실험을 통해 크로마토그래피의 원리를 이해하고, 크로마토그래피 중에서 가장 간편한 TLC의 활용도에 대하여 생각한다.
박막크로마토그래피 실험의 목적은 실험을 통하여 크로마토그래프의 원리를 분명히 이해하고, TLC의 활동에 대하여 생각하는 것이다. 크로마토그래피는 적절한 정지상과 이동상을 사용하여 시료들이 섞여있는 혼합액을 이동속도 차이를 이용하여 분리하는 방법이다. 이 때 흡착되는 힘이 약한 색소일수록 빠르게 높이 이동하고, 반대로 흡착되는 힘이 큰 색소일수록 느리게 이동한다.
박막크로마토그래피는 흡착제로 실리카겔이나 알루미나와 같은 고체의 고운 가루를 유리판이나 셀룰로이드와 같은 플라스틱판의 표면에 얇은 막이 되게 입혀 거름종이와 같이 사용하는 것이다. 실험은 전개용매를 만들고, TLC판에 시료의 spot을 찍어 전개용매에 잠기도록 한다. 전개 용매가 윗선까지 상승하면 plate를 꺼내어 UV램프로 반점을 확인한다. 용매와 각 성분이 이동한 거리를 재어 를 계산하고 미지시료가 어떤 액체의 혼합물인지 알아본다.
실험 방법
1. 실험 과정
1) 우선 전개용매를 전개병에 만들었다.
2) 전개용매 A는 hexane, ethyl acetate를 9:1의 비율로, 용매 B는 methyl chloride, methanol을 9:1의 비율로, 용매 C는 methyl chloride, methanol을 7:3의 비율로 혼합하여 만들었다.
3) 그 다음 거름종이를 주름이 잡히도록 여러번 접은 후 전개병에 넣고 뚜껑을 닫았었다.
4) TLC판을 대략 2㎝×5㎝ 되게 자르고, 양 끝부분의 1㎝ 되는 부분에 연필로 선을 그었다.
5) 이 plate를 4개 만들었다.
6) 준비된 모세관은 너무 굵기 때문에 모세관의 가운데 부분을 가열한 후 잡아당겨 얇게 만들었다.
7) 모세관을 사용하여 주어진 시료를 연필로 그은 아래쪽 선에 옮기고 전개병에 넣어 뚜껑을 닫았다.
8) 전개용매가 연필로 그은 윗선까지 상승하면 핀셋을 이용하여 꺼내고, UV램프를 이용하여 반점 가장자리를 연필로 그렸다.
9) 그리고 spot을 좀 더 잘 확인하기 위해 plate을 요오드 챔버에 넣어 발색하였다.
10) 3가지 plate를 살펴보아 시료를 잘 전개하는 용매를 선택하여 위의 과정을 미지시료에 대해서도 수행하였다.
11) 마지막으로 전개용매와 각 성분이 이동한 거리를 측정하여 이동 비를 계산하였다. 이 이동비로 미지시료가 어떤 액체시료의 혼합물인지 확인하였다.
[유기화학실험]박막 크로마토그래피 레포트
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