다.
⑥ 대물렌즈 회전 장치를 돌려서 고배율로 관찰한다. 이때 집광기(condenser)를 회전시켜 최적의 상태로 관찰한다.
⑦ 나타난 상은 왼쪽 눈으로 관찰하고, 오른쪽 눈을 이용하여 스케치한다.
2) 해부현미경
① 준비한 재료를 재물대 위에 올려놓는다.
② 조동나사를 조절해 대물렌즈를 재물대에 최대한 가깝도록 위치시킨다.
③ 대물렌즈를 위로 올리면서 초점을 맞추어 재료를 관찰한다.
2. 세포의 길이 측정
1) 마이크로미터를 이용한 측정
① 대안 마이크로미터를 광학현미경의 대안렌즈 부위에 위치시킨다(미리 고정됨).
② 광학현미경의 재물대 위에 대물마이크로미터를 올려놓고 광원의 중앙에 위치시킨다.
③ 저배율(×10) 대물렌즈를 이용하여 초점을 맞추고 대안마이크로미터의 눈금과 대물마이크로미터의 눈금이 겹치도록 서서히 광학현미경의 대안렌즈를 돌린다.
④ 고배율(×40)에서는 대물마이크로미터에 대물렌즈를 위치시키고 필요하다면 초점을 조정한다.
⑤ 대물마이크로미터의 눈금과 대안 마이크로미터 눈금의 한쪽 끝이 겹치도록 재물대를 움직인다.
⑥ 대물마이크로미터의 눈금 간격(눈금 수×0.01㎜)에 대응하여 대안마이크로미터의 눈금수를 계산한다.
⑦ 각각의 배율에서 대물마이크로미터의 눈금 크기를 계산한다.
⑧ 영구프레파라트의 세포를 필요한 배율에서 관찰한다. 한 개의 세포가 차지하고 있는 대안마이크로미터의 눈금수를 계산하여 세포의 크기를 결정한다. 세포가 둥근 형태가 아니라면 넓이를 모두 측정한다.
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