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  일반생물학실험 | Expression of recombinant α-synuclein gene 실험 방법 1. 실험 과정 1) BL21의 transformation을 시행한 후 배양시킨 배지로부터 E.coli colony를 따서 LB+Amp liquid Media 25㎖에 접종하여 suspension culture를 했다. overnight culture를 한 후 LB+Amp liquid media 325㎖에 부었다. OD를 측정하기 위해서는 처음에 박테리아가 없는 것을 0으로 잡고 우리가 접종하여 키우던 것을 큐벳에 넣고 흡광도를 측정하면 된다. 2) 처음에 OD가 0.1이었고 2시간 후 0.2였다. 37℃에서 좀 더 culture하여 1시간 후 OD가 0.6가 되었다. 이 때 1mM의 IPTG 350㎕(1mM)를 넣은 후 15℃에서 8시간 동안 induction을 시킨다. 이 과정에서 IPTG.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 10. 7.

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  분자생물학실험 | 재조합 단백질 Taq DNA polymerase 발현, 정제 및 확인 실험 방법 1. 재조합 단백질 Taq DNA polymerase 발현 Ampicillin 배지 뒷면에 cell 이름, streaking한 날짜, 본인 이름 등을 써주고 여기에 streaking을 할 Cell stock을 얼음에 가져온다. 팁 끝을 살짝 알코올램프에 대어 주고 식힌 뒤 cell stock을 조금 묻혀 배지에 streaking 한다. 37℃ incubator에 streaking한 LB plate를 뒤집어 넣어 하루간 키운다. 그 다음날 plate를 꺼내 inoc㎕ation과정을 거쳐준다. 먼저 Conical tube에 라벨링을 해주고 (LB AMP 50㎖) LB 50㎖에 맞춰 항생제를 50㎍/㎖가 되게 넣고 위 아래로 흔든다. 그리고 유리실험관에 LB를 6㎖씩 분주해 줍니다. (총 4개) 하.. Biology/분자생물학 2021. 3. 8.