일반생물학실험 | 그람 염색법

 

 

 

계통분류학(systematics)은 생물들의 다양성과 그들의 유연관계를 연구하는 학문이다. 계통분류학은 계통학과 생물의 특성을 규명하고 이름을 부여하며 자연적인 유연관계에 따라 그룹으로 배치하는 분류학을 함께 연계한다. 이 때 대상 생물의 형태적, 생태적, 생리적, 분자생물학적 특징을 종합하여 종을 판별하는 것을 동정이라고 부른다. 한편 세균을 동정할 때 세균은 세포의 모양에 따라 구균, 간균, 나선균 등으로 나누기도 하지만, 본 실험에서는 그람 염색법을 이용하여 세균의 형태학적인 차이에 근거해 세균을 그람 양성균과 그람 음성균으로 분류하고자 하였다.

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실험 방법

1. 실험 과정

1) 준비된 대장균과 고초균 sample을 각각의 이름을 labeling한 슬라이드글라스에 도말하였다.

 

2) 실온에서 약 5분간 슬라이드 글라스 위의 수분을 증발시킨 뒤, 알코올램프의 불꽃에 슬라이드 글라스를 빠르게 통과시켜 열고정을 해주었다.

 

3) 슬라이드 글라스에 도말된 각각의 sample에 크리스탈 바이올렛 용액 50㎕을 피펫으로 떨어뜨려 1분간 1차 염색을 실시하였다.

 

4) 1차 염색 이후 슬라이드 글라스 뒷면에 물을 흐르게 하여 염색약을 닦아낸 후, 휴지로 물기를 제거하였다.

 

5) 루골 용액 50㎕을 떨어뜨려 1분간 방치한 뒤 이전과 동일한 방법으로 염색약을 세척해주었다.

 

6) 95% 에탄올 50㎕로 10-20초간 탈색하고 이전과 동일한 방법으로 95% 에탄올을 닦아낸 다음, 사프라닌 용액 50ul로 1분간 대조 염색하였다.

 

7) 이전과 동일하게 세척한 후 사프라닌 용액을 닦아내었다.

 

8) 커버글라스를 덮고 휴지를 이용해 빠져나온 물기를 제거한 뒤 광학현미경을 이용해 관찰하였다

 

 

 

[일반생물학실험]그람 염색법 레포트