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  일반생물학실험 | 단백질 추출 및 정량 TIP  Cell에서 단백질을 추출하고 Bradford assay를 통해 이를 정량한다.   Coomassie Brilliant Blue G-250Bradford mathod에서 사용되는 염료이다. 산성 조건 하에서 갈색인 반면, 단백질과 결합하면 전체적으로 음전하를 띠며 푸른색으로 변하게 된다. 또한 이러한 성질 때문에 Polyacrylamide gel electrophoresis를 사용하여 단백질 또는 단백질 복합체를 분리하는데 사용할 수 있다. 단백질 농도가 많을수록 더욱 진한 파란색을 띤다. Coomassie Blue가 단백질에게 전자를 주어 단백질의 중성 상태를 무너뜨리면 단백질의 소수성 부위가 노출되는데, 노출된 부분에 Coomassie Blue가 비공유 결합을 이룬다. 또한 양전하를 띠는 아.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 5. 9.

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  일반생물학실험 | 단백질과 DNA의 정량 TIP 1. 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다 2. 대표적인 단백질 정량방법인 Bradford assay와 Lowry method를 이용하여 단백질을 정량 한다 3. DNA의 구조 및 DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다. Bradford Assay 1. 원 리 ① Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phe에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다 ② dye는 6개의 phenyl groups 과 2개의 sulfonic acid groups을 통해서 단백질과 결합한다. hydrophobic (Try.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 4.