미생물실험 | 세균의 형태와 염색

 

 

 

TIP

 

 

GRAM염색을 이용하여 E.coli, Helicobacter pylori, Staphylococus aureus, Heamophylus influenza, Bacilluse subtlus를 슬라이드글라스에 염색하고 결과물을 현미경으로 관찰하는 실험을 실시하였다. 이 실험을 통하여 각 균주별 형태를 정확히 알고있는지 여부를 알아보고자 하였다. 

 

 

 

Simple staining(단순염색)

세포를 염색하기 위하어 한가지 생물학적 염료를 이용하는 염색방법이다. 미생물학에서 사용되는 생물학적 염료는 발색단을 포함하는 약 유기산의 염이다. 만약 발색단이 양전하를 띄게 되면 그것은 염기성 염료이고, methylene blue, crystal violet, 그리고 safranin과 같은 염기성 염료들은 일반적으로 세균세포들을 염색하는데 사용된다.

 

세균세포들이 염색되면 크기, 형태, 그리고 세포의 배열 같은 특징들이 쉽게 식별된다. 대부분의 세균은 0.2μm부터 5μm, 또는 그 이상의 크기를 나타낸다. 대부분의 세균세포에서 나타나는 모양은 구형(spherical 또는 coccus), 막대무양(rod 또는 bacillus), 나선형(spiral 또는 helical)이다. 그러나 가끔 난형(oval 또는 coccobacillus), 짧게 굽은 형(comma형, vibrio형), 스피로헤타형, 그리고 다 형태(pleomorphic)의 생물체가 관찰되기도 한다.

 

 

실험 방법

1. 실험 과정

1) slide에 멸균 증류수 한방울을 LOOP로 취한다.

 

2) LOOP를 화염멸균 후 균을 뭍혀서 물방울과 잘 섞는다.

 

3) 공기 중에 말린다.

 

4) 도말 부위가 위를 향하게 하여 불꽃을 2～3회 통과, 고정

 

5) Cristal Violet 한방울 첨가, 1분간 염색

 

6) 수돗물로 염색액 세척

 

7) Iodine용액 가하고 1분간 처리

 

8) 30초간 알코올로 탈색

 

9) 수돗물로 염색액 세척

 

10) Safran으로 45초간 대조 염색

 

11) 수돗물로 Safran을 씻어낸다.

 

12) 공기 중에 건조, Oil묻혀서 현미경 관찰(1000X)

 

 

 

[미생물실험]세균의 형태와 염색 레포트