동물생리학실험 | 척수, 뇌, 근육 조직의 고정

 

 

 

척수

척수는 경수(cervical segment), 흉수(thoracic segment), 요수(lamber segment) 및 천수(sacral segment)의 4부로 구분되며, 각 부에서는 경신경(8쌍), 흉신경(12쌍), 요신경(5쌍), 천골신경(5쌍) 및 미골신경(1쌍)을 내놓고 있다. 각 척수절의 상대적 굵기는 그 척수절에 출입하는 신경섬유의 굵기나 양, 즉 신경분포의 말초영역의 넓이에 비례한다.

 

척수의 외 표면에는 전면 정중부를 세로로 달리는 깊을 도량 즉 전정중렬과 후면의 얕은 후정중구가 있다. 전연 외측부에서 전근(ventral root)이 후면 외측부에서는 후근(dorsal root)이 나온다. 전․후근은 추간공에서 만나서 하나의 척수신경(spinal nerve)이 된다.

 

 

뇌

뇌중에서 대뇌와 소뇌를 제외한 부분, 즉 간뇌, 중뇌, 교뇌 및 연수로 이루어진 뇌의 중추를 뇌간(brain stem) 이라고 한다. 뇌간은 척수와 소뇌 및 대뇌반구의 연결부로서 작용하는 뇌에 생명유지에 필요한 기능을 갖는 부분이며 많은 뇌신경의 기시 및 종지핵을 갖고 있으므로 매우 중요한 부분이다.

 

 

근육조직(muscle tissue)

근육조직의 중요한 특성을 움직일 수 있는 수축력을 갖고 있다. 근 수축은 근 세포내에 있는 수축 단백질에 기인한다. 근세포의 길이는 그 지름에 비해서 더 길다. 근 세포는 가느다란 실 모양을 하기 때문에 근섬유라고 불리운다.

 

 

실험 방법

1. Fixation

1) 4% paraformaldehyde, 고정

2) 4℃ 냉장보관

 

2. 탈수, 투명, 침투

1) 탈수단계

50% alcohol, 1시간씩, 3회

70% alcohol, 1시간씩, 3회

95% alcohol, 1시간씩, 3회

100& alcohol, 1시간씩, 3회

 

2) 투명단계

xylene, 30분씩, 3회

xylene(1.5㎖) + 녹인 paraplast(1.5㎖)

⇒ R.T에서 overnight

⇒ oven에서 20～30분 정도 두어서 완전 녹인 후 따라버림

 

3) 침투단계

녹인 paraplast, 1시간씩, 3회

 

3. Embedding

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4. Section

1) waterbath의 온도를 40～50℃로 맞춘다

 

2) 깍은 조직을 waterbath에 넣어서 주름을 핀다.

 

3) 조직을 슬라이드에 올린다.

 

4) 건조시킴(실온 또는 40～50℃에서)

 

5. 염색(Hematoxylin / stain)

① xyleneⅠ 5min	⑫ D.W dipping
② xyleneⅡ 5min	⑬ Scott's solution
③ 100% alcohol 3min, 2회	⑭ Eosin 1min
④ 95% alcohol 3min	⑮ 70% alcohol dipping
⑤ 90% alcohol 3min	⑯ 80% alcohol dipping
⑥ 80% alcohol 3min	⑰ 90% alcohol dipping
⑦ 70% alcohol 3min	⑱ 95% alcohol dipping
⑧ D.W dipping	⑲ 100% alcohol dipping
⑨ Hematoxylin 2～3min	⑳ 100% alcohol 1min
⑩ D.W dipping	󰒒 xylene 5min
⑪ acid alcoho;(1% HCl in 70%alcohol)	󰒒 mount

 

 

 

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